Ang Paggamit sa C18AQ Columns Sa Pagputli sa Kusog nga Polar Peptides

Rui Huang, Bo Xu
Application R&D Center

Pasiuna
Ang peptide usa ka compound nga gilangkuban sa mga amino acid, nga ang matag usa adunay talagsaon nga pisikal ug kemikal nga mga kabtangan tungod sa lainlaing mga klase ug han-ay sa mga residu sa amino acid nga naglangkob sa pagkasunod-sunod niini.Uban sa pag-uswag sa solid phase chemical synthesis, ang kemikal nga synthesis sa lainlaing mga aktibo nga peptide nakahimo og daghang pag-uswag.Bisan pa, tungod sa komplikado nga komposisyon sa peptide nga nakuha pinaagi sa solid phase synthesis, ang katapusan nga produkto kinahanglan nga putli pinaagi sa kasaligan nga mga pamaagi sa pagbulag.Ang kasagarang gigamit nga mga pamaagi sa pagputli alang sa mga peptide naglakip sa ion exchange chromatography (IEC) ug reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC), nga adunay mga disbentaha sa ubos nga sample loading capacity, taas nga gasto sa separation media, komplikado ug mahal nga separation equipment, ug uban pa. Alang sa paspas nga pagputli sa gagmay nga mga molekula nga peptide (MW <1 kDa), usa ka malampuson nga kaso sa aplikasyon ang gimantala kaniadto sa Santai Technologies, diin ang usa ka SepaFlash RP C18 nga cartridge gigamit alang sa paspas nga pagputli sa thymopentin (TP-5) ug ang Nakuha ang target nga produkto nga nagtagbo sa mga kinahanglanon.

Figure 1. 20 ka komon nga amino acids (gikopya gikan sa www.bachem.com).

Adunay 20 ka matang sa amino acids nga komon sa komposisyon sa mga peptide.Kini nga mga amino acid mahimong bahinon ngadto sa mosunod nga mga grupo sumala sa ilang polarity ug acid-base nga kabtangan: non-polar (hydrophobic), polar (walay bayad), acidic o basic (sama sa gipakita sa Figure 1).Sa usa ka peptide sequence, kung ang mga amino acid nga naglangkob sa sequence kasagaran polar (sama sa gimarkahan sa pink nga kolor sa Figure 1), sama sa Cysteine, Glutamine, Asparagine, Serine, Threonine, Tyrosine, ug uban pa nan kini nga peptide mahimong adunay lig-on polarity ug kaayo matunaw sa tubig.Atol sa pamaagi sa pagputli alang niining lig-on nga polar peptide nga mga sample pinaagi sa reversed-phase chromatography, mahitabo ang usa ka phenomenon nga gitawag og hydrophobic phase collapse (tan-awa ang usa ka kaniadto nga gimantala nga nota sa aplikasyon sa Santai Technologies: Hydrophobic Phase Collapse, AQ Reversed Phase Chromatography Columns ug Ilang mga Aplikasyon).Kung itandi sa regular nga mga kolum sa C18, ang gipaayo nga mga kolum sa C18AQ labing angay alang sa pagputli sa kusgan nga polar o hydrophilic nga mga sample.Sa kini nga post, usa ka kusgan nga polar peptide ang gigamit ingon sample ug giputli sa usa ka kolum nga C18AQ.Ingon usa ka sangputanan, ang target nga produkto nga nagtagbo sa mga kinahanglanon nakuha ug mahimong magamit sa mosunod nga panukiduki ug pag-uswag.