Rui huang, bo xu
Ilova R & D markazi
Kirish
Peptid - aminokislotalardan iborat birikma bo'lib, ularning har biri o'zining ketma-ketligi hosil bo'lgan aminokislotalar qoldiqlari va tartibi tufayli noyob fizik va kimyoviy xususiyatlarga ega. Qattiq fazali kimyoviy sintezi rivojlanishi bilan turli faol peptidlar kimyoviy sintezi katta yutuqlarga erishdi. Biroq, Peptidning murakkab tarkibiy tarkibi tufayli yakuniy mahsulot ishonchli ajratish usullari bilan tozalanishi kerak. Kichkina molekulasining (MW <1 KDA) ning kamligi past bo'lgan ion birja xromatografiyasi (IEC) va tokchalar, murakkab va qimmatbaho ajratilgan suyuqlik uskunalari va hokazolar, bu avvalgi Santay Technalarni tez tozalash uchun ishlatiladi Sepaflash RP C18 kartriji Timopentinni tez tozalash uchun ishlatiladi (TP-5) va talablarga maqsadli mahsulot olindi.
1-rasm. 20 keng tarqalgan aminokislotalar (www.bachem.com saytidan olingan).
Peptidlar tarkibida keng tarqalgan aminokislotalarning 20 turi mavjud. Ushbu aminokislotalar Quyidagi guruhlarga ularni poligo va kislota-beton Mulkiga bo'linishi mumkin: qutbsiz (gidrofobik), qutbli yoki asosiy (1-rasmda ko'rsatilganidek). Peptid ketma-ketligida, agar ketma-ketlik bo'lsa, pufakchalar (1-rasmda pushti rangdagi pushti rangda), masalan, bu peptid kuchli qutb bo'lishi va suvda juda eriydi. Tushuntirilgan polar xromatografiya bo'yicha peshin polar podalari pirdid prepid protsedurasi, gidrofob fazasi yassi deb ataladigan hodisalar paydo bo'ladi (ARDrofob fazasi) xromatografiya ustunlari va ularning arizalari. C18 ustuni bilan taqqoslaganda, C18aqli ustunlar kuchli qutb yoki gidofil namunalarni tozalash uchun eng mos keladi. Ushbu lavozimda polar peptidi namuna sifatida ishlatilgan va C18Q ustun tomonidan tozalangan. Natijada talablar bo'yicha maqsadli mahsulot quyidagi tadqiqotlar va rivojlanishda olinishi mumkin.
| Asbob | Sepabodiyon™2-mashina | |||
| Patron | 12 g sepaflash C18 RP Flash kartriumi (Sperical kremniy, 20 - 45 mkm, 100 Å, buyurtma Nunber: SW-522-012-SP) | 12 g sepaflash C18oq RP Litragri (Sperik krilbin, 20 - 45 mkm, 100 Å, buyurtma raqami: SW-5222-012-SP (AK) | ||
| To'lqin uzunligi | 254 nm, 220 nm | 214 nm | ||
| Mobil faza | Solvent a: suv Solvent B: Atetonitra | |||
| Oqim darajasi | 15 ml / min | 20 ml / min | ||
| Namunaviy yuklash | 30 mg | |||
| Gradient | Vaqt (rezerv) | Hal qiluvchi b (%) | Vaqt (min) | Hal qiluvchi b (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13,0 | 18 | |
| 16.5.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15,5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18,0 | 38 | |
| / | / | 20,0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29,0 | 87 | |||
Natijalar va muhokama
Oddiy C18 ustuni va C18aq Ukul orasidagi qutbli peptid pechkali namunasini taqqoslash uchun biz namunaning flesh-ni boshlash uchun oddiy C18 ustunini taqqoslaymiz. 2-rasmda ko'rsatilgandek, yuqori suvli nisbati tufayli gidrofobcha zanjirlar yiqilganligi sababli, namuna C18 kartrijida ushlab turilgan va mobil fazada bevosita ajratilgan. Natijada, namuna samarali ajratilmagan va tozalanmagan.
2-rasm. Oddiy C18 kartrijidagi namunaning flesh xromatogrammasi.
Keyinchalik biz namunaning milt-milt tozalash uchun C18oq ustunidan foydalandik. 3-rasmda ko'rsatilgandek, peptid ustunga samarali saqlanib qoldi va keyin taniqli bo'ldi. Maqsadli mahsulot xom namunaning aralashmasidan ajratilgan va yig'ilgan. Liyofilizatsiyadan so'ng, keyin XPLC tomonidan tahlil qilingandan so'ng, tozalangan mahsulot 98,2% ga to'g'ri keladi va keyingi bosqichli tadqiqot va ishlab chiqilishi uchun undan foydalanish mumkin.
3-rasm. C18oq kartrijidagi namunaning chiqish xromatogrammasi.
Xulosa qilib aytganda, Sepaflash C18aq RP Litridj Sepabian Flash xromatografiya tizimi bilan birlashtirilgan™Mashina kuchli qutb yoki gidofil namunalarni tozalash uchun tez va samarali echimni taklif qilishi mumkin.
Santay texnologiyasidan (2-jadvalda ko'rsatilganidek, 2-jadvalda ko'rsatilganidek) Sepaflash C18aq RP Litridjlari mavjud.
| Element raqami | Ustun hajmi | Oqim darajasi (ml / min) | Maks.pressure (PSI / bar) |
| SW-5222-004-SP (AK) | 5.4 g | 5-15 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-012-SP (AK) | 20 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-025-SP (AK) | 33 g | 10-25 | 400 / 27.5 |
| SW-522-0040-SP (AK) | 48 g | 15-30 | 400 / 27.5 |
| SW-5222-080-SP (AK) | 105 g | 25-50 | 350 / 24.0 |
| SW-5222-120-SP (AK) | 155 g | 30-60 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-220-SP (AK) | 300 g | 40-80 | 300 / 20.7 |
| SW-5222-330-SP (AK) | 420 g | 40-80 | 250 / 17.2 |
2-jadval. Sepaflash C18aq RP RP Literges. Qadoqlash materiallari: Yuqori samaradorlik skrital C18 (AQ) - 20 - 45 mkm, 100 - 45 mkm, 100 Å.
Sepabodiy ™ mashinasining yoki seepaflash seriyasining batafsil ma'lumotlari to'g'risida qo'shimcha ma'lumot olish uchun veb-saytimizga tashrif buyuring.
Post vaqti: oktyabr 12.2018