Notkun SepaFlash Strong Anion Exchange Chromatography dálka við hreinsun á súrum efnasamböndum

Niðurstöður og umræður

Í fyrsta lagi var sýnisblandan aðskilin með venjulegu flasshylki sem var forpakkað með venjulegum kísil.Eins og sést á mynd 3 voru tveir þættirnir í sýninu skolaðir úr rörlykjunni hver á eftir öðrum.Næst var SAX flasshylki notað til að hreinsa sýnið.Eins og sést á mynd 4 var súr hluti B algjörlega geymdur á SAX skothylkinu.Hlutlausi efnisþátturinn A var skolaður smám saman út úr rörlykjunni með skolun farsímafasans.

Mynd 3. Flassskiljun sýnisins á venjulegri venjulegri fasahylki.

Mynd 4. Flassskiljun sýnisins á SAX skothylki.
Með því að bera saman mynd 3 og mynd 4, hefur hluti A ósamræmi í toppformi á tveimur mismunandi flasshylkjum.Til að staðfesta hvort skolunartoppurinn samsvari íhlutnum getum við notað skönnunareiginleikann í fullri bylgjulengd sem er innbyggður í stýrihugbúnað SepaBean™ vélarinnar.Opnaðu tilraunagögn þessara tveggja aðskilnaðar, dragðu að vísirlínu á tímaásnum (CV) í litskiljuninni að hæsta punkti og næsthæsta punkti skolunartoppsins sem samsvarar efnishluta A, og fullt bylgjulengdarróf þessara tveggja punktar verða sjálfkrafa sýndir fyrir neðan litskiljuna (eins og sýnt er á mynd 5 og mynd 6).Samanburður á fullri bylgjulengdarrófsgögnum þessara tveggja aðskilnaða hefur hluti A stöðugt frásogsróf í tveimur tilraunum.Vegna þess að íhlutur A hefur ósamræmi í toppformi á tveimur mismunandi flasshylkjum, er getgátur um að það sé sérstakt óhreinindi í íhluti A sem hefur mismunandi varðveislu á venjulegu fasahylkinu og SAX skothylki.Þess vegna er skolunarröðin önnur fyrir íhluti A og óhreinindin á þessum tveimur flasshylkjum, sem leiðir til ósamræmis toppforms á litskiljunum.

Mynd 5. Heildarbylgjulengdarróf íhlutans A og óhreinindin aðskilin með venjulegum fasahylki.

Mynd 6. Heildarbylgjulengdarróf íhluta A og óhreinindi aðskilin með SAX skothylki.

Ef markvaran sem á að safna er hlutlausi hluti A, er auðvelt að klára hreinsunarverkefnið með því að nota SAX skothylki beint til skolunar eftir að sýni er hlaðið.Á hinn bóginn, ef markafurðin sem á að safna er súr hluti B, væri hægt að nota töku-losunaraðferðina með aðeins örlítilli aðlögun í tilraunaþrepunum: þegar sýninu var hlaðið á SAX hylkin og hlutlausa hluti A var alveg skolað út með venjulegum fasa lífrænum leysum, skiptið um hreyfanlega fasann yfir í metanóllausn sem inniheldur 5% ediksýru.Asetatjónirnar í hreyfanlegum fasa munu keppa við efnisþátt B um að bindast fjórðungum amínjónahópum á kyrrstæðum fasa SAX rörlykjunnar, og skolar þar með íhlut B úr rörlykjunni til að fá markafurðina.Litskiljun sýnisins sem var aðskilin í jónaskiptaham var sýnd á mynd 7.

Mynd 7. Flassskiljun hlutar B skolað út í jónaskiptaham á SAX skothylki.

Að lokum, súrt eða hlutlaust sýni gæti verið hreinsað hratt með SAX skothylki ásamt venjulegum fasa skothylki með því að nota mismunandi hreinsunaraðferðir.Ennfremur, með hjálp fullrar bylgjulengdar skönnunareiginleika sem er innbyggður í stýrihugbúnað SepaBean™ vélarinnar, var auðvelt að bera saman og staðfesta einkennandi frásogsróf skolaðra hluta, sem hjálpaði rannsakendum fljótt að ákvarða samsetningu og hreinleika skolaðra brota og þannig bæta vinnu skilvirkni.