రూయి హువాంగ్, బో జు
అప్లికేషన్ R&D సెంటర్
పరిచయం
పెప్టైడ్ అనేది అమైనో ఆమ్లాలతో కూడిన సమ్మేళనం, వీటిలో ప్రతి ఒక్కటి ప్రత్యేకమైన భౌతిక మరియు రసాయన లక్షణాలను కలిగి ఉంటాయి, ఎందుకంటే వివిధ రకాలు మరియు అమైనో ఆమ్ల అవశేషాల క్రమం దాని క్రమాన్ని కలిగి ఉంటుంది. ఘన దశ రసాయన సంశ్లేషణ అభివృద్ధితో, వివిధ క్రియాశీల పెప్టైడ్ల యొక్క రసాయన సంశ్లేషణ గొప్ప పురోగతి సాధించింది. ఏదేమైనా, ఘన దశ సంశ్లేషణ ద్వారా పొందిన పెప్టైడ్ యొక్క సంక్లిష్టమైన కూర్పు కారణంగా, తుది ఉత్పత్తిని నమ్మకమైన విభజన పద్ధతుల ద్వారా శుద్ధి చేయాలి. పెప్టైడ్ల కోసం సాధారణంగా ఉపయోగించే శుద్దీకరణ పద్ధతుల్లో అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (IEC) మరియు రివర్స్డ్-ఫేజ్ హై పెర్ఫార్మెన్స్ లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (RP-HPLC) ఉన్నాయి, ఇవి తక్కువ నమూనా లోడింగ్ సామర్థ్యం యొక్క ప్రతికూలతలు, విభజన మీడియా యొక్క అధిక వ్యయం, సంక్లిష్టమైన మరియు ఖరీదైన విభజన పరికరాలు మొదలైనవి. దీనిలో సెపాఫ్లాష్ RP C18 గుళిక థైమోపెంటిన్ (TP-5) యొక్క వేగవంతమైన శుద్దీకరణ కోసం ఉపయోగించబడింది మరియు అవసరాలను తీర్చడానికి లక్ష్య ఉత్పత్తి పొందబడింది.
మూర్తి 1. 20 సాధారణ అమైనో ఆమ్లాలు (www.bachem.com నుండి పునరుత్పత్తి).
పెప్టైడ్ల కూర్పులో 20 రకాల అమైనో ఆమ్లాలు సాధారణం. ఈ అమైనో ఆమ్లాలను వాటి ధ్రువణత మరియు యాసిడ్-బేస్ ఆస్తి ప్రకారం ఈ క్రింది సమూహాలుగా విభజించవచ్చు: ధ్రువ రహిత (హైడ్రోఫోబిక్), ధ్రువ (అన్చార్జ్డ్), ఆమ్ల లేదా ప్రాథమిక (మూర్తి 1 లో చూపిన విధంగా). పెప్టైడ్ క్రమంలో, అమైనో ఆమ్లాలు క్రమం ఎక్కువగా ఉంటే (మూర్తి 1 లో గులాబీ రంగులో గుర్తించినట్లు), సిస్టీన్, గ్లూటామైన్, ఆస్పరాజిన్, సెరైన్, థ్రెయోనిన్, టైరోసిన్ మొదలైనవి. రివర్స్డ్-ఫేజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా ఈ బలమైన ధ్రువ పెప్టైడ్ నమూనాల శుద్దీకరణ విధానంలో, హైడ్రోఫోబిక్ దశ పతనం అని పిలువబడే ఒక దృగ్విషయం సంభవిస్తుంది (శాంటాయ్ టెక్నాలజీస్ గతంలో ప్రచురించిన అప్లికేషన్ నోట్: హైడ్రోఫోబిక్ ఫేజ్ పతనం, AQ రివర్స్డ్ ఫేజ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కొలమ్స్ మరియు వాటి అనువర్తనాలు చూడండి). సాధారణ C18 నిలువు వరుసలతో పోలిస్తే, బలమైన ధ్రువ లేదా హైడ్రోఫిలిక్ నమూనాల శుద్దీకరణకు మెరుగైన C18AQ నిలువు వరుసలు చాలా అనుకూలంగా ఉంటాయి. ఈ పోస్ట్లో, బలమైన ధ్రువ పెప్టైడ్ను నమూనాగా ఉపయోగించారు మరియు C18AQ కాలమ్ ద్వారా శుద్ధి చేశారు. తత్ఫలితంగా, లక్ష్య ఉత్పత్తి అవసరాలను తీర్చడం పొందబడింది మరియు క్రింది పరిశోధన మరియు అభివృద్ధిలో ఉపయోగించవచ్చు.
| పరికరం | సెపాబీన్™యంత్రం 2 | |||
| గుళికలు | 12 గ్రా సెపాఫ్లాష్ C18 RP ఫ్లాష్ కార్ట్రిడ్జ్ (గోళాకార సిలికా, 20-45 μm, 100 Å, ఆర్డర్ సన్యాసిని ： SW-5222-012-SP) | 12 గ్రా సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ కార్ట్రిడ్జ్ (గోళాకార సిలికా, 20-45 μm, 100 Å, ఆర్డర్ సంఖ్య ： SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| తరంగదైర్ఘ్యం | 254 ఎన్ఎమ్, 220 ఎన్ఎమ్ | 214 ఎన్ఎమ్ | ||
| మొబైల్ దశ | ద్రావకం A: నీరు ద్రావకం B: అసిటోనిట్రైల్ | |||
| ప్రవాహం రేటు | 15 మి.లీ/నిమి | 20 మి.లీ/నిమి | ||
| నమూనా లోడింగ్ | 30 మి.గ్రా | |||
| ప్రవణత | సమయం (సివి) | ద్రావకం B (%) | సమయం (నిమి) | ద్రావకం B (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
ఫలితాలు మరియు చర్చ
సాధారణ C18 కాలమ్ మరియు C18AQ కాలమ్ మధ్య ధ్రువ పెప్టైడ్ నమూనా కోసం శుద్దీకరణ పనితీరును పోల్చడానికి, మేము ప్రారంభంగా నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ శుద్దీకరణ కోసం సాధారణ C18 కాలమ్ను ఉపయోగించాము. మూర్తి 2 లో చూపినట్లుగా, అధిక సజల నిష్పత్తి వల్ల కలిగే C18 గొలుసుల హైడ్రోఫోబిక్ దశ పతనం కారణంగా, నమూనా సాధారణ C18 గుళికపై మాత్రమే ఉంచబడలేదు మరియు మొబైల్ దశ ద్వారా నేరుగా తొలగించబడింది. ఫలితంగా, నమూనా సమర్థవంతంగా వేరు చేయబడలేదు మరియు శుద్ధి చేయబడలేదు.
మూర్తి 2. సాధారణ C18 గుళికపై నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రామ్.
తరువాత, మేము నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ శుద్దీకరణ కోసం C18AQ కాలమ్ను ఉపయోగించాము. మూర్తి 3 లో చూపినట్లుగా, పెప్టైడ్ కాలమ్లో సమర్థవంతంగా ఉంచబడింది మరియు తరువాత తొలగించబడింది. లక్ష్య ఉత్పత్తి ముడి నమూనాలోని మలినాల నుండి వేరు చేసి సేకరించబడింది. లైయోఫైలైజేషన్ తరువాత మరియు తరువాత హెచ్పిఎల్సి విశ్లేషించిన తరువాత, శుద్ధి చేసిన ఉత్పత్తి 98.2% స్వచ్ఛతను కలిగి ఉంది మరియు తదుపరి దశ పరిశోధన మరియు అభివృద్ధి కోసం మరింత ఉపయోగించబడుతుంది.
మూర్తి 3. C18AQ గుళికపై నమూనా యొక్క ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రామ్.
ముగింపులో, సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ కార్ట్రిడ్జ్ ఫ్లాష్ క్రోమాటోగ్రఫీ సిస్టమ్ సెపాబీన్తో కలిపి™బలమైన ధ్రువ లేదా హైడ్రోఫిలిక్ నమూనాల శుద్దీకరణకు యంత్రం వేగవంతమైన మరియు ప్రభావవంతమైన పరిష్కారాన్ని అందిస్తుంది.
శాంటాయ్ టెక్నాలజీ నుండి వేర్వేరు స్పెసిఫికేషన్లతో సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికల శ్రేణి ఉన్నాయి (టేబుల్ 2 లో చూపిన విధంగా).
| అంశం సంఖ్య | కాలమ్ పరిమాణం | ప్రవాహం రేటు (ML/min) | గరిష్టంగా (psi/బార్) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 గ్రా | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 గ్రా | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 గ్రా | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 గ్రా | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 గ్రా | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120 SP (AQ) | 155 గ్రా | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220 SP (AQ) | 300 గ్రా | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (aq) | 420 గ్రా | 40-80 | 250/17.2 |
టేబుల్ 2. సెపాఫ్లాష్ C18AQ RP ఫ్లాష్ గుళికలు. ప్యాకింగ్ పదార్థాలు: అధిక-సామర్థ్యం గోళాకార C18 (AQ)-బాండెడ్ సిలికా, 20-45 μm, 100 Å.
సెపాబీన్ ™ మెషిన్ యొక్క వివరణాత్మక స్పెసిఫికేషన్లు లేదా సెపాఫ్లాష్ సిరీస్ ఫ్లాష్ గుళికలపై ఆర్డరింగ్ సమాచారం గురించి మరింత సమాచారం కోసం, దయచేసి మా వెబ్సైట్ను సందర్శించండి.
పోస్ట్ సమయం: అక్టోబర్ -12-2018