Fuqia në instrument dhe prisni për të shpejtë "Readbare Silica do të fillojë të shpërndahet në tretësirë ujore të pH 9, megjithëse shumë ngadalë. Në tretës me pH më të ulët se 9 silica e zhveshur është e qëndrueshme. Nëse pH i tretësit tejkalon 9, shpërbërja do të shpejtojë pasi pH në rritje. Për silicë të funksionalizuar, varg i mundshëm i Solvent PH është midis 2 dhe 12 që nga mbetjet e mbetjeve, që shpërblen. Sigurohuni që lidhja e Rrjetit iPad të jetë e saktë, dhe ruteri është i mundësuar.
Për pastrimin optimal me kolonat C18 Flash, ju lutemi ndiqni këto hapa:
① Flush kolonën me 100% të tretësit të fortë (organik) për 10 - 20 cv (vëllimi i kolonës), zakonisht metanol ose acetonitril.
② Flush kolonën me 50% të fortë + 50% ujore (nëse kërkohen aditivë, përfshini ato) për 3 - 5 CV të tjera.
③ Flush kolonën me kushtet fillestare të gradientit për 3 - 5 cvs.
Për madhësinë e kolonës midis 4G dhe 330G, lidhësi standard Luer përdoret në këto kolona flash. Për madhësinë e kolonës prej 800g, 1600g dhe 3000g, adaptorët shtesë të lidhësit duhet të përdoren për të montuar këto kolona të mëdha flash në sistemin e kromatografisë flash. Ju lutemi referojuni kompletit të Adapterit të Dokumentit Santai për 800g, 1600G, 3 kg kolona flash për më shumë detaje.
Për kolonën e fazës normale, rekomandohet të përdorni fazën e lëvizshme ku raporti i metanolit nuk kalon 25%.
Në përgjithësi, rekomandohet të përdorni fazën e lëvizshme ku raporti i tretësve polarë nuk kalon 5%. Tretësirat polarë përfshijnë DMSO, DMF, THF, çaj etj.
Ngarkimi i mostrës së ngurtë është një teknikë e dobishme për të ngarkuar mostrën që duhet të pastrohet në një kolonë, veçanërisht për mostrat e tretshmërisë së ulët. Në këtë rast, fisheku i Ilok Flash është një zgjedhje shumë e përshtatshme.
Në përgjithësi, mostra shpërndahet në një tretës të përshtatshëm dhe adsorbohet në një adsorbant të ngurtë i cili mund të jetë i njëjtë me atë që përdoret në kolonat flash, duke përfshirë tokat diatomaceous ose silicë ose materiale të tjera. Pas heqjes / avullimit të tretësit të mbetur, adsorbenti është vendosur në majë të një kolone të mbushur pjesërisht ose në një fishek të ngarkuar të ngurtë bosh. Për informacion më të detajuar, ju lutemi referojuni dokumentit Ilok-SL Cartridge Udhëzues për më shumë detaje.
Vëllimi i kolonës është afërsisht i barabartë me vëllimin e vdekur (VM) kur injoroni vëllimin shtesë në tubat që lidhin kolonën me injektorin dhe detektorin.
Koha e vdekur (TM) është koha e nevojshme për zgjatjen e një komponenti të pakontrolluar.
Vëllimi i Vdekur (VM) është vëllimi i fazës së lëvizshme të nevojshme për zgjatjen e një komponenti të pakontrolluar. Vëllimi i vdekur mund të llogaritet nga ekuacioni i mëposhtëm: VM = F0*TM.
Ndër ekuacionin e mësipërm, F0 është shkalla e rrjedhës së fazës së lëvizshme.
Jo, silica e mbuluar me fund është e pazgjidhshme në ndonjë tretës organik të përdorur zakonisht.
Kolonat e flashit të silicës janë të disponueshme dhe për përdorim të vetëm, por me trajtimin e duhur, fishekët e silicës mund të ripërdoren pa sakrifikuar performancën. Në mënyrë që të ripërdoret, kolona e flashit silicë duhet të thahet thjesht nga ajri i kompresuar ose skuqet dhe ruhet në izopropanol.
Magazinimi i duhur do të lejojë që kolonat C18 Flash të ripërdoren:
• Asnjëherë mos lejoni që kolona të thahet pas përdorimit.
• Hiqni të gjithë modifikuesit organikë duke ndezur kolonën me 80% metanol ose acetonitril në ujë për 3 - 5 cvs.
• Ruani kolonën në tretësin e sipërpërmendur të Flushing -ut me pajisje fundore në vend.
Për kolonat me madhësi të madhe mbi 220g, efekti termik është i dukshëm në procesin e para-ekuilibrit. Rekomandohet të vendosni shkallën e rrjedhës në 50-60% të shkallës së sugjeruar të rrjedhës në procesin para ekuilibrit për të shmangur efektin e dukshëm termik.
Efekti termik i tretësit të përzier është më i dukshëm sesa tretësi i vetëm. Merrni si shembull sistemin tretës cikloheksan/etil acetat, sugjerohet që të përdorni 100% cikloheksan në procesin e para-ekuilibrit. Kur të përfundojë para-ekuilibrimi, eksperimenti i ndarjes mund të kryhet sipas sistemit të paracaktuar të tretësit.
Për SepaflashTMKolonat standarde të serive, lidhësit e përdorur janë LUER-LOCK IN dhe LUER-PLIP OUT. Këto kolona mund të montohen drejtpërdrejt në sistemet e kombinimit të Isco.
Për kolonat e serive të Sepaflash HP, Series Bonded ose Iloktm Series, lidhësit e përdorur janë Luer-Lock In dhe Luer-Lock Out. Këto kolona gjithashtu mund të montohen në sistemet e kombinimit të Isco përmes adaptorëve shtesë. Për detajet e këtyre adaptorëve, ju lutemi referojuni Kit të Adapterit të Dokumentit Santai për kolonat Flash 800G, 1600G, 3 kg.
Vëllimi i kolonës së parametrave (CV) është veçanërisht i dobishëm për të përcaktuar faktorët e shkallëzimit. Disa kimistë mendojnë se vëllimi i brendshëm i fishekut (ose kolonës) pa material paketimi brenda është vëllimi i kolonës. Sidoqoftë, vëllimi i një kolone boshe nuk është CV. CV e çdo kolone ose fishek është vëllimi i hapësirës që nuk është e zënë nga materiali i paracaktuar në një kolonë. Ky vëllim përfshin si vëllimin intersticial (vëllimin e hapësirës jashtë grimcave të paketuara) dhe porozitetin e brendshëm të grimcave (vëllimi i poreve).
Kolonat e aluminit Flash janë një mundësi alternative kur mostrat janë të ndjeshme dhe të prirur për degradim në xhel silicë.
Presioni i pasëm i kolonës flash është e lidhur me madhësinë e grimcave të materialit të paketuar. Materiali i paketuar me madhësi të grimcave më të vogla do të rezultojë në presion më të lartë të shpinës për kolonën Flash. Prandaj, shkalla e rrjedhës së fazës celulare të përdorur në kromatografinë flash duhet të ulet në përputhje me rrethanat, në mënyrë që të parandalojë që sistemi flash të ndalojë së punuari.
Presioni i pasëm i kolonës flash është gjithashtu proporcionale me gjatësinë e kolonës. Trupi më i gjatë i kolonës do të rezultojë në presion më të lartë të shpinës për kolonën Flash. Për më tepër, presioni i pasmë i kolonës flash është në përpjesëtim me ID (diametri i brendshëm) i trupit të kolonës. Më në fund, presioni i pasëm i kolonës flash është në përpjesëtim me viskozitetin e fazës së lëvizshme të përdorur në kromatografinë flash.