Banner lajmesh

Lajme

Aplikimi i kolonave të kromatografisë së shkëmbimit të anionit të fortë SepaFlash në pastrimin e përbërjeve acide

Aplikimi i SepaFlash Strong

Rui Huang, Bo Xu
Qendra e Kërkimit dhe Zhvillimit të Aplikimit

Prezantimi
Kromatografia e shkëmbimit të joneve (IEC) është një metodë kromatografike që përdoret zakonisht për të ndarë dhe pastruar komponimet të cilat paraqiten në formë jonike në tretësirë.Sipas gjendjeve të ndryshme të ngarkesës së joneve të shkëmbyeshëm, IEC mund të ndahet në dy lloje, kromatografia e shkëmbimit të kationeve dhe kromatografia e shkëmbimit të anionit.Në kromatografinë e shkëmbimit të kationeve, grupet acidike janë të lidhura në sipërfaqen e mjedisit ndarës.Për shembull, acidi sulfonik (-SO3H) është një grup i përdorur zakonisht në shkëmbimin e kationeve të fortë (SCX), i cili disocion H+ dhe grupi i ngarkuar negativisht -SO3- mund të thithë kështu katione të tjera në tretësirë.Në kromatografinë e shkëmbimit të anionit, grupet alkaline janë të lidhura në sipërfaqen e mediave ndarëse.Për shembull, amina kuaternare (-NR3OH, ku R është grup hidrokarburesh) përdoret zakonisht në shkëmbimin e fortë të anionit (SAX), i cili disocion OH- dhe grupi i ngarkuar pozitivisht -N+R3 mund të absorbojë anione të tjera në tretësirë, duke rezultuar në anion efekt shkëmbimi.

Ndër produktet natyrale, flavonoidet kanë tërhequr vëmendjen e studiuesve për shkak të rolit të tyre në parandalimin dhe trajtimin e sëmundjeve kardiovaskulare.Meqenëse molekulat e flavonoideve janë acide për shkak të pranisë së grupeve fenolike hidroksil, kromatografia e shkëmbimit të joneve është një opsion alternativ përveç kromatografisë konvencionale të fazës normale ose të fazës së kundërt për ndarjen dhe pastrimin e këtyre përbërjeve acidike.Në kromatografinë flash, media ndarëse e përdorur zakonisht për shkëmbimin e joneve është matrica e xhelit të silicës ku grupet e shkëmbimit të joneve janë të lidhura në sipërfaqen e saj.Mënyrat më të përdorura të shkëmbimit të joneve në kromatografinë flash janë SCX (zakonisht grupi i acidit sulfonik) dhe SAX (zakonisht grupi i aminave kuaternar).Në shënimin e aplikacionit të publikuar më parë me titullin "Aplikimi i kolonave të kromatografisë së shkëmbimit të kationeve të fortë SepaFlash në pastrimin e përbërjeve alkaline" nga Santai Technologies, kolonat SCX u përdorën për pastrimin e përbërjeve alkaline.Në këtë postim, një përzierje e standardeve neutrale dhe acide u përdor si mostër për të eksploruar aplikimin e kolonave SAX në pastrimin e përbërjeve acidike.

Seksioni Eksperimental

Figura 1. Diagrami skematik i fazës stacionare të lidhur me sipërfaqen e mediave ndarëse SAX.

Në këtë postim, u përdor një kolonë SAX e para-paketuar me silicë të lidhur me amine kuaternare (siç tregohet në Figurën 1).Një përzierje e kromonit dhe acidit 2,4-dihidroksibenzoik u përdor si mostër për t'u pastruar (siç tregohet në figurën 2).Përzierja u tret në metanol dhe u ngarkua në fishekun flash me një injektor.Konfigurimi eksperimental i pastrimit flash është renditur në Tabelën 1.

Figura 2. Struktura kimike e dy komponentëve në përzierjen e mostrës.

Instrumenti

Makina SepaBean™ T

fishekë

Fishekë blici e Serisë Standarde SepaFlash 4 g (silicë e parregullt, 40 - 63 μm, 60 Å, numri i porosisë: S-5101-0004)

Fishekë flash SAX 4 g SepaFlash Bonded Series (silicë e parregullt, 40 - 63 μm, 60 Å, numri i porosisë:SW-5001-004-IR)

Gjatësia e valës

254 nm (zbulim), 280 nm (monitorim)

Faza e lëvizshme

Tretësi A: N-heksan

Tretësi B: Etil acetat

Shkalla e rrjedhjes

30 ml/min

20 ml/min

Ngarkimi i mostrës

20 mg (një përzierje e Komponentit A dhe Komponentit B)

Gradient

Koha (CV)

Tretësi B (%)

Koha (CV)

Tretësi B (%)

0

0

0

0

1.7

12

14

100

3.7

12

/

/

16

100

/

/

18

100

/

/

Rezultate dhe diskutime

Së pari, përzierja e kampionit u nda nga një fishek flash me fazë normale të parapaketuar me silicë të rregullt.Siç tregohet në figurën 3, dy komponentët në kampion u eluan nga fisheku njëri pas tjetrit.Më pas, një fishek flash SAX u përdor për pastrimin e kampionit.Siç tregohet në figurën 4, Komponenti B acid u mbajt plotësisht në fishekun SAX.Komponenti neutral A u elua gradualisht nga fisheku me elucionin e fazës së lëvizshme.

Figura 3. Kromatogrami flash i kampionit në një fishek të rregullt me ​​fazë normale.

Figura 4. Kromatogrami flash i kampionit në një fishek SAX.
Duke krahasuar Figurën 3 dhe Figurën 4, Komponenti A ka formë të paqëndrueshme të majës në dy fishekë të ndryshëm të blicit.Për të konfirmuar nëse kulmi i elucionit korrespondon me komponentin, ne mund të përdorim funksionin e skanimit me gjatësi të plotë vale, i cili është i integruar në softuerin e kontrollit të makinës SepaBean™.Hapni të dhënat eksperimentale të dy ndarjeve, tërhiqni në vijën treguese në boshtin e kohës (CV) në kromatogram deri në pikën më të lartë dhe pikën e dytë më të lartë të pikut të elucionit që korrespondon me Komponentin A dhe spektrin e plotë të gjatësisë valore të këtyre dyve pikat do të shfaqen automatikisht poshtë kromatogramit (siç tregohet në Figurën 5 dhe Figura 6).Duke krahasuar të dhënat e spektrit të plotë të gjatësisë valore të këtyre dy ndarjeve, Komponenti A ka spektër të qëndrueshëm të përthithjes në dy eksperimente.Për arsye se Komponenti A ka formë të paqëndrueshme të majës në dy fishekë të ndryshëm blici, supozohet se ka papastërti specifike në komponentin A i cili ka mbajtje të ndryshme në fishekun e fazës normale dhe fishekun SAX.Prandaj, sekuenca e elucionit është e ndryshme për Komponentin A dhe papastërtitë në këto dy fishekë flash, duke rezultuar në formë jokonsistente të majës në kromatogramë.

Figura 5. Spektri i gjatësisë valore të plotë të komponentit A dhe papastërtia e ndarë nga fisheku i fazës normale.

Figura 6. Spektri i plotë i gjatësisë valore të komponentit A dhe papastërtia e ndarë me fishekun SAX.

Nëse produkti i synuar që do të mblidhet është Komponenti A neutral, detyra e pastrimit mund të kryhet lehtësisht duke përdorur direkt fishekun SAX për elucionin pas ngarkimit të mostrës.Nga ana tjetër, nëse produkti i synuar që do të mblidhet është Komponenti B acidik, mënyra e kapjes-lirimit mund të miratohet vetëm me një rregullim të lehtë në hapat eksperimental: kur kampioni u ngarkua në fishekun SAX dhe në Komponentin A neutral. u eluat plotësisht me tretës organikë të fazës normale, kaloni fazën e lëvizshme në solucionin e metanolit që përmban 5% acid acetik.Jonet e acetatit në fazën e lëvizshme do të konkurrojnë me Komponentin B për lidhjen me grupet e joneve të aminave kuaternare në fazën stacionare të fishekut SAX, duke elueruar kështu komponentin B nga fisheku për të marrë produktin e synuar.Kromatogrami i kampionit të ndarë në mënyrën e shkëmbimit të joneve është paraqitur në Figurën 7.

Figura 7. Kromatogrami flash i Komponentit B i elutur në modalitetin e shkëmbimit të joneve në një fishek SAX.

Si përfundim, kampioni acid ose neutral mund të pastrohet me shpejtësi nga fisheku SAX i kombinuar me fishekun e fazës normale duke përdorur strategji të ndryshme pastrimi.Për më tepër, me ndihmën e funksionit të skanimit me gjatësi të plotë vale të integruar në softuerin e kontrollit të makinës SepaBean™, spektri karakteristik i absorbimit të fraksioneve të elutura mund të krahasohet dhe konfirmohet lehtësisht, duke i ndihmuar studiuesit të përcaktojnë shpejt përbërjen dhe pastërtinë e fraksioneve të elura dhe duke përmirësuar kështu. efikasiteti i punës.

Numri i artikullit

Madhësia e kolonës

Shkalla e rrjedhjes

(mL/min)

Maksimumi.Presioni

(psi/bar)

SW-5001-004-IR

5,9 g

10-20

400/27.5

SW-5001-012-IR

23 g

15-30

400/27.5

SW-5001-025-IR

38 g

15-30

400/27.5

SW-5001-040-IR

55 g

20-40

400/27.5

SW-5001-080-IR

122 g

30-60

350/24.0

SW-5001-120-IR

180 g

40-80

300/20.7

SW-5001-220-IR

340 g

50-100

300/20.7

SW-5001-330-IR

475 g

50-100

250/17.2

 

Tabela 2. Fishekët flash SAX të Serisë SepaFlash Bonded.Materialet e paketimit: Silicë ultra e pastër e parregullt e lidhur me SAX, 40 - 63 μm, 60 Å.

Për më shumë informacion mbi specifikimet e hollësishme të SepaBean™makinë, ose informacionin e porositjes për fishekët flash të serisë SepaFlash, ju lutemi vizitoni faqen tonë të internetit.


Koha e postimit: Nëntor-09-2018