خبر بینر

خبرونه

د قوي پولر پیپټایډونو په پاکولو کې د C18AQ کالمونو کارول

د قوي پولر پیپټایډونو په پاکولو کې د C18AQ کالمونو کارول

روی هوانګ، بو سو
د غوښتنلیک R&D مرکز

پیژندنه
پیپټایډ یو مرکب دی چې د امینو اسیدونو څخه جوړ شوی چې هر یو یې ځانګړي فزیکي او کیمیاوي ملکیتونه لري د مختلف ډولونو او ترتیب له امله د امینو اسید پاتې شونو ترتیب ترتیبوي.د جامد پړاو کیمیاوي ترکیب په پراختیا سره، د مختلف فعال پیپټایډونو کیمیاوي ترکیب لوی پرمختګ کړی.په هرصورت، د پیپټایډ پیچلي جوړښت له امله چې د جامد پړاو ترکیب لخوا ترلاسه شوي، وروستی محصول باید د معتبر جلا کولو میتودونو لخوا پاک شي.د پیپټایډونو لپاره په عام ډول کارول شوي د پاکولو میتودونه د آیون ایکسچینج کروماتګرافي (IEC) او د بیرته راګرځیدو مرحله د لوړ فعالیت مایع کروماتګرافي (RP-HPLC) شامل دي ، کوم چې د ټیټ نمونې بارولو ظرفیت زیانونه لري ، د جلا کولو میډیا لوړ لګښت ، پیچلي او ګران جلا تجهیزات ، د کوچني مالیکول پیپټایډونو (MW <1 kDa) د ګړندي پاکولو لپاره ، دمخه د سانټای ټیکنالوژۍ لخوا د بریالۍ غوښتنلیک قضیه خپره شوې وه چې په کې د سیپا فلاش RP C18 کارتریج د تایموپینټین (TP-5) ګړندي پاکولو لپاره کارول شوی و. د هدف محصول چې اړتیاوې پوره کوي ترلاسه شوي.

شکل 1. 20 عام امینو اسیدونه (د www.bachem.com څخه بیا تولید شوي).

دلته 20 ډوله امینو اسیدونه شتون لري چې د پیپټایډونو په ترکیب کې عام دي.دا امینو اسیدونه د دوی د قطبي او تیزاب اساس ملکیت له مخې په لاندې ګروپونو ویشل کیدی شي: غیر قطبي (هایډروفوبیک)، قطبي (نه چارج شوی)، تیزابي یا بنسټیز (لکه څنګه چې په 1 شکل کې ښودل شوي).د پیپټایډ په ترتیب کې، که چیرې امینو اسیدونه چې ترتیب یې تشکیلوي ډیری یې قطبي وي (لکه څنګه چې په 1 شکل کې په ګلابي رنګ کې نښه شوي)، لکه سیستین، ګلوټامین، اسپرګین، سیرین، تریونین، ټایروسین، او داسې نور نو دا پیپټایډ ممکن قوي وي. قطبي او په اوبو کې خورا محلول وي.د دې قوي قطبي پیپټایډ نمونو لپاره د بیرته راګرځیدلي مرحلې کروماتګرافي په واسطه د پاکولو پروسې په جریان کې ، د هایدروفوبیک مرحلې سقوط په نوم یوه پیښه رامینځته کیږي (د سانتای ټیکنالوژیو لخوا دمخه خپاره شوي غوښتنلیک یادداشت ته مراجعه وکړئ: د هایدروفوبیک مرحلې سقوط ، د AQ بیرته راګرځیدونکي فیز کروماتګرافي کالمونه او دی).د منظم C18 کالمونو په پرتله، د C18AQ کالمونه د قوي پولر یا هایدروفیلیک نمونو پاکولو لپاره خورا مناسب دي.پدې پوسټ کې، یو قوي پولر پیپټایډ د نمونې په توګه کارول شوی او د C18AQ کالم لخوا پاک شوی.د پایلې په توګه، د هدف محصول چې اړتیاوې پوره کوي ترلاسه شوي او په لاندې څیړنو او پراختیا کې کارول کیدی شي.

تجربه برخه
په تجربه کې کارول شوي نمونه یو مصنوعي پیپټایډ و، کوم چې په مهربانۍ سره د پیرودونکي لابراتوار لخوا چمتو شوی و.پیپټایډ په MW کې شاوخوا 1 kDa و او په ترتیب کې د څو قطبي امینو اسید پاتې کیدو له امله قوي قطبیت لري.د خام نمونې پاکوالی شاوخوا 80٪ دی.د نمونې حل چمتو کولو لپاره، 60 ملی ګرامه سپینه پوډر خام نمونه په 5 ملی لیتر پاکو اوبو کې حل شوې او بیا الټراسونیک شوی ترڅو دا په بشپړ ډول روښانه محلول شي.د نمونې محلول بیا د انجیکټر لخوا د فلش کالم ته داخل شو.د فلش پاکولو تجربوي ترتیب په جدول 1 کې لیست شوی.

وسیله

سیپا بینماشین 2

کارتوسونه

12 g SepaFlash C18 RP فلش کارتریج (کروی سیلیکا، 20 - 45 μm، 100 Å، د ترتیب نمبر: SW-5222-012-SP)

12 g SepaFlash C18AQ RP فلش کارتریج (کروی سیلیکا، 20 - 45 μm، 100 Å، د ترتیب شمیره: SW-5222-012-SP(AQ))

طول موج

254 nm، 220 nm

214 nm

ګرځنده پړاو

محلول A: اوبه

محلول B: Acetonitrile

د بهېدنې کچه

15 ملی لیتر/ دقیقه

20 mL/min

د نمونې بارول

30 ملی ګرامه

تدریجي

وخت (CV)

محلول ب (٪)

وخت (دقیق)

محلول ب (٪)

0

0

0

4

۱.۰

0

۱.۰

4

10.0

6

7.5

18

12.5

6

13.0

18

16.5

10

14.0

22

19.0

41

15.5

22

۲۱.۰

41

18.0

38

/

/

20.0

38

22.0

87

۲۹.۰

87

جدول 1. د فلش پاکولو لپاره تجربوي ترتیب.

نتیجه او بحث
د منظم C18 کالم او C18AQ کالم ترمینځ د پولر پیپټایډ نمونې لپاره د پاکولو فعالیت پرتله کولو لپاره ، موږ د پیل په توګه د نمونې فلش پاکولو لپاره منظم C18 کالم وکاروو.لکه څنګه چې په 2 شکل کې ښودل شوي، د C18 زنځیرونو د هایدروفوبیک مرحلې سقوط له امله چې د لوړ آبی تناسب له امله رامینځته شوی، نمونه په منظمه توګه په منظم C18 کارتریج کې ساتل شوې وه او په مستقیم ډول د ګرځنده مرحلې لخوا ایستل شوې وه.د پایلې په توګه، نمونه په مؤثره توګه جلا او پاکه شوې نه وه.

شکل 2. د نمونې فلش کروماتګرام په منظم C18 کارتوس کې.

بیا، موږ د نمونې فلش پاکولو لپاره د C18AQ کالم کارولی.لکه څنګه چې په 3 شکل کې ښودل شوي، پیپټایډ په مؤثره توګه په کالم کې ساتل شوی او بیا بهر شوی.هدف محصول په خام نمونه کې د ناپاکۍ څخه جلا شوی او راټول شوی.د lyophilization وروسته او بیا د HPLC لخوا تحلیل شوي، پاک شوي محصول د 98.2٪ خالصیت لري او د راتلونکي ګام څیړنې او پراختیا لپاره کارول کیدی شي.

شکل 3. د نمونې فلش کروماتګرام په C18AQ کارتوس کې.

په پایله کې، د SepaFlash C18AQ RP فلش کارتریج د فلش کروماتګرافي سیسټم SepaBean سره یوځای شویماشین کولی شي د قوي پولر یا هایدروفیلیک نمونو پاکولو لپاره ګړندۍ او مؤثره حل وړاندې کړي.

د SepaFlash C18AQ RP فلش کارتوسونو په اړه

دلته د SepaFlash C18AQ RP فلش کارتوسونو لړۍ شتون لري چې د سانټای ټیکنالوژۍ څخه مختلف مشخصات لري (لکه څنګه چې په 2 جدول کې ښودل شوي).

د توکو شمیره

د کالم اندازه

د بهېدنې کچه

(mL/min)

Max.Pressure

(psi/bar)

SW-5222-004-SP(AQ)

5.4 ګرامه

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP(AQ)

20 ګرامه

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP(AQ)

33 ګرامه

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP(AQ)

48 ګرامه

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP(AQ)

105 ګرامه

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP(AQ)

155 ګرامه

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP(AQ)

300 ګرامه

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP(AQ)

420 ګرامه

40-80

250/17.2

جدول 2. د SepaFlash C18AQ RP فلش کارتوس.بسته بندي مواد: د لوړ موثریت کروی C18 (AQ) - بانډ شوی سیلیکا، 20 - 45 μm، 100 Å.

د SepaBean ™ ماشین تفصيلي مشخصاتو په اړه د نورو معلوماتو لپاره ، یا د SepaFlash لړۍ فلش کارتوسونو امر کولو معلوماتو لپاره ، مهرباني وکړئ زموږ ویب پا visitه وګورئ.


د پوسټ وخت: اکتوبر-12-2018