ರುಯಿ ಹುವಾಂಗ್, ಬೊ ಕ್ಸು
ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಆರ್ & ಡಿ ಕೇಂದ್ರ
ಪರಿಚಯ
ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಎನ್ನುವುದು ಅಮೈನೊ ಆಮ್ಲಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದ ಸಂಯುಕ್ತವಾಗಿದೆ, ಪ್ರತಿಯೊಂದೂ ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ದೈಹಿಕ ಮತ್ತು ರಾಸಾಯನಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ರೂಪಿಸುವ ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಅವಶೇಷಗಳ ವಿವಿಧ ಪ್ರಕಾರಗಳು ಮತ್ತು ಕ್ರಮದಿಂದಾಗಿ. ಘನ ಹಂತದ ರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯೊಂದಿಗೆ, ವಿವಿಧ ಸಕ್ರಿಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ಗಳ ರಾಸಾಯನಿಕ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಗತಿ ಸಾಧಿಸಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಘನ ಹಂತದ ಸಂಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ ಪಡೆದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ನ ಸಂಕೀರ್ಣ ಸಂಯೋಜನೆಯಿಂದಾಗಿ, ಅಂತಿಮ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹ ಬೇರ್ಪಡಿಸುವ ವಿಧಾನಗಳಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಬೇಕು. ಪೆಪ್ಟೈಡ್ಗಳಿಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಬಳಸುವ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಅಯಾನ್ ಎಕ್ಸ್ಚೇಂಜ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (ಐಇಸಿ) ಮತ್ತು ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಹೈ ಪರ್ಫಾರ್ಮೆನ್ಸ್ ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (ಆರ್ಪಿ-ಎಚ್ಪಿಎಲ್ಸಿ), ಕಡಿಮೆ ಮಾದರಿ ಲೋಡಿಂಗ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಅನಾನುಕೂಲಗಳು, ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯ ಮಾಧ್ಯಮದ ಹೆಚ್ಚಿನ ವೆಚ್ಚ, ಸಂಕೀರ್ಣ ಮತ್ತು ವೆಚ್ಚದಾಯಕ ಬೇರ್ಪಡಿಕೆ ಉಪಕರಣಗಳು, ಇತ್ಯಾದಿ ಥೈಮೋಪೆಂಟಿನ್ (ಟಿಪಿ -5) ನ ತ್ವರಿತ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಆರ್ಪಿ ಸಿ 18 ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಪಡೆಯುವ ಗುರಿ ಉತ್ಪನ್ನ ಸಭೆ.
ಚಿತ್ರ 1. 20 ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳು (www.bachem.com ನಿಂದ ಪುನರುತ್ಪಾದನೆ).
ಪೆಪ್ಟೈಡ್ಗಳ ಸಂಯೋಜನೆಯಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 20 ರೀತಿಯ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳಿವೆ. ಈ ಅಮೈನೋ ಆಮ್ಲಗಳನ್ನು ಅವುಗಳ ಧ್ರುವೀಯತೆ ಮತ್ತು ಆಮ್ಲ-ಬೇಸ್ ಆಸ್ತಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಈ ಕೆಳಗಿನ ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಬಹುದು: ಧ್ರುವೇತರ (ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್), ಧ್ರುವೀಯ (ಚಾರ್ಜ್ ಮಾಡದ), ಆಮ್ಲೀಯ ಅಥವಾ ಮೂಲ (ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ). ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಅನುಕ್ರಮದಲ್ಲಿ, ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ರಚಿಸುವ ಅಮೈನೊ ಆಮ್ಲಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಧ್ರುವೀಯವಾಗಿದ್ದರೆ (ಚಿತ್ರ 1 ರಲ್ಲಿ ಗುಲಾಬಿ ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ), ಉದಾಹರಣೆಗೆ ಸಿಸ್ಟೀನ್, ಗ್ಲುಟಾಮಿನ್, ಶತಾವರಿ, ಸೆರೈನ್, ಥ್ರೆಯೋನೈನ್, ಟೈರೋಸಿನ್, ಇತ್ಯಾದಿ. ರಿವರ್ಸ್ಡ್-ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ಈ ಬಲವಾದ ಧ್ರುವೀಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಾದರಿಗಳ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವಿಧಾನದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಹಂತದ ಕುಸಿತ ಎಂದು ಕರೆಯಲ್ಪಡುವ ಒಂದು ವಿದ್ಯಮಾನವು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ (ಸಂತೈ ಟೆಕ್ನಾಲಜೀಸ್ನಿಂದ ಹಿಂದೆ ಪ್ರಕಟವಾದ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ ಟಿಪ್ಪಣಿಯನ್ನು ನೋಡಿ: ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಹಂತದ ಕುಸಿತ, ಎಕ್ಯೂ ರಿವರ್ಸ್ಡ್ ಫೇಸ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಕೊಲಿಮ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಅನ್ವಯಗಳು). ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಿ 18 ಕಾಲಮ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಸುಧಾರಿತ ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಕಾಲಮ್ಗಳು ಬಲವಾದ ಧ್ರುವ ಅಥವಾ ಹೈಡ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಮಾದರಿಗಳ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚು ಸೂಕ್ತವಾಗಿವೆ. ಈ ಪೋಸ್ಟ್ನಲ್ಲಿ, ಬಲವಾದ ಧ್ರುವೀಯ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಮಾದರಿಯಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು ಮತ್ತು C18AQ ಕಾಲಂನಿಂದ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಅವಶ್ಯಕತೆಗಳನ್ನು ಗುರಿ ಉತ್ಪನ್ನ ಸಭೆ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಬಹುದು.
| ಸಾಧನ | ಸಮಾಧಿಯ™ಯಂತ್ರ 2 | |||
| ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳು | 12 ಗ್ರಾಂ ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸಿ 18 ಆರ್ಪಿ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ (ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಿಲಿಕಾ, 20-45 μm, 100 Å, ಆರ್ಡರ್ ನನ್ಬರ್ ： SW-5222-012-SP) | 12 ಗ್ರಾಂ ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಆರ್ಪಿ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ (ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಿಲಿಕಾ, 20-45 μm, 100 Å, ಆರ್ಡರ್ ಸಂಖ್ಯೆ ： SW-5222-012-SP (AQ)) | ||
| ತರಂಗಾಂತರ | 254 ಎನ್ಎಂ, 220 ಎನ್ಎಂ | 214 ಎನ್ಎಂ | ||
| ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತ | ದ್ರಾವಕ ಎ: ನೀರು ದ್ರಾವಕ ಬಿ: ಅಸಿಟೋನಿಟ್ರಿಲ್ | |||
| ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ | 15 ಮಿಲಿ/ನಿಮಿಷ | 20 ಮಿಲಿ/ನಿಮಿಷ | ||
| ಮಾದರಿ ಲೋಡಿಂಗ್ | 30 ಮಿಗ್ರಾಂ | |||
| ತಳಹದ | ಸಮಯ (ಸಿ.ವಿ) | ದ್ರಾವಕ ಬಿ (%) | ಸಮಯ (ನಿಮಿಷ) | ದ್ರಾವಕ ಬಿ (%) |
| 0 | 0 | 0 | 4 | |
| 1.0 | 0 | 1.0 | 4 | |
| 10.0 | 6 | 7.5 | 18 | |
| 12.5 | 6 | 13.0 | 18 | |
| 16.5 | 10 | 14.0 | 22 | |
| 19.0 | 41 | 15.5 | 22 | |
| 21.0 | 41 | 18.0 | 38 | |
| / | / | 20.0 | 38 | |
| 22.0 | 87 | |||
| 29.0 | 87 | |||
ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಚರ್ಚೆ
ನಿಯಮಿತ ಸಿ 18 ಕಾಲಮ್ ಮತ್ತು ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಕಾಲಮ್ ನಡುವಿನ ಧ್ರುವ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಮಾದರಿಯ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ಕಾರ್ಯಕ್ಷಮತೆಯನ್ನು ಹೋಲಿಸಲು, ನಾವು ಮಾದರಿಯ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಿ 18 ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭವಾಗಿ ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಚಿತ್ರ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಜಲೀಯ ಅನುಪಾತದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಸಿ 18 ಸರಪಳಿಗಳ ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ ಹಂತದ ಕುಸಿತದಿಂದಾಗಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಿ 18 ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ನಲ್ಲಿ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಮೊಬೈಲ್ ಹಂತದಿಂದ ನೇರವಾಗಿ ಹೊರಹಾಕಲಾಯಿತು. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ.
ಚಿತ್ರ 2. ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಿ 18 ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ನಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್.
ಮುಂದೆ, ಮಾದರಿಯ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ನಾವು C18AQ ಕಾಲಮ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಚಿತ್ರ 3 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ, ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಅನ್ನು ಕಾಲಂನಲ್ಲಿ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ ಹೊರಹಾಕಲಾಯಿತು. ಗುರಿ ಉತ್ಪನ್ನವನ್ನು ಕಚ್ಚಾ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿನ ಕಲ್ಮಶಗಳಿಂದ ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಲೈಫೈಲೈಸೇಶನ್ ನಂತರ ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಚ್ಪಿಎಲ್ಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ನಂತರ, ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಉತ್ಪನ್ನವು 98.2% ನಷ್ಟು ಶುದ್ಧತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಮತ್ತು ಮುಂದಿನ ಹಂತದ ಸಂಶೋಧನೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಗೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಬಳಸಿಕೊಳ್ಳಬಹುದು.
ಚಿತ್ರ 3. ಸಿ 18 ಎಕ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ನಲ್ಲಿ ಮಾದರಿಯ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಾಮ್.
ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಆರ್ಪಿ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಡ್ಜ್ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಸೆಪಾಬೀನ್ ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ™ಬಲವಾದ ಧ್ರುವ ಅಥವಾ ಹೈಡ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಮಾದರಿಗಳ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಯಂತ್ರವು ವೇಗವಾಗಿ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ನೀಡಬಹುದು.
ಸಂತೈ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ವಿಭಿನ್ನ ವಿಶೇಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಆರ್ಪಿ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳ ಸರಣಿಗಳಿವೆ (ಟೇಬಲ್ 2 ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ).
| ಐಟಂ ಸಂಖ್ಯೆ | ಕಾಲಮ್ ಗಾತ್ರ | ಹರಿವಿನ ಪ್ರಮಾಣ (ಎಂಎಲ್/ನಿಮಿಷ) | ಗರಿಷ್ಠ. (ಪಿಎಸ್ಐ/ಬಾರ್) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 ಗ್ರಾಂ | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 ಗ್ರಾಂ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 ಗ್ರಾಂ | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 ಗ್ರಾಂ | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 ಗ್ರಾಂ | 25-50 | 350/24.0 |
| ಎಸ್ಡಬ್ಲ್ಯು -5222-120-ಎಸ್ಪಿ (ಎಕ್ಯೂ) | 155 ಗ್ರಾಂ | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP (AQ) | 300 ಗ್ರಾಂ | 40-80 | 300/20.7 |
| ಎಸ್ಡಬ್ಲ್ಯು -5222-330-ಎಸ್ಪಿ (ಎಕ್ಯೂ) | 420 ಗ್ರಾಂ | 40-80 | 250/17.2 |
ಕೋಷ್ಟಕ 2. ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸಿ 18 ಎಕ್ಯೂ ಆರ್ಪಿ ಫ್ಲ್ಯಾಶ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳು. ಪ್ಯಾಕಿಂಗ್ ವಸ್ತುಗಳು: ಹೆಚ್ಚಿನ-ದಕ್ಷತೆಯ ಗೋಳಾಕಾರದ ಸಿ 18 (ಎಕ್ಯೂ) -ಬಾಂಡೆಡ್ ಸಿಲಿಕಾ, 20-45 μm, 100 Å.
ಸೆಪಾಬೀನ್ ™ ಯಂತ್ರದ ವಿವರವಾದ ವಿಶೇಷಣಗಳು ಅಥವಾ ಸೆಪಾಫ್ಲಾಶ್ ಸರಣಿಯ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಕಾರ್ಟ್ರಿಜ್ಗಳ ಆದೇಶದ ಮಾಹಿತಿಗಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಾಹಿತಿಗಾಗಿ, ದಯವಿಟ್ಟು ನಮ್ಮ ವೆಬ್ಸೈಟ್ಗೆ ಭೇಟಿ ನೀಡಿ.
ಪೋಸ್ಟ್ ಸಮಯ: ಅಕ್ಟೋಬರ್ -12-2018