Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Application R&D Center
Sava lalana
Taxus (Taxus chinensis na sinoa yew) dia zava-maniry any anaty ala arovan'ny firenena.Zavamaniry tsy fahita firy sy tandindonin-doza navelan'ny glacier Quaternary izy io.Izy io ihany koa no hany zavamaniry fanafody voajanahary eran-tany.Taxus dia miparitaka any amin'ny faritra mafana ao amin'ny ila-bolantany avaratra ka hatrany amin'ny faritra afovoany subtropika, misy karazana 11 eo ho eo eran'izao tontolo izao.Misy karazany 4 sy karazany 1 ao Shina, dia ny Taxus Avaratra-Atsinanana, Taxus Yunnan, Taxus, Taxus Tibetana ary Taxus Atsimo.Ireo karazany dimy ireo dia miparitaka any amin'ny faritra Atsimo Andrefana, Shina Atsimo, Shina Afovoany, Shina Atsinanana, Shina Avaratra Andrefana, Shina Avaratra Atsinanana ary Taiwan.Ny zavamaniry Taxus dia misy singa simika isan-karazany, anisan'izany ny taxanes, flavonoids, lignans, steroids, asidra fenolika, sesquiterpenes ary glycosides.Ny Taxol (na Paclitaxel) malaza fanafody manohitra ny fivontosana dia karazana taxanes.Ny Taxol dia manana rafitra miady amin'ny homamiadana tokana.Taxol dia afaka "mampivaingana" microtubules amin'ny alalan'ny combing miaraka amin'izy ireo ary manakana ny microtubules tsy hanasaraka ny chromosomes amin'ny fotoana fizarazaran'ny sela, ka mitarika ho amin'ny fahafatesan'ny sela mizara, indrindra fa haingana nitombo sela homamiadana [1].Ankoatra izany, amin'ny fampandehanana ny macrophages, Taxol dia miteraka fihenam-bidy amin'ny TNF-α (tumor necrosis factor) ary famotsorana ny TNF-α, ka mamono na manakana ny sela tumor [2].Ankoatr'izay, ny Taxol dia afaka mamporisika ny apoptose amin'ny alàlan'ny hetsika amin'ny làlan'ny receptor apoptotic nanelanelana ny Fas / FasL na ny fampandehanana ny rafitra protease cysteine [3].Noho ny voka-dratsiny antikansera marobe, Taxol dia ampiasaina betsaka amin'ny fitsaboana ny homamiadan'ny ovarian, ny homamiadan'ny nono, ny homamiadan'ny havokavoka tsy kely (NSCLC), ny homamiadan'ny vavony, ny homamiadan'ny vavony, ny homamiadan'ny tatavia, ny homamiadan'ny prostaty, ny melanoma maloto, ny loha sy ny tendany. kansera, sns[4].Indrindra ho an'ny homamiadan'ny nono efa mandroso sy ny homamiadan'ny ovarian mandroso, Taxol dia manana fiantraikany fanasitranana miavaka, noho izany dia fantatra amin'ny anarana hoe "andalana fiarovana farany amin'ny fitsaboana homamiadana".
Taxol no fanafody miady amin'ny homamiadana malaza indrindra amin'ny tsena iraisam-pirenena tato anatin'ny taona vitsivitsy ary heverina ho iray amin'ireo fanafody miady amin'ny homamiadana mahomby indrindra ho an'ny olombelona ao anatin'ny 20 taona manaraka.Tao anatin'ny taona vitsivitsy izay, miaraka amin'ny fitomboan'ny isan'ny mponina sy ny homamiadana, dia nitombo be ihany koa ny fangatahana Taxol.Amin'izao fotoana izao, ny Taxol takiana amin'ny fikarohana klinika na siantifika dia nalaina mivantana avy amin'ny Taxus.Indrisy anefa fa ambany dia ambany ny votoatin'ny Taxol amin'ny zavamaniry.Ohatra, ny votoatin'ny Taxol dia 0,069% fotsiny ao amin'ny hoditry ny Taxus brevifolia, izay heverina ho manana votoaty ambony indrindra.Ho an'ny fitrandrahana 1 g Taxol dia mila hodi-kazo Taxus 13,6 kg eo ho eo.Araka io tombana io dia mila hazo Taxus 3 – 12 izay mihoatra ny 100 taona ny fitsaboana ny mararin’ny homamiadan’ny ovarian.Vokany, betsaka ny hazo Taxus nokapaina, ka saika ho lany tamingana ity karazana sarobidy ity.Ho fanampin'izay, tena mahantra ny loharanon-karena ary miadana ny fitomboana i Taxus, izay manasarotra ny fampandrosoana sy ny fampiasana ny Taxol.
Amin'izao fotoana izao dia vita soa aman-tsara ny fitambaran'ny Taxol.Na izany aza, ny lalana synthetic dia tena sarotra sy lafo vidy, ka tsy manana lanjany indostrialy.Ny fomba semi-synthetic an'ny Taxol dia efa matotra ankehitriny ary heverina ho fomba mahomby hanitarana ny loharanon'ny Taxol ankoatra ny fambolena artifisialy.Raha fohifohy, ao amin'ny semi-synthesis ny Taxol, ny Taxol precursor compound izay be dia be amin'ny zavamaniry Taxus dia nalaina ary avy eo niova ho Taxol tamin'ny alàlan'ny synthesis simika.Ny votoatin'ny 10-deacetylbaccatin Ⅲ ao amin'ny fanjaitra Taxus baccata dia mety hahatratra hatramin'ny 0,1%.Ary ny fanjaitra dia mora regenerate raha oharina amin'ny hodi-kazo.Noho izany, ny semi-synthesis ny Taxol mifototra amin'ny 10-deacetylbaccatin Ⅲ dia misarika ny sain'ny mpikaroka bebe kokoa [5] (araka ny aseho amin'ny sary 1).
Sary 1. Ny lalana semi-synthetic an'ny Taxol mifototra amin'ny 10-deacetylbaccatin Ⅲ.
Ato amin'ity lahatsoratra ity, nodiovina tamin'ny alalan'ny rafitra chromatography ranon-javatra fanomanana tselatra SepaBean ™ ny fitrandrahana zavamaniry Taxus miaraka amin'ny cartridges tselatra mivadika SepaFlash C18 (RP) novokarin'ny Santai Technologies.Ny vokatra kendrena mahafeno ny fepetra takiana amin'ny fahadiovana dia azo ary azo ampiasaina amin'ny fikarohana siantifika manaraka, manolotra vahaolana mahomby amin'ny fanadiovana haingana an'io karazana vokatra voajanahary io.
| fitaovana | milina SepaBean™ | |
| Cartridge | 12 g SepaFlash C18 RP tselatra cartridge (silika boribory, 20 - 45μm, 100 Å, laharana baiko:SW-5222-012-SP) | |
| halavan'ny onjam | 254 nm (famantarana), 280 nm (fanaraha-maso) | |
| Dingana finday | Solvent A: Rano | |
| Solvent B: Metanol | ||
| tahan'ny fikoriana | 15 mL/min | |
| Sample loading | 20 mg santionany manta levona amin'ny 1 mL DMSO | |
| gradient | Ora (min) | Solvent B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Valiny sy dinika
Ny chromatogram flash ho an'ny fitrandrahana crude avy amin'ny Taxus dia aseho amin'ny sary 2. Tamin'ny famakafakana ny chromatogram, ny vokatra kendrena sy ny loto dia nahatratra ny fisarahana fototra.Ankoatr'izay, ny famerenana tsara dia tsapa ihany koa tamin'ny alàlan'ny tsindrona santionany maro (data tsy aseho).Haharitra 4 ora eo ho eo ny fanasarahana amin'ny fomba chromatography manual miaraka amin'ny tsanganana fitaratra.Raha ampitahaina amin'ny fomba fanao chromatography manual, ny fomba fanadiovana mandeha ho azy amin'ity lahatsoratra ity dia mila 44 minitra fotsiny mba hamitana ny asa fanadiovana manontolo (araka ny aseho amin'ny sary 3).Mihoatra ny 80% amin'ny fotoana sy ny solvent be dia be dia azo vonjena amin'ny alàlan'ny fomba mandeha ho azy, izay afaka mampihena ny vidiny ary manatsara ny fahombiazan'ny asa.
Figure 2. Ny chromatogram flash amin'ny fitrandrahana crude avy amin'ny Taxus.
Sary 3. Ny fampitahana ny fomba chromatography manual amin'ny fomba fanadiovana mandeha ho azy.
Ho fehin-kevitra dia afaka manolotra vahaolana haingana sy mahomby ho an'ny fanadiovana haingana ny vokatra voajanahary toy ny fitrandrahana Taxus ny fampifangaroana kasety tselatra SepaFlash C18 RP miaraka amin'ny milina SepaBean™.
References
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D ary Nogales E. Ny rafitra microtubule avo lenta dia manambara ny fifindrana ara-drafitra ao amin'ny αβ-tubulin amin'ny hydrolysis GTP.Cell, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS ary Horwitz SB.Fifandraisana eo amin'ny firafitry ny Taxol sy ny Taxane hafa amin'ny fampidirana ny Tumor Necrosis Factor-α Gene Expression sy Cytotoxicity.Fikarohana momba ny homamiadana, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Park SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A ary Safa AR.Taxol dia mampirisika ny Apoptosis miankina amin'ny Caspase-10, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.Ny American Society of Health-System Pharmacists.[2 Janoary 2015]
5. Bruce Ganem sy Roland R. Franke.Paclitaxel avy amin'ny Taxanes Kilonga: fomba fijery momba ny famoronana famoronana amin'ny simia Organozirconium.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Misy andian-tsarimihetsika SepaFlash C18 RP miaraka amin'ny mari-pamantarana samihafa avy amin'ny Santai Technology (araka ny hita ao amin'ny tabilao 2).
| Laharan'ny entana | Haben'ny tsanganana | Taham-pidirana (mL/min) | Max.Pressure (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
Tabilao 2. SepaFlash C18 RP flash cartridges.
Fitaovana famonosana: silika mifatotra C18, 20 - 45 μm, 100 Å
Raha mila fanazavana fanampiny momba ny antsipiriany momba ny milina SepaBean ™, na ny fampahalalana momba ny famandrihana amin'ny cartridges flash andiany SepaFlash, tsidiho azafady ny tranokalanay.
Fotoana fandefasana: Sep-20-2018