Банер за вести

Вести

Прочистување на високополарни нечистотии во антибиотици со колони C18AQ

Прочистување на високополарни нечистотии во антибиотици со колони C18AQ

Мингзу Јанг, Бо Ксу
Центар за истражување и развој на апликации

Вовед
Антибиотиците се класа на секундарни метаболити произведени од микроорганизми (вклучувајќи бактерии, габи, актиномицети) или слични соединенија кои се хемиски синтетизирани или полусинтетизирани.Антибиотиците може да го инхибираат растот и преживувањето на други микроорганизми.Првиот антибиотик откриен од човек, пеницилинот, го открил британскиот микробиолог Александар Флеминг во 1928 година. Тој забележал дека бактериите во близина на мувлата не можат да растат во садот за култура на стафилокок кој бил контаминиран со мувла.Тој претпоставувал дека мувлата мора да лачи антибактериска супстанца, која ја нарекол пеницилин во 1928 година. Сепак, активните состојки во тоа време не биле прочистени.Во 1939 година, Ернст Чејн и Хауард Флори од Универзитетот Оксфорд одлучија да развијат лек кој може да лекува бактериски инфекции.Откако го контактирале Флеминг за да добијат соеви, тие успешно го извлекле и прочистиле пеницилинот од соевите.За нивниот успешен развој на пеницилинот како терапевтски лек, Флеминг, Чејн и Флори ја споделија Нобеловата награда за медицина во 1945 година.

Антибиотиците се користат како антибактериски агенси за лекување или спречување на бактериски инфекции.Постојат неколку главни категории на антибиотици кои се користат како антибактериски агенси: бета-лактамски антибиотици (вклучувајќи пеницилин, цефалоспорин итн.), аминогликозидни антибиотици, макролидни антибиотици, тетрациклински антибиотици, хлорамфеникол (вкупно синтетички антибиотик) и др. Изворите на антибиотици вклучуваат биолошка ферментација, полу-синтеза и тотална синтеза.Антибиотиците произведени со биолошка ферментација треба структурно да се модифицираат со хемиски методи поради хемиска стабилност, токсични несакани ефекти, антибактериски спектар и други прашања.По хемиски модифицирани, антибиотиците може да постигнат зголемена стабилност, намалени токсични несакани ефекти, проширен антибактериски спектар, намалена отпорност на лекови, подобрена биорасположивост и со тоа подобрен ефект на лекувањето со лекови.Затоа, полусинтетичките антибиотици во моментов се најпопуларна насока во развојот на антибиотските лекови.

Во развојот на полусинтетички антибиотици, антибиотиците имаат својства на ниска чистота, многу нуспроизводи и сложени компоненти, бидејќи тие се добиени од производи за микробна ферментација.Во овој случај, анализата и контролата на нечистотиите во полусинтетичките антибиотици е особено важна.За ефикасно да се идентификуваат и карактеризираат нечистотиите, неопходно е да се добие доволна количина на нечистотии од синтетичкиот производ на полусинтетичките антибиотици.Меѓу најчесто користените техники за подготовка на нечистотии, флеш-хроматографијата е рентабилна метода со предности како што се голема количина на вчитување примерок, ниска цена, заштеда на време итн. Флеш-хроматографијата се повеќе и повеќе се користи од синтетички истражувачи.

Во овој пост, главната нечистотија на полусинтетичкиот аминогликозиден антибиотик беше искористена како примерок и прочистена со кертриџ SepaFlash C18AQ во комбинација со флеш-хроматографијата на системот SepaBean™ машина.Целниот производ кој ги исполнува барањата беше успешно добиен, што укажува на високо ефикасно решение за прочистување на овие соединенија.

Експериментален дел
Примерокот беше љубезно обезбеден од локална фармацевтска компанија.Примерокот беше еден вид амино-полициклични јаглехидрати и неговата молекуларна структура беше слична со аминогликозидните антибиотици.Поларитетот на примерокот беше прилично висок, што го прави многу растворлив во вода.Шематскиот дијаграм на молекуларната структура на примерокот беше прикажан на слика 1. Чистотата на суровиот примерок беше околу 88% како што беше анализирано со HPLC.За прочистување на овие соединенија со висок поларитет, примерокот едвај би се задржал на обичните C18 колони според нашите претходни искуства.Затоа, колона C18AQ беше употребена за прочистување на примерокот.

Слика 1. Шематски дијаграм на молекуларната структура на примерокот.
За да се подготви растворот на примерокот, сурова мостра од 50 mg беше растворена во 5 ml чиста вода, а потоа беше ултразвучен за да се направи целосно јасен раствор.Решението на примерокот потоа се инјектира во колоната за блиц со инјектор.Експерименталното поставување на блицот за прочистување беше наведено во Табела 1.

Инструмент

SepaBean™ машина 2

Касети

12 g SepaFlash C18AQ RP блиц-кертриџ (сферична силика, 20 - 45μm, 100 Å, број на нарачка:SW-5222-012-SP(AQ))

Бранова должина

204 nm, 220 nm

Мобилна фаза

Растворувач А: Вода

Растворувач Б: ацетонитрил

Проток

15 мл/мин

Вчитување на примерокот

50 mg

Градиент

Време (мин.)

Растворувач Б (%)

0

0

19.0

8

47,0

80

52.0

80

Резултати и дискусија
Флеш-хроматограмот на примерокот на патронот C18AQ беше прикажан на слика 2. Како што е прикажано на слика 2, високополарниот примерок беше ефикасно задржан на кертриџот C18AQ.По лиофолизацијата за собраните фракции, целниот производ имаше чистота од 96,2% (како што е прикажано на слика 3) со HPLC анализа.Резултатите покажаа дека прочистениот производ може дополнително да се искористи во следниот чекор истражување и развој.

Слика 2. Флеш хроматограм на примерокот на патрон C18AQ.

Слика 3. ХПЛЦ хроматограм на целниот производ.

Како заклучок, флеш-кертриџот SepaFlash C18AQ RP во комбинација со флеш-хроматографијата машина SepaBean™ може да понуди брзо и ефикасно решение за прочистување на високополарни примероци.

За флеш касетите SepaFlash C18AQ RP
Има серија блиц касети SepaFlash C18AQ RP со различни спецификации од Santai Technology (како што е прикажано во Табела 2).

Точка број

Големина на колона

Проток

(mL/min)

Макс.Притисок

(psi/бар)

SW-5222-004-SP(AQ)

5,4 гр

5-15

400/27,5

SW-5222-012-SP(AQ)

20 гр

10-25

400/27,5

SW-5222-025-SP(AQ)

33 гр

10-25

400/27,5

SW-5222-040-SP(AQ)

48 гр

15-30

400/27,5

SW-5222-080-SP(AQ)

105 гр

25-50

350/24,0

SW-5222-120-SP(AQ)

155 гр

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP(AQ)

300 гр

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP(AQ)

420 гр

40-80

250/17.2

Табела 2. блиц касети SepaFlash C18AQ RP.Материјали за пакување: Високо-ефикасна сферична C18(AQ)-врзана силика, 20 - 45 μm, 100 Å.

За понатамошни информации за деталните спецификации на машината SepaBean™ или информациите за нарачка на флеш касетите од серијата SepaFlash, посетете ја нашата веб-локација.


Време на објавување: Октомври-26-2018