Meiyuan Qian, Yuefeng Tan, Bo Xu
Aplikasi R & D Center
Bubuka
Taxus (Taxus chinensis atawa Cina yew) nyaéta tutuwuhan liar anu ditangtayungan ku nagara.Éta mangrupikeun tutuwuhan langka sareng kaancam anu tinggaleun ku gletser Kuarterér.Éta ogé hiji-hijina pepelakan ubar alami di dunya.Taxus disebarkeun di zona sedeng di belahan bumi kalér nepi ka daérah pertengahan subtropis, kalayan sakitar 11 spésiés di dunya.Aya 4 spésiés jeung 1 variétas di Cina, nyaéta Northeast Taxus, Yunnan Taxus, Taxus, Tibetan Taxus jeung Southern Taxus.Lima spésiés ieu disebarkeun di Cina Kulon Kidul, Cina Kidul, Cina Tengah, Cina Wétan, Cina Kulon Kulon, Cina Kalér jeung Taiwan.Tutuwuhan Taxus ngandung rupa-rupa komponén kimiawi, kaasup taxanes, flavonoid, lignans, stéroid, asam phenolic, sesquiterpenes jeung glikosida.Ubar anti tumor anu kasohor Taxol (atanapi Paclitaxel) mangrupikeun jinis taxanes.Taxol gaduh mékanisme antikanker anu unik.Taxol tiasa "ngabekukeun" mikrotubulus ku cara nyisiran sareng aranjeunna sareng nyegah mikrotubulus pikeun misahkeun kromosom dina waktos pamisahan sél, ku kituna nyababkeun maotna sél ngabagi, khususna sél kanker anu gancang proliferasi[1].Saterusna, ku ngaktifkeun makrofag, Taxol ngabalukarkeun panurunan dina reséptor TNF-α (tumor necrosis factor) jeung sékrési TNF-α, kukituna maéhan atawa ngahambat sél tumor[2].Sumawona, Taxol tiasa ngainduksi apoptosis ku cara ngalaksanakeun jalur reséptor apoptosis anu dimédiasi ku Fas / FasL atanapi ngaktifkeun sistem protease sistein [3].Kusabab sababaraha pangaruh antikanker target na, Taxol seueur dianggo dina pengobatan kanker indung, kanker payudara, kanker paru-paru sél non-leutik (NSCLC), kanker lambung, kanker esophageal, kanker kandung kemih, kanker prostat, melanoma maligna, sirah sareng beuheung. kanker, jsb[4].Utamana pikeun kanker payudara maju sareng kanker ovarium canggih, Taxol ngagaduhan pangaruh kuratif anu luar biasa, ku kituna katelah "garis pertahanan terakhir pikeun pengobatan kanker".
Taxol mangrupikeun ubar antikanker anu pang populerna di pasar internasional dina taun-taun ayeuna sareng dianggap salah sahiji ubar antikanker anu paling efektif pikeun manusa dina 20 taun ka hareup.Dina taun-taun ayeuna, kalayan paningkatan populasi anu ngabeledug sareng insiden kanker, paménta Taxol ogé ningkat sacara signifikan.Ayeuna, Taxol diperlukeun pikeun panalungtikan klinis atawa ilmiah utamana sasari langsung ti Taxus.Hanjakal, eusi Taxol dina tutuwuhan rada low.Contona, eusi Taxol ngan 0,069% dina babakan Taxus brevifolia, nu umumna dianggap boga eusi pangluhurna.Pikeun ékstraksi 1 g Taxol, peryogi kira-kira 13,6 kg kulit Taxus.Dumasar kana perkiraan ieu, peryogi 3 - 12 tangkal Taxus anu umurna langkung ti 100 taun pikeun ngubaran pasien kanker ovarium.Hasilna, sajumlah badag tangkal Taxus geus ditegor, hasilna ampir punah pikeun spésiés adi ieu.Sajaba ti éta, Taxus miskin pisan dina sumberdaya sarta slow dina tumuwuhna, nu ngajadikeun hésé pikeun ngembangkeun salajengna jeung utilization of Taxol.
Ayeuna, total sintésis Taxol parantos suksés réngsé.Tapi, jalur sintétisna rumit pisan sareng béaya tinggi, sahingga henteu pentingna industri.Métode semi-sintétik Taxol ayeuna kawilang dewasa sareng dianggap cara anu efektif pikeun ngalegaan sumber Taxol salian ti penanaman buatan.Sakeudeung, dina semi-sintésis Taxol, sanyawa prékursor Taxol anu rélatif loba pisan dina tutuwuhan Taxus diekstrak lajeng dirobah jadi Taxol ku sintésis kimiawi.Eusi 10-deacetylbaccatin Ⅲ dina jarum Taxus baccata tiasa dugi ka 0,1%.Sareng jarumna gampang regenerasi dibandingkeun sareng babakan.Ku alatan éta, semi-sintésis Taxol dumasar kana 10-deacetylbaccatin Ⅲ ieu attracting beuki loba perhatian ti peneliti [5] (sakumaha ditémbongkeun dina Gambar 1).
Gambar 1. Jalur semi-sintétik Taxol dumasar kana 10-deacetylbaccatin Ⅲ.
Dina tulisan ieu, ekstrak tutuwuhan Taxus dimurnikeun ku sistem kromatografi cair préparasi lampu kilat mesin SepaBean™ dina kombinasi sareng kartrid flash fase balik (RP) SepaFlash C18 anu diproduksi ku Santai Technologies.Produk target minuhan sarat purity dicandak tur bisa dipaké dina panalungtikan ilmiah saterusna, nawarkeun solusi ongkos-éféktif pikeun purifikasi gancang jenis ieu produk alam.
| Instrumén | Mesin SepaBean™ | |
| Kartrid | 12 g SepaFlash C18 RP flash cartridge (silika buleud, 20 - 45μm, 100 Å, Jumlah pesenan:SW-5222-012-SP) | |
| Panjang gelombang | 254 nm (deteksi), 280 nm (monitoring) | |
| Fase mobile | Pangleyur A: Cai | |
| Pangleyur B: Métanol | ||
| Laju aliran | 15 ml/min | |
| Sampel loading | 20 mg sampel atah leyur dina 1 ml DMSO | |
| Gradién | Waktos (mnt) | Pangleyur B (%) |
| 0 | 10 | |
| 5 | 10 | |
| 7 | 28 | |
| 14 | 28 | |
| 16 | 40 | |
| 20 | 60 | |
| 27 | 60 | |
| 30 | 72 | |
| 40 | 72 | |
| 43 | 100 | |
| 45 | 100 | |
Hasil sareng diskusi
Kromatogram kilat pikeun ekstrak kasar tina Taxus dipidangkeun dina Gambar 2. Ku analisa kromatogram, produk udagan sareng pangotor ngahontal pamisahan dasar.Saterusna, reproducibility alus ieu ogé direalisasikeun ku sababaraha injections sampel (data teu ditémbongkeun).Butuh kira-kira 4 jam pikeun ngarengsekeun pamisahan dina metode kromatografi manual sareng kolom kaca.Ngabandingkeun sareng metode kromatografi manual tradisional, metode purifikasi otomatis dina tulisan ieu ngan butuh 44 menit pikeun ngarengsekeun sadayana tugas purifikasi (sapertos anu dipidangkeun dina Gambar 3).Langkung ti 80% waktos sareng jumlah pangleyur anu ageung tiasa disimpen ku cara nyandak metode otomatis, anu sacara efektif tiasa ngirangan biaya sareng ningkatkeun efisiensi kerja.
Gambar 2. Kromatogram flash ekstrak kasar tina Taxus.
Gambar 3. Perbandingan metode kromatografi manual sareng metode purifikasi otomatis.
Kasimpulanana, nyisiran kartrij flash SepaFlash C18 RP sareng mesin SepaBean™ tiasa nawiskeun solusi anu gancang sareng efisien pikeun ngamurnikeun gancang produk alami sapertos ekstrak Taxus.
Rujukan
1. Alushin GM, Lander GC, Kellogg EH, Zhang R, Baker D jeung Nogales E. Struktur microtubule resolusi luhur nembongkeun transisi struktural dina αβ-tubulin kana hidrolisis GTP.sél, 2014, 157 (5), 1117-1129.
2. Burkhart CA, Berman JW, Swindell CS jeung Horwitz SB.Hubungan antara Struktur Taxol na Taxanes lianna dina induksi Tumor Necrosis Factor-α Éksprési Gen jeung Sitotoksisitas.Kanker Panalungtikan, 1994, 54 (22), 5779-5782.
3. Taman SJ, Wu CH, Gordon JD, Zhong X, Emami A jeung Safa AR.Taxol induces Caspase-10-gumantung Apoptosis, J. Biol.Chem., 2004, 279, 51057-51067.
4. Paclitaxel.The Amérika Society of Kaséhatan-System Pharmacists.[2 Januari 2015]
5. Bruce Ganem jeung Roland R. Franke.Paclitaxel ti Taxanes primér: A Perspéktif on Invention Kreatif dina Kimia Organozirconium.J. Org.Chem., 2007, 72 (11), 3981-3987.
Aya runtuyan cartridges flash SepaFlash C18 RP kalawan spésifikasi béda ti Téhnologi Santai (sakumaha ditémbongkeun dina Table 2).
| Nomer Barang | Ukuran Kolom | Laju Ngalir (mL/mnt) | Max.Tekanan (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP | 5,4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222-220-SP | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
meja 2. SepaFlash C18 RP flash cartridges.
Bahan bungkusan: Silika kabeungkeut C18 buleud efisiensi luhur, 20 - 45 μm, 100 Å
Kanggo inpo nu langkung lengkep ihwal spésifikasi detil mesin SepaBean™, atanapi inpormasi pesenan ngeunaan kartrij flash séri SepaFlash, mangga kunjungan halaman wéb kami.
waktos pos: Sep-20-2018