Mingzu Yang, Bo Xu
응용 프로그램 R & D 센터
소개
항생제는 미생물 (박테리아, 곰팡이, 액 티노 마이 세트 포함) 또는 화학적으로 합성 또는 반 합성화 된 유사한 화합물에 의해 생성 된 2 차 대사 산물의 종류입니다. 항생제는 다른 미생물의 성장과 생존을 억제 할 수 있습니다. 인간 페니실린이 발견 한 최초의 항생제는 1928 년 영국 미생물 학자 알렉산더 플레밍 (Alexander Fleming)에 의해 발견되었다. 그는 곰팡이가 항균 물질을 분비해야한다고 가정했는데, 1928 년 페니실린으로 지명되었지만, 그 당시 활성 성분은 정제되지 않았다. 1939 년 옥스포드 대학의 Ernst Chain과 Howard Florey는 박테리아 감염을 치료할 수있는 약물을 개발하기로 결정했습니다. 균주를 얻기 위해 플레밍에 접촉 한 후, 균주에서 페니실린을 성공적으로 추출하고 정제했습니다. 치료 약물로서 페니실린을 성공적으로 발전시키기 위해 Fleming, Chain 및 Florey는 1945 년 노벨 의학 상을 공유했습니다.
항생제는 박테리아 감염을 치료하거나 예방하기 위해 항균제로 사용됩니다. 항균제로 사용 된 몇 가지 주요 범주의 항생제가 있습니다 : β- 락탐 항생제 (페니실린, 세 팔로 스포린 등 포함), 아미노 글리코 시드 항생제, 마크로 라이드 항생제, 테트라 사이클린 항생제, 엽람 발전기 등의 소스, 생물학적 항생제 등. 그리고 총 합성. 생물학적 발효에 의해 생성 된 항생제는 화학적 안정성, 독성 부작용, 항균성 스펙트럼 및 기타 문제로 인해 화학적 방법에 의해 구조적으로 변형되어야한다. 화학적으로 변형 된 후, 항생제는 안정성 증가, 독성 부작용 감소, 확장 된 항균성 스펙트럼, 약물 내성 감소, 생체 이용률 향상, 약물 치료의 효과가 향상 될 수있다. 따라서 반자도 항생제는 현재 항생제 발달에서 가장 인기있는 방향입니다.
반-합성 항생제의 발달에서, 항생제는 미생물 발효 생성물로부터 유래되기 때문에 낮은 순도, 많은 부산물 및 복잡한 성분의 특성을 갖는다. 이 경우, 반합성 항생제에서 불순물의 분석 및 제어가 특히 중요하다. 불순물을 효과적으로 식별하고 특성화하기 위해서, 반합성 항생제의 합성 생성물로부터 충분한 양의 불순물을 얻을 필요가있다. 일반적으로 사용되는 불순물 준비 기술 중에서 플래시 크로마토 그래피는 대량의 샘플 로딩 양, 저비용, 시간 절약 등과 같은 장점을 가진 비용 효율적인 방법입니다. 플래시 크로마토 그래피는 합성 연구자들에 의해 점점 더 많이 사용되었습니다.
이 포스트에서, 반-합성 아미노 글리코 시드 항생제의 주요 불순물은 샘플로서 이용되고 Flash 크로마토 그래피 시스템 Sepabean ™ 기계와 결합 된 Sepaflash C18AQ 카트리지에 의해 정제되었다. 요구 사항을 충족시키는 대상 제품이 성공적으로 얻어졌으며, 이들 화합물의 정제를위한 매우 효율적인 솔루션을 시사한다.
실험 섹션
이 샘플은 지역 제약 회사가 친절하게 제공했습니다. 샘플은 일종의 아미노 다 환식 탄수화물이었고, 분자 구조는 아미노 글리코 시드 항생제와 유사 하였다. 샘플의 극성은 다소 높아서 물에 매우 용해되었습니다. 샘플 분자 구조의 개략도는도 1에 도시되어있다. 원시 샘플의 순도는 HPLC에 의해 분석 된 바와 같이 약 88%였다. 이들 높은 극성의 이들 화합물의 정제를 위해, 샘플은 이전 경험에 따라 일반 C18 컬럼에서 간신히 유지 될 것이다. 따라서, 샘플 정제를 위해 C18AQ 컬럼을 사용 하였다.
그림 1. 샘플 분자 구조의 개략도.
샘플 용액을 제조하기 위해, 50 mg 원유 샘플을 5 ml 순수수에 용해시킨 다음 초음파 화하여 완전히 명확한 용액이되었다. 이어서, 샘플 용액을 인젝터에 의해 플래시 컬럼에 주입 하였다. 플래시 정제의 실험 설정은 표 1에 나열되었다.
| 기구 | Sepabean ™ 기계 2 | |
| 카트리지 | 12 g Sepaflash C18AQ RP 플래시 카트리지 (구형 실리카, 20-45μm, 100Å, 주문 번호 : SW-5222-012-SP (AQ)) | |
| 파장 | 204 nm, 220 nm | |
| 이동 단계 | 솔벤트 A : 물 용매 B : 아세토 니트릴 | |
| 유량 | 15 ml/분 | |
| 샘플 로딩 | 50 mg | |
| 구배 | 시간 (Min) | 용매 B (%) |
| 0 | 0 | |
| 19.0 | 8 | |
| 47.0 | 80 | |
| 52.0 | 80 | |
결과와 토론
C18AQ 카트리지에서 샘플의 플래시 크로마토 그램은도 2에 도시되어있다.도 2에 도시 된 바와 같이, 고도로 극성 샘플은 C18AQ 카트리지에 효과적으로 유지되었다. 수집 된 분획에 대한 Lyopholization 후, 표적 생성물은 HPLC 분석에 의해 순도가 96.2% (도 3에 도시 된 바와 같이)를 가졌다. 결과는 정제 된 생성물이 다음 단계 연구 및 개발에 추가로 활용 될 수 있음을 나타냈다.
그림 2. C18AQ 카트리지에서 샘플의 플래시 크로마토 그램.
그림 3. 대상 제품의 HPLC 크로마토 그램.
결론적으로, Flash 크로마토 그래피 시스템 Sepabean ™ 기계와 결합 된 Sepaflash C18AQ RP 플래시 카트리지는 고도로 극성 샘플의 정제를위한 빠르고 효과적인 솔루션을 제공 할 수 있습니다.
Sepaflash C18AQ RP 플래시 카트리지 정보
Santai 기술과는 다른 사양을 가진 Sepaflash C18AQ RP 플래시 카트리지가 일련의 일련의 표 2에 표시되어 있습니다.
| 항목 번호 | 열 크기 | 유량 (ml/min) | 최대 압력 (psi/bar) |
| SW-5222-004-SP (AQ) | 5.4 g | 5-15 | 400/27.5 |
| SW-5222-012-SP (AQ) | 20 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-025-SP (AQ) | 33 g | 10-25 | 400/27.5 |
| SW-5222-040-SP (AQ) | 48 g | 15-30 | 400/27.5 |
| SW-5222-080-SP (AQ) | 105 g | 25-50 | 350/24.0 |
| SW-5222-120-SP (AQ) | 155 g | 30-60 | 300/20.7 |
| SW-5222220-SP (AQ) | 300 g | 40-80 | 300/20.7 |
| SW-5222-330-SP (AQ) | 420 g | 40-80 | 250/17.2 |
표 2. Sepaflash C18AQ RP 플래시 카트리지. 포장 재료 : 고효율 구형 C18 (AQ)-본드 실리카, 20-45 μm, 100Å.
Sepabean ™ Machine의 자세한 사양 또는 Sepaflash Series Flash Cartridges에 대한 주문 정보에 대한 자세한 내용은 웹 사이트를 방문하십시오.
후 시간 : 2018 년 10 월 26 일
