Banner warta

Warta

Pemurnian Kotoran Kacida Polar dina Antibiotik ku Kolom C18AQ

Pemurnian Kotoran Kacida Polar dina Antibiotik ku Kolom C18AQ

Mingzu Yang, Bo Xu
Aplikasi R & D Center

Bubuka
Antibiotik nyaéta kelas métabolit sékundér anu dihasilkeun ku mikroorganisme (kaasup baktéri, fungi, actinomycetes) atawa sanyawa sarupa anu disintésis sacara kimiawi atawa semi-sintésis.Antibiotik bisa ngahambat tumuwuhna sarta survival mikroorganisme lianna.Antibiotik munggaran kapanggih ku manusa, pénisilin, kapanggih ku microbiologist Inggris Alexander Fleming dina 1928. Anjeunna niténan yén baktéri di sabudeureun éta kapang teu bisa tumuwuh dina piring budaya staphylococcus nu kacemar ku kapang.Anjeunna postulated yén kapang kudu secrete zat antibakteri, nu anjeunna ngaranna pénisilin dina 1928. Sanajan kitu, bahan aktif teu dimurnikeun dina waktu éta.Dina 1939, Ernst Chain sareng Howard Florey ti Universitas Oxford mutuskeun pikeun ngembangkeun ubar anu tiasa ngubaran inféksi baktéri.Saatos ngahubungi Fleming pikeun kéngingkeun galur, aranjeunna hasil ékstrak sareng ngamurnikeun pénisilin tina galur.Pikeun suksés ngembangkeun pénisilin salaku ubar terapi, Fleming, Chain sareng Florey ngabagi Hadiah Nobel Kedokteran 1945.

Antibiotik dianggo salaku agén antibakteri pikeun ngubaran atanapi nyegah inféksi baktéri.Aya sababaraha kategori utama antibiotik dipaké salaku agén antibakteri: antibiotik β-laktam (kaasup pénisilin, cephalosporin, jsb), antibiotik aminoglycoside, antibiotik macrolide, antibiotik tetracycline, chloramphenicol (total antibiotik sintétik), jeung sajabana fermentasi biologis, semi-sintésis jeung total sintésis.Antibiotik anu dihasilkeun ku fermentasi biologis kedah dirobih sacara stuktur ku metode kimiawi kusabab stabilitas kimiawi, efek samping toksik, spéktrum antibakteri sareng masalah anu sanés.Saatos dirobih sacara kimia, antibiotik tiasa ngahontal stabilitas ningkat, ngirangan efek samping toksik, spéktrum antibakteri dilegaan, ngirangan résistansi obat, ningkatkeun bioavailability, sareng ku kituna ningkatkeun pangaruh pangobatan narkoba.Ku alatan éta, antibiotik semi-sintétik ayeuna arah pang populerna di ngembangkeun ubar antibiotik.

Dina ngembangkeun antibiotik semi-sintétik, antibiotik miboga sipat purity low, loba produk samping jeung komponén kompléks sabab asalna tina produk fermentasi mikroba.Dina hal ieu, analisa sareng kontrol pangotor dina antibiotik semi-sintétik penting pisan.Pikeun sacara efektif ngaidentipikasi sareng ngacirian najis, anjeun kedah nampi jumlah najis anu cekap tina produk sintétik tina antibiotik semi-sintétik.Di antara téknik persiapan najis anu biasa dianggo, kromatografi lampu kilat mangrupikeun metode anu murah sareng kauntungan sapertos jumlah muatan sampel anu ageung, biaya rendah, hemat waktos, jsb. Kromatografi lampu kilat parantos dianggo ku panaliti sintétik.

Dina tulisan ieu, najis utama antibiotik aminoglikosida semi-sintétik dianggo salaku conto sareng dimurnikeun ku kartrij SepaFlash C18AQ digabungkeun sareng sistem kromatografi lampu kilat SepaBean™.Produk udagan anu nyumponan sarat parantos hasil dicandak, nunjukkeun solusi anu épisién pisan pikeun ngamurnikeun sanyawa ieu.

Bagian Ékspérimén
Sampel ieu disayogikeun ku perusahaan farmasi lokal.Sampelna mangrupikeun jinis karbohidrat polisiklik amino sareng struktur molekulna sami sareng antibiotik aminoglikosida.Polaritasna sampel rada luhur, sahingga larut pisan dina cai.Diagram skéma tina struktur molekul sampel ieu ditémbongkeun dina Gambar 1. The purity sampel atah éta ngeunaan 88% sakumaha dianalisis ku HPLC.Pikeun purifikasi sanyawa ieu tina polaritasna luhur, sampel bakal bieu dipikagaduh dina kolom C18 biasa nurutkeun pangalaman urang saméméhna.Ku alatan éta, kolom C18AQ padamelan pikeun purifikasi sampel.

Gambar 1. Diagram skéma tina struktur molekul sampel.
Pikeun nyiapkeun leyuran sampel, 50 mg sampel atah ieu leyur dina 5 ml cai murni lajeng ultrasonicated dina urutan sangkan eta jadi leyuran lengkep jelas.Solusi sampel ieu lajeng nyuntik kana kolom flash ku injector.Setélan ékspérimén pikeun purifikasi lampu kilat didaptarkeun dina Tabel 1.

Instrumén

Mesin SepaBean™ 2

Cartridges

12 g SepaFlash C18AQ RP flash cartridge (silika buleud, 20 - 45μm, 100 Å, Nomer pesenan:SW-5222-012-SP(AQ))

Panjang gelombang

204 nm, 220 nm

Fase mobile

Pangleyur A: Cai

Pangleyur B: Acetonitrile

Laju aliran

15 ml/min

Sampel loading

50 mg

Gradién

Waktos (mnt)

Pangleyur B (%)

0

0

19.0

8

47.0

80

52.0

80

Hasil sareng diskusi
Kromatogram flash sampel dina cartridge C18AQ ditémbongkeun dina Gambar 2. Ditémbongkeun saperti dina Gambar 2, sampel kacida polar éféktif dipikagaduh dina cartridge C18AQ.Saatos lyopholization pikeun fraksi dikumpulkeun, produk sasaran miboga purity of 96,2% (sakumaha ditémbongkeun dina Gambar 3) ku analisis HPLC.Hasilna nunjukkeun yén produk anu dimurnikeun tiasa dimanfaatkeun deui dina panalungtikan sareng pamekaran léngkah salajengna.

Gambar 2. Kromatogram flash sampel dina cartridge C18AQ.

Gambar 3. Kromatogram HPLC produk sasaran.

Kacindekan, SepaFlash C18AQ RP flash cartridge digabungkeun jeung sistem kromatografi lampu kilat mesin SepaBean™ bisa nawarkeun solusi gancang jeung éféktif pikeun purifikasi sampel kacida polar.

Ngeunaan cartridges flash SepaFlash C18AQ RP
Aya runtuyan cartridges flash SepaFlash C18AQ RP kalawan spésifikasi béda ti Téhnologi Santai (sakumaha ditémbongkeun dina Table 2).

Nomer Barang

Ukuran Kolom

Laju Ngalir

(mL/mnt)

Max.Tekanan

(psi/bar)

SW-5222-004-SP(AQ)

5,4 g

5-15

400/27.5

SW-5222-012-SP(AQ)

20 g

10-25

400/27.5

SW-5222-025-SP(AQ)

33 g

10-25

400/27.5

SW-5222-040-SP(AQ)

48 g

15-30

400/27.5

SW-5222-080-SP(AQ)

105 g

25-50

350/24.0

SW-5222-120-SP(AQ)

155 g

30-60

300/20.7

SW-5222-220-SP(AQ)

300 g

40-80

300/20.7

SW-5222-330-SP(AQ)

420 g

40-80

250/17.2

meja 2. SepaFlash C18AQ RP flash cartridges.bahan bungkusan:-efisiensi luhur buleud C18(AQ)-kabeungkeut silika, 20 - 45 μm, 100 Å.

Kanggo inpo nu langkung lengkep ihwal spésifikasi detil mesin SepaBean™, atanapi inpormasi pesenan ngeunaan kartrij flash séri SepaFlash, mangga buka halaman wéb kami.


waktos pos: Oct-26-2018