অ্যাসিডিক যৌগগুলির পরিশোধনে সেপাফ্ল্যাশ শক্তিশালী অ্যানিয়ন এক্সচেঞ্জ ক্রোমাটোগ্রাফি কলামগুলির প্রয়োগ

ফলাফল এবং আলোচনা

প্রথমত, নমুনা মিশ্রণটি নিয়মিত সিলিকা দিয়ে প্রি-প্যাক করা একটি সাধারণ ফেজ ফ্ল্যাশ কার্টিজ দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল।চিত্র 3-এ দেখানো হিসাবে, নমুনার দুটি উপাদান কার্টিজ থেকে একের পর এক বিলুপ্ত হয়েছিল।এরপরে, একটি SAX ফ্ল্যাশ কার্তুজ নমুনা পরিশোধনের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল।চিত্র 4-এ দেখানো হিসাবে, অ্যাসিডিক উপাদান B সম্পূর্ণরূপে SAX কার্টিজে ধরে রাখা হয়েছিল।নিরপেক্ষ উপাদান A ধীরে ধীরে মোবাইল ফেজের বিলুপ্তির সাথে কার্টিজ থেকে নির্গত হয়েছিল।

চিত্র 3. একটি নিয়মিত স্বাভাবিক ফেজ কার্টিজে নমুনার ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম।

চিত্র 4. একটি SAX কার্টিজে নমুনার ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম।
চিত্র 3 এবং চিত্র 4 এর তুলনা করে, কম্পোনেন্ট A-এর দুটি ভিন্ন ফ্ল্যাশ কার্টিজে অসঙ্গতিপূর্ণ শিখর আকৃতি রয়েছে।ইলিউশন পিক উপাদানটির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ কিনা তা নিশ্চিত করতে, আমরা সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য স্ক্যানিং বৈশিষ্ট্যটি ব্যবহার করতে পারি যা SepaBean™ মেশিনের নিয়ন্ত্রণ সফ্টওয়্যারটিতে তৈরি করা হয়েছে।দুটি বিভাজনের পরীক্ষামূলক ডেটা খুলুন, ক্রোমাটোগ্রামের সময় অক্ষের (সিভি) নির্দেশক রেখায় টেনে নিয়ে যান সর্বোচ্চ বিন্দুতে এবং কম্পোনেন্ট A এর সাথে সম্পর্কিত ইলুশন পিকের দ্বিতীয় সর্বোচ্চ বিন্দুতে এবং এই দুটির পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বর্ণালী। পয়েন্টগুলি স্বয়ংক্রিয়ভাবে ক্রোমাটোগ্রামের নীচে প্রদর্শিত হবে (যেমন চিত্র 5 এবং চিত্র 6 এ দেখানো হয়েছে)।এই দুটি পৃথকীকরণের সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী ডেটা তুলনা করে, কম্পোনেন্ট A-তে দুটি পরীক্ষায় সামঞ্জস্যপূর্ণ শোষণ বর্ণালী রয়েছে।কম্পোনেন্ট A-এর দুটি ভিন্ন ফ্ল্যাশ কার্টিজে অসামঞ্জস্যপূর্ণ পিক আকৃতির কারণে, অনুমান করা হয় যে কম্পোনেন্ট A-তে নির্দিষ্ট অপরিচ্ছন্নতা রয়েছে যা স্বাভাবিক ফেজ কার্টিজ এবং SAX কার্টিজে আলাদা ধরে রাখে।অতএব, কম্পোনেন্ট A এর জন্য ইলুটিং সিকোয়েন্স এবং এই দুটি ফ্ল্যাশ কার্টিজের অপরিষ্কারতা ভিন্ন, যার ফলে ক্রোমাটোগ্রামে অসঙ্গতিপূর্ণ শিখর আকৃতি দেখা যায়।

চিত্র 5. কম্পোনেন্ট A এর পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য বর্ণালী এবং স্বাভাবিক ফেজ কার্টিজ দ্বারা পৃথক করা অপরিচ্ছন্নতা।

চিত্র 6. কম্পোনেন্ট A এর পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বর্ণালী এবং SAX কার্টিজ দ্বারা পৃথক করা অপরিচ্ছন্নতা।

যদি সংগ্রহ করা লক্ষ্য পণ্যটি নিরপেক্ষ উপাদান A হয়, তাহলে নমুনা লোড করার পরে নির্গত হওয়ার জন্য SAX কার্টিজ ব্যবহার করে পরিশোধন কাজটি সহজেই সম্পন্ন করা যেতে পারে।অন্যদিকে, যদি সংগ্রহ করা লক্ষ্য পণ্যটি হয় অ্যাসিডিক কম্পোনেন্ট বি, তবে ক্যাপচার-রিলিজ পদ্ধতিটি পরীক্ষামূলক ধাপে সামান্য সামঞ্জস্যের মাধ্যমে গ্রহণ করা যেতে পারে: যখন নমুনাটি SAX কার্টিজে লোড করা হয়েছিল এবং নিরপেক্ষ উপাদান A স্বাভাবিক ফেজ জৈব দ্রাবক দিয়ে সম্পূর্ণরূপে বিলুপ্ত করা হয়েছিল, মোবাইল ফেজটিকে 5% অ্যাসিটিক অ্যাসিড ধারণকারী মিথানল দ্রবণে স্যুইচ করুন।মোবাইল ফেজে অ্যাসিটেট আয়নগুলি SAX কার্টিজের স্থির পর্যায়ে চতুর্মুখী অ্যামাইন আয়ন গ্রুপের সাথে আবদ্ধ হওয়ার জন্য কম্পোনেন্ট B-এর সাথে প্রতিদ্বন্দ্বিতা করবে, যার ফলে লক্ষ্য পণ্য প্রাপ্ত করার জন্য কার্টিজ থেকে কম্পোনেন্ট B বিলুপ্ত হবে।আয়ন বিনিময় মোডে পৃথক নমুনার ক্রোমাটোগ্রাম চিত্র 7 এ দেখানো হয়েছে।

চিত্র 7. কম্পোনেন্ট B-এর ফ্ল্যাশ ক্রোমাটোগ্রাম একটি SAX কার্টিজে আয়ন বিনিময় মোডে বিলুপ্ত হয়েছে।

উপসংহারে, অ্যাসিডিক বা নিরপেক্ষ নমুনা বিভিন্ন পরিশোধন কৌশল ব্যবহার করে স্বাভাবিক ফেজ কার্টিজের সাথে মিলিত SAX কার্টিজ দ্বারা দ্রুত শুদ্ধ করা যেতে পারে।অধিকন্তু, SepaBean™ মেশিনের কন্ট্রোল সফ্টওয়্যারটিতে তৈরি সম্পূর্ণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য স্ক্যানিং বৈশিষ্ট্যের সাহায্যে, বিলুপ্ত ভগ্নাংশের বৈশিষ্ট্যযুক্ত শোষণ বর্ণালী সহজেই তুলনা এবং নিশ্চিত করা যেতে পারে, গবেষকদের দ্রুত বিলুপ্ত ভগ্নাংশের গঠন এবং বিশুদ্ধতা নির্ধারণ করতে সাহায্য করে এবং এইভাবে উন্নতি করতে পারে। কার্যক্ষমতা.