Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Qendra e Kërkimit dhe Zhvillimit të Aplikimit
Prezantimi
Taxus (Taxus chinensis ose yew kinez) është një bimë e egër e mbrojtur nga vendi.Është një bimë e rrallë dhe e rrezikuar e lënë pas nga akullnajat Kuaternare.Është gjithashtu e vetmja bimë mjekësore natyrore në botë.Taxus është i shpërndarë në zonën e butë të hemisferës veriore deri në rajonin e mesit subtropikal, me rreth 11 lloje në botë.Ka 4 lloje dhe 1 varietet në Kinë, përkatësisht Taxus Verilindore, Taxus Yunnan, Taxus, Tibetan Taxus dhe Taxus Jugore.Këto pesë specie janë të shpërndara në Kinën Jugperëndimore, Kinën Jugore, Kinën Qendrore, Kinën Lindore, Kinën Veriperëndimore, Kinën Verilindore dhe Tajvanin.Bimët Taxus përmbajnë një shumëllojshmëri të gjerë të përbërësve kimikë, duke përfshirë taksane, flavonoid, lignan, steroid, acide fenolike, sesquiterpene dhe glikozide.Ilaçi i famshëm kundër tumorit Taxol (ose Paclitaxel) është një lloj taksanesh.Taxol ka mekanizma unik antikancerogjen.Taksoli mund të "ngrijë" mikrotubulat duke i krehur me to dhe të parandalojë që mikrotubulat të ndajnë kromozomet në kohën e ndarjes së qelizave, duke çuar kështu në vdekjen e qelizave në ndarje, veçanërisht të qelizave kancerogjene që rriten me shpejtësi[1].Për më tepër, duke aktivizuar makrofagët, Taxol shkakton një ulje të receptorëve TNF-α (faktori i nekrozës së tumorit) dhe lirimin e TNF-α, duke vrarë ose frenuar qelizat tumorale[2].Për më tepër, Taxol mund të nxisë apoptozën duke vepruar në rrugën e receptorit apoptotik të ndërmjetësuar nga Fas/FasL ose duke aktivizuar sistemin e proteazës së cisteinës[3].Për shkak të efektit të tij të shumëfishtë antikancerogjen, Taxol përdoret gjerësisht në trajtimin e kancerit të vezoreve, kancerit të gjirit, kancerit të mushkërive me qeliza jo të vogla (NSCLC), kancerit të stomakut, kancerit të ezofagut, kancerit të fshikëzës, kancerit të prostatës, melanomës malinje, kokës dhe qafës. kanceri, etj[4].Sidomos për kancerin e avancuar të gjirit dhe kancerin e avancuar të vezoreve, Taxol ka një efekt të jashtëzakonshëm kurues, prandaj njihet si "linja e fundit e mbrojtjes për trajtimin e kancerit".
Taxol është ilaçi më i popullarizuar kundër kancerit në tregun ndërkombëtar në vitet e fundit dhe konsiderohet të jetë një nga barnat më efektive kundër kancerit për njerëzit në 20 vitet e ardhshme.Vitet e fundit, me rritjen shpërthyese të popullsisë dhe incidencën e kancerit, kërkesa për Taxol gjithashtu është rritur ndjeshëm.Aktualisht, Taxol i kërkuar për kërkime klinike ose shkencore kryesisht nxirret drejtpërdrejt nga Taxus.Fatkeqësisht, përmbajtja e Taxol në bimë është mjaft e ulët.Për shembull, përmbajtja e Taxol është vetëm 0.069% në lëvoren e Taxus brevifolia, e cila përgjithësisht konsiderohet të ketë përmbajtjen më të lartë.Për nxjerrjen e 1 g Taxol nevojiten rreth 13,6 kg lëvore Taxus.Bazuar në këtë vlerësim, duhen 3 – 12 pemë Taxus të cilat janë më shumë se 100 vjeç për të trajtuar një pacient me kancer ovarian.Si rezultat, një numër i madh pemësh Taxus janë prerë, duke rezultuar pothuajse në zhdukje për këtë specie të çmuar.Përveç kësaj, Taxus është shumë i varfër në burime dhe i ngadalshëm në rritje, gjë që e bën të vështirë zhvillimin dhe përdorimin e mëtejshëm të Taxol.
Aktualisht, sinteza totale e Taxol është përfunduar me sukses.Megjithatë, rruga e saj sintetike është shumë komplekse dhe me kosto të lartë, duke e bërë atë të mos ketë rëndësi industriale.Metoda gjysmë sintetike e Taxol tani është relativisht e pjekur dhe konsiderohet të jetë një mënyrë efektive për të zgjeruar burimin e Taxol përveç mbjelljes artificiale.Shkurtimisht, në gjysmë-sintezën e Taxol-it, përbërësi pararendës Taxol, i cili është relativisht i bollshëm në bimët Taxus, nxirret dhe më pas shndërrohet në Taxol me sintezë kimike.Përmbajtja e 10-deacetilbaccatin Ⅲ në gjilpërat e Taxus baccata mund të jetë deri në 0.1%.Dhe gjilpërat janë të lehta për t'u rigjeneruar në krahasim me lëvoret.Prandaj, gjysmë-sinteza e Taxol-it bazuar në 10-deacetilbaccatin Ⅲ po tërheq gjithnjë e më shumë vëmendjen e studiuesve[5] (siç tregohet në Figurën 1).
Figura 1. Rruga gjysmë sintetike e Taxol bazuar në 10-deacetilbaccatin Ⅲ.
Në këtë postim, ekstrakti i bimës Taxus u pastrua nga një sistem kromatografie të lëngshme përgatitore flash SepaBean™ në kombinim me fishekë flash me fazë të kundërt SepaFlash C18 (RP) të prodhuar nga Santai Technologies.Produkti i synuar që plotëson kërkesat e pastërtisë është marrë dhe mund të përdoret në kërkimet shkencore të mëvonshme, duke ofruar një zgjidhje me kosto efektive për pastrimin e shpejtë të këtij lloji të produkteve natyrore.
| Instrumenti | Makina SepaBean™ | |
| Fisheku | 12 g fishek flash SepaFlash C18 RP (silicë sferike, 20 - 45μm, 100 Å, numri i porosisë:SW-5222-012-SP) | |
| Gjatësia e valës | 254 nm (zbulim), 280 nm (monitorim) | |
| Faza e lëvizshme | Tretësi A: Uji | |
| Tretësi B: Metanol | ||
| Shkalla e rrjedhjes | 15 ml/min | |
| Ngarkimi i mostrës | Mostra e papërpunuar 20 mg e tretur në 1 mL DMSO | |
| Gradient | Koha (min) | Tretësi B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Rezultate dhe diskutime
Kromatogrami flash për ekstraktin e papërpunuar nga Taxus është paraqitur në Figurën 2. Duke analizuar kromatogramin, produkti i synuar dhe papastërtitë arritën ndarjen bazë.Për më tepër, riprodhueshmëria e mirë u realizua edhe nga injeksione të shumta të mostrave (të dhënat nuk tregohen).Do të duhen rreth 4 orë për të përfunduar ndarjen në metodën e kromatografisë manuale me kolona xhami.Krahasuar me metodën tradicionale të kromatografisë manuale, metoda e pastrimit automatik në këtë postim kërkon vetëm 44 minuta për të përfunduar të gjithë detyrën e pastrimit (siç tregohet në figurën 3).Më shumë se 80% e kohës dhe një sasi e madhe tretësi mund të kursehet duke përdorur metodën automatike, e cila mund të ulë në mënyrë efektive koston, si dhe të përmirësojë ndjeshëm efikasitetin e punës.
Figura 2. Kromatogrami flash i ekstraktit të papërpunuar nga Taxus.
Figura 3. Krahasimi i metodës së kromatografisë manuale me metodën e pastrimit automatik.
Si përfundim, krehja e fishekëve të flashit SepaFlash C18 RP me makinën SepaBean™ mund të ofrojë një zgjidhje të shpejtë dhe efikase për pastrimin e shpejtë të produkteve natyrore si ekstrakti Taxus.
Referencat
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D dhe Nogales E. Strukturat e mikrotubulave me rezolucion të lartë zbulojnë tranzicionet strukturore në αβ-tubulinën pas hidrolizës GTP.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS dhe Horwitz SB.Marrëdhënia ndërmjet Strukturës së Taksolit dhe Taksaneve të Tjera në Induksionin e Shprehjes së Gjenit të Faktorit të Nekrozës Tumore-α dhe Citotoksicitetit.Hulumtimi i Kancerit, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A dhe Safa AR.Taksoli nxit apoptozën e varur nga kapaza-10, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paklitaksel.Shoqata Amerikane e Farmacistëve të Sistemit Shëndetësor.[2 janar 2015]
5. Bruce Ganem dhe Roland R. Franke.Paclitaxel nga Taxanes Primare: Një Perspektivë mbi Shpikjen Kreative në Kimi Organozirconium.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Ekzistojnë një seri fishekësh flash SepaFlash C18 RP me specifika të ndryshme nga Santai Technology (siç tregohet në Tabelën 2).
| Numri i artikullit | Madhësia e kolonës | Shkalla e rrjedhjes (mL/min) | Maksimumi.Presioni (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabela 2. Fishekët flash SepaFlash C18 RP.
Materialet e paketimit: silicë sferike me lidhje C18 me efikasitet të lartë, 20 - 45 μm, 100 Å
Për informacion të mëtejshëm mbi specifikimet e detajuara të makinës SepaBean™, ose informacionin e porositjes për fishekët flash të serisë SepaFlash, ju lutemi vizitoni faqen tonë të internetit
Koha e postimit: Shtator-20-2018