Ứng dụng của cột C18AQ trong quá trình tinh chế các peptit phân cực mạnh

Thụy Hoàng, Bạc Xu
Trung tâm R&D ứng dụng

Giới thiệu
Peptide là một hợp chất bao gồm các axit amin, mỗi loại có các tính chất vật lý và hóa học độc đáo do các loại và thứ tự khác nhau của dư lượng axit amin cấu thành trình tự của nó.Với sự phát triển của tổng hợp hóa học pha rắn, quá trình tổng hợp hóa học của các peptide hoạt động khác nhau đã đạt được tiến bộ lớn.Tuy nhiên, do thành phần phức tạp của peptide thu được từ quá trình tổng hợp pha rắn, sản phẩm cuối cùng phải được tinh chế bằng các phương pháp tách đáng tin cậy.Các phương pháp tinh chế peptide thường được sử dụng bao gồm sắc ký trao đổi ion (IEC) và sắc ký lỏng hiệu năng cao pha đảo (RP-HPLC), có nhược điểm là khả năng tải mẫu thấp, chi phí môi trường tách cao, thiết bị tách phức tạp và tốn kém, v.v... Để tinh chế nhanh các peptit phân tử nhỏ (MW < 1 kDa), một trường hợp ứng dụng thành công đã được Santai Technologies công bố trước đây, trong đó hộp SepaFlash RP C18 được sử dụng để tinh chế nhanh thymopentin (TP-5) và sản phẩm mục tiêu đáp ứng các yêu cầu đã đạt được.

Hình 1. 20 axit amin phổ biến (sao chép từ www.bachem.com).

Có 20 loại axit amin phổ biến trong thành phần của peptit.Các axit amin này có thể được chia thành các nhóm sau theo tính phân cực và tính chất axit-bazơ của chúng: không phân cực (kỵ nước), phân cực (không tích điện), axit hoặc bazơ (như trong Hình 1).Trong một chuỗi peptit, nếu các axit amin cấu thành chuỗi hầu hết là các axit phân cực (như được đánh dấu bằng màu hồng trong Hình 1), chẳng hạn như Cysteine, Glutamine, Asparagine, Serine, Threonine, Tyrosine, v.v. thì peptit này có thể có tác dụng mạnh. phân cực và tan nhiều trong nước.Trong quá trình tinh chế các mẫu peptide phân cực mạnh này bằng sắc ký pha đảo ngược, một hiện tượng gọi là sự sụp đổ pha kỵ nước sẽ xảy ra (tham khảo ghi chú ứng dụng đã xuất bản trước đây của Santai Technologies: Sự sụp đổ pha kỵ nước, Cột sắc ký pha đảo ngược AQ và ứng dụng của chúng).So với các cột C18 thông thường, các cột C18AQ cải tiến phù hợp nhất để tinh chế các mẫu phân cực mạnh hoặc ưa nước.Trong bài đăng này, một peptide phân cực mạnh đã được sử dụng làm mẫu và được tinh chế bằng cột C18AQ.Kết quả là đã thu được sản phẩm mục tiêu đáp ứng các yêu cầu và có thể được sử dụng trong nghiên cứu và phát triển tiếp theo.