האָנגטשענג וואַנג, באָ זו
אַפּפּליקאַטיאָן ר & די צענטער
הקדמה
לויט די קאָרעוו פּאָולאַראַטיז פון סטיישאַנערי פאַסע און רירעוודיק פאַסע, פליסיק קראָומאַטאַגראַפי קענען זיין צעטיילט אין נאָרמאַל פאַסע קראָומאַטאַגראַפי (נפּק) און ריווערסט פאַסע קראָומאַטאַגראַפי (רפּק).פֿאַר RPC, די פּאָולעראַטי פון די רירעוודיק פאַסע איז שטארקער ווי די סטיישאַנערי פאַסע.RPC איז געווארן די מערסט וויידלי געניצט אין פליסיק קראָומאַטאַגראַפי צעשיידונג מאָדעס רעכט צו זיין הויך עפעקטיווקייַט, גוט האַכלאָטע און קלאָר ריטענשאַן מעקאַניזאַם.דעריבער רפּק איז פּאַסיק פֿאַר די צעשיידונג און רייניקונג פון פאַרשידן פּאָליאַר אָדער ניט-פּאָליאַר קאַמפּאַונדז, אַרייַנגערעכנט אַלקאַלוידז, קאַרבאָוכיידרייץ, פאַטי אַסאַדז, סטערוידז, נוקלעיק אַסאַדז, אַמינאָ אַסאַדז, פּעפּטיידז, פּראָטעינס, אאז"ו ו. אין רפּק, די מערסט קאַמאַנלי געניצט סטיישאַנערי פאַסע איז די סיליקאַ געל מאַטריץ וואָס איז געבונדן מיט פאַרשידן פאַנגקשאַנאַל גרופּעס, אַרייַנגערעכנט C18, C8, C4, פעניל, סיאַנאָ, אַמינאָ, אאז"ו ו.עס איז עסטימאַטעד אַז מער ווי 80% פון רפּק זענען איצט ניצן C18 באַנדיד פאַסע.דעריבער C18 קראָומאַטאַגראַפי זייַל איז געווארן אַ מוזן-האָבן וניווערסאַל זייַל פֿאַר יעדער לאַבאָראַטאָריע.
כאָטש C18 זייַל קענען זיין געוויינט אין אַ זייער ברייט קייט פון אַפּלאַקיישאַנז, אָבער, פֿאַר עטלעכע סאַמפּאַלז וואָס איז זייער פּאָליאַר אָדער העכסט כיידראָופיליק, רעגולער C18 שפאלטן קען האָבן פּראָבלעמס ווען זיי זענען געניצט צו רייניקן אַזאַ סאַמפּאַלז.אין רפּק, די קאַמאַנלי געניצט ילושאַן סאָלוואַנץ קענען זיין אָרדערד לויט זייער פּאָולעראַטי: וואַסער < מעטאַנאָל < אַסעטאָניטרילע < עטאַנאָל < טעטראַהידראָפוראַן < יסאָפּראָפּאַנאָל.צו פאַרזיכערן גוט ריטענשאַן אויף די זייַל פֿאַר די סאַמפּאַלז (שטאַרק פּאָליאַר אָדער העכסט כיידראָופיליק), אַ הויך פּראָפּאָרציע פון ייקוויאַס סיסטעם איז נייטיק צו זיין געוויינט ווי די רירעוודיק פאַסע.אָבער, ווען ניצן ריין וואַסער סיסטעם (אַרייַנגערעכנט ריין וואַסער אָדער ריין זאַלץ לייזונג) ווי די רירעוודיק פאַסע, די לאַנג טשאַד קייט אויף די סטיישאַנערי פאַסע פון C18 זייַל טענדז צו ויסמיידן די וואַסער און מישן מיט יעדער אנדערע, ריזאַלטינג אין אַ ינסטאַנטאַניאַס פאַרקלענערן אין די ריטענשאַן קאַפּאַציטעט פון די זייַל אָדער אפילו קיין ריטענשאַן.דער דערשיינונג איז גערופן "הידראָפאָביק פאַסע ייַנבראָך" (ווי געוויזן אין די לינקס טייל פון פיגורע 1).כאָטש דעם סיטואַציע איז ריווערסאַבאַל ווען די זייַל איז געוואשן מיט אָרגאַניק סאָלוואַנץ אַזאַ ווי מעטאַנאָל אָדער אַסעטאָניטרילע, עס נאָך קענען אָנמאַכן שעדיקן צו די זייַל.דעריבער, עס איז נייטיק צו פאַרמייַדן דעם סיטואַציע פון געשעעניש.
פיגורע 1. די סכעמאַטיש דיאַגראַמע פון די באַנדיד פאַסעס אויף די ייבערפלאַך פון סיליקאַ געל אין רעגולער ק18 זייַל (לינקס) און ק18אַק זייַל (רעכט).
צו אַדרעס די אויבן דערמאנט פּראָבלעמס, די מאַניאַפאַקטשערערז פון טשראָמאַטאָגראַפיק פּאַקינג מאַטעריאַלס האָבן געמאכט טעכניש ימפּרווומאַנץ.איינער פון די ימפּרווומאַנץ איז צו מאַכן עטלעכע מאָדיפיקאַטיאָנס אויף די ייבערפלאַך פון די סיליקאַ מאַטריץ, אַזאַ ווי די הקדמה פון כיידראָופיליק סיאַנאָ גרופּעס (ווי געוויזן אין די רעכט טייל פון פיגורע 1), צו מאַכן די ייבערפלאַך פון די סיליקאַ געל מער כיידראָופיליק.אזוי די C18 קייטן אויף די סיליקאַ ייבערפלאַך קען זיין גאָר עקסטענדעד אונטער העכסט ייקוויאַס טנאָים און די כיידראָופאָביק פאַסע ייַנבראָך קען זיין אַוווידאַד.די מאַדאַפייד C18 שפאלטן זענען גערופֿן ייקוויאַס C18 שפאלטן, ניימלי C18AQ שפאלטן, וואָס זענען דיזיינד פֿאַר העכסט ייקוויאַס ילושאַן טנאָים און קענען דערלאָזן 100% ייקוויאַס סיסטעם.C18AQ שפאלטן זענען וויידלי געווענדט אין די צעשיידונג און רייניקונג פון שטאַרק פּאָליאַר קאַמפּאַונדז, אַרייַנגערעכנט אָרגאַניק אַסאַדז, פּעפּטיידז, נוקלעאָסידעס און וואַסער-סאַליאַבאַל וויטאַמינס.
דעסאַלטינג איז איינער פון די טיפּיש אַפּלאַקיישאַנז פון C18AQ שפאלטן אין בליץ רייניקונג פֿאַר סאַמפּאַלז, וואָס רימוווז די זאַלץ אָדער באַפער קאַמפּאָונאַנץ אין די מוסטער סאַלוואַנט צו פאַסילאַטייט די אַפּלאַקיישאַן פון די מוסטער אין סאַבסאַקוואַנט שטודיום.אין דעם פּאָסטן, די בריליאַנט בלו FCF מיט שטאַרק פּאָולעראַטי איז געניצט ווי דער מוסטער און פּיוראַפייד אויף די C18AQ זייַל.דער מוסטער סאַלוואַנט איז ריפּלייסט דורך אָרגאַניק סאַלוואַנט פֿון באַפער לייזונג, אַזוי פאַסילאַטייטינג די פאלגענדע דריי יוואַפּעריישאַן און שפּאָרן סאָלוואַנץ און אַפּערייטינג צייט.דערצו, די ריינקייַט פון די מוסטער איז ימפּרוווד דורך רימוווינג עטלעכע ימפּיוראַטיז אין די מוסטער.
עקספּערימענטאַל אָפּטיילונג
פיגורע 2. די כעמישער סטרוקטור פון די מוסטער.
די בריליאַנט בלו FCF איז געניצט ווי דער מוסטער אין דעם פּאָסטן.די ריינקייַט פון די רוי מוסטער איז געווען 86% און די כעמישער סטרוקטור פון די מוסטער איז געוויזן אין פיגורע 2. צו צוגרייטן די מוסטער לייזונג, 300 מג פּאַודערי גראָב האַרט פון בריליאַנט בלו פקף איז צעלאָזן אין 1 ם נאַה2פּאָ4 באַפער לייזונג און שאָקלען געזונט צו ווערן אַ גאָר קלאָר לייזונג.דער מוסטער לייזונג איז דעמאָלט ינדזשעקטיד אין די בליץ זייַל דורך אַ ינדזשעקטער.די יקספּערמענאַל סעטאַפּ פון די בליץ רייניקונג איז ליסטעד אין די טיש 1.
| ינסטרומענט | SepaBean ™ מאַשין2 | |||
| קאַרטראַדזשאַז | 12 ג SepaFlash C18 RP בליץ פּאַטראָן (ספעריש סיליקאַ, 20-45 μm, 100 Å, סדר נומער: SW-5222-012-SP) | 12 ג SepaFlash C18AQ RP בליץ פּאַטראָן (ספעריש סיליקאַ, 20 - 45 μם, 100 Å, סדר נומער: SW-5222-012-SP(AQ))) | ||
| ווייוולענגט | 254 nm | |||
| מאָביל פאַסע | סאַלוואַנט א: וואַסער סאַלוואַנט ב: מעטאַנאָל | |||
| לויפן קורס | 30 מל / מין | |||
| מוסטער לאָודינג | 300 מג (בריליאַנט בלוי FCF מיט די ריינקייַט פון 86%) | |||
| גראַדיענט | צייט (CV) | סאַלוואַנט ב (%) | צייט (CV) | סאַלוואַנט ב (%) |
| 0 | 10 | 0 | 0 | |
| 10 | 10 | 10 | 0 | |
| 10.1 | 100 | 10.1 | 100 | |
| 17.5 | 100 | 17.5 | 100 | |
| 17.6 | 10 | 17.6 | 0 | |
| 22.6 | 10 | 22.6 | 0 | |
רעזולטאטן און דיסקוסיע
א SepaFlash C18AQ RP בליץ פּאַטראָן איז געניצט פֿאַר מוסטער דעסאַלטינג און רייניקונג.שריט גראַדיענט איז יוטאַלייזד אין וואָס ריין וואַסער איז געניצט ווי די רירעוודיק פאַסע אין די אָנהייב פון ילושאַן און לויפן פֿאַר 10 זייַל וואַליומז (קוו).ווי געוויזן אין פיגורע 3, ווען ניצן ריין וואַסער ווי די רירעוודיק פאַסע, די מוסטער איז גאָר ריטיינד אויף די בליץ פּאַטראָן.דערנאָך, די מעטאַנאָל אין די רירעוודיק פאַסע איז גלייַך געוואקסן צו 100% און די גראַדיענט איז געווען מיינטיינד פֿאַר 7.5 קוו.דער מוסטער איז געווען ילוייטיד פון 11.5 צו 13.5 קוו.אין די געזאמלט פראַקשאַנז, די מוסטער לייזונג איז ריפּלייסט פון NaH2PO4 באַפער לייזונג צו מעטאַנאָל.קאַמפּערד מיט הויך ייקוויאַס לייזונג, מעטאַנאָל איז פיל גרינגער צו זיין אַוועקגענומען דורך דריי יוואַפּעריישאַן אין די סאַבסאַקוואַנט שריט, וואָס פאַסילאַטייץ די פאלגענדע פאָרשונג.
פיגורע 3. די בליץ קראָומאַטאַגראַם פון די מוסטער אויף אַ C18AQ פּאַטראָן.
צו פאַרגלייַכן די ריטענשאַן נאַטור פון C18AQ פּאַטראָן און רעגולער C18 פּאַטראָן פֿאַר סאַמפּאַלז פון שטאַרק פּאָולעראַטי, פּאַראַלעל פאַרגלייַך פּרובירן איז דורכגעקאָכט.א SepaFlash C18 RP בליץ פּאַטראָן איז געניצט און די בליץ קראָומאַטאַגראַם פֿאַר די מוסטער איז געוויזן אין פיגורע 4. פֿאַר רעגולער C18 קאַרטראַדזשאַז, די העכסטן טאָלעראַטעד ייקוויאַס פאַסע פאַרהעלטעניש איז וועגן 90%.דעריבער די אָנהייב גראַדיענט איז געווען באַשטימט בייַ 10% מעטאַנאָל אין 90% וואַסער.ווי געוויזן אין פיגורע 4, רעכט צו דער כיידראָופאָביק פאַסע ייַנבראָך פון די C18 קייטן געפֿירט דורך אַ הויך ייקוויאַס פאַרהעלטעניש, די מוסטער איז קוים ריטיינד אויף די רעגולער C18 פּאַטראָן און איז גלייך ילוייטיד דורך די רירעוודיק פאַסע.ווי אַ רעזולטאַט, די אָפּעראַציע פון מוסטער דיסאַלטינג אָדער רייניקונג קענען ניט זיין געענדיקט.
פיגורע 4. די בליץ קראָומאַטאַגראַם פון די מוסטער אויף אַ רעגולער ק18 פּאַטראָן.
קאַמפּערד מיט לינעאַר גראַדיענט, די נוצן פון שריט גראַדיענט האט די פאלגענדע אַדוואַנטידזשיז:
1. סאַלוואַנט באַניץ און לויפן צייַט פֿאַר מוסטער רייניקונג איז רידוסט.
2. דער ציל פּראָדוקט ילודז אין אַ שאַרף שפּיץ, וואָס ראַדוסאַז די באַנד פון געזאמלט פראַקשאַנז און אַזוי פאַסילאַטייץ די פאלגענדע דריי יוואַפּעריישאַן ווי געזונט ווי שפּאָרן צייט.
3. די געזאמלט פּראָדוקט איז אין מעטאַנאָל וואָס איז גרינג צו זיין יוואַפּערייטיד, אַזוי דריינג צייַט איז רידוסט.
אין מסקנא, פֿאַר די רייניקונג פון די מוסטער וואָס איז שטארק פּאָליאַר אָדער העכסט כיידראָופיליק, SepaFlash C18AQ RP בליץ קאַרטראַדזשאַז קאַמביינינג מיט די פּריפּעראַטיוו בליץ קראָומאַטאַגראַפי סיסטעם SepaBean ™ מאַשין קען פאָרשלאָגן אַ שנעל און עפעקטיוו לייזונג.
וועגן די SepaFlash Bonded Series C18 RP בליץ קאַרטראַדזשאַז
עס זענען אַ סעריע פון די SepaFlash C18AQ RP בליץ קאַרטראַדזשאַז מיט פאַרשידענע ספּעסאַפאַקיישאַנז פון Santai טעכנאָלאָגיע (ווי געוויזן אין טאַבלע 2).
| נומער נומער | זייַל גרייס | לויפן קורס (מל / מין) | מאַקס.דרוק (פּסי / באַר) |
| SW-5222-004-SP(AQ) | 5.4 ג | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP(AQ) | 20 ג | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP(AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP(AQ) | 48 ג | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP(AQ) | 105 ג | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP(AQ) | 155 ג | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP(AQ) | 300 ג | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP(AQ) | 420 ג | 40-80 | 250/17.2 |
טיש 2. SepaFlash C18AQ RP בליץ קאַרטראַדזשאַז.
פּאַקינג מאַטעריאַלס: הויך-עפעקטיווקייַט ספעריש C18(AQ)-באַנדיד סיליקאַ, 20 - 45 μם, 100 אַ.
logy (ווי געוויזן אין טאַבלע 2).
פּאָסטן צייט: אויגוסט 27-2018