La potencia del instrumento y la espera de su pronta "la sílice de lectura readlaria comenzará a disolverse en una solución acuosa de pH 9, aunque muy lentamente. En el solvente con pH inferior a 9, la sílice desnuda es estable. Si el pH del solvente excede 9, la disolución se acelerará a medida que el pH aumenta el pH. Asegúrese de que la conexión de red de iPad sea correcta y que el enrutador esté encendido.
Para una purificación óptima con columnas flash C18, siga estos pasos:
① Ajuste la columna con el 100% del solvente fuerte (orgánico) para 10 a 20 cvs (volumen de columna), típicamente metanol o acetonitrilo.
② Enjuague la columna con 50% fuerte + 50% acuoso (si se requieren aditivos, inclúyalos) para otros 3 - 5 cvs.
③ Ajuste la columna con las condiciones iniciales de gradiente para 3 - 5 cvs.
Para el tamaño de la columna entre 4G y 330 g, se utiliza el conector Luer estándar en estas columnas flash. Para el tamaño de la columna de 800 g, 1600 g y 3000 g, se deben usar adaptadores de conector adicionales para montar estas grandes columnas flash en el sistema de cromatografía flash. Consulte el kit de adaptador Santai del documento para columnas de flash de 300 g, 1600 g, 3 kg para obtener más detalles.
Para la columna de fase normal, se recomienda usar la fase móvil donde la relación de metanol no excede el 25%.
En general, se recomienda usar la fase móvil donde la relación de los solventes polares no excede el 5%. Los solventes polares incluyen DMSO, DMF, THF, té, etc.
La carga de muestra sólida es una técnica útil para cargar la muestra que se purificará en una columna, particularmente para muestras de baja solubilidad. En este caso, el cartucho Flash Ilok es una opción muy adecuada.
En general, la muestra se disuelve en un disolvente adecuado y se adsorbe en un adsorbante sólido que podría ser el mismo que se usa en columnas flash, incluidas las tierras diatomeas o la sílice u otros materiales. Después de la eliminación / evaporación del disolvente residual, el adsorbente se coloca encima de una columna parcialmente llena o en un cartucho de carga sólido vacío. Para obtener información más detallada, consulte la Guía del usuario del cartucho Ilok-SL del documento para obtener más detalles.
El volumen de la columna es aproximadamente igual al volumen muerto (VM) al ignorar el volumen adicional en los tubos que conecta la columna con el inyector y el detector.
El tiempo muerto (TM) es el tiempo requerido para la elución de un componente nocivo.
El volumen muerto (VM) es el volumen de la fase móvil requerida para la elución de un componente nocivo. El volumen muerto se puede calcular mediante la siguiente ecuación: vm = f0*tm.
Entre la ecuación anterior, F0 es el caudal de la fase móvil.
No, la sílice cubierta de fin es insoluble en cualquier solvente orgánico comúnmente utilizado.
Las columnas de flash de sílice son desechables y para un solo uso, pero con el manejo adecuado, los cartuchos de sílice se pueden reutilizar sin sacrificar el rendimiento. En orden de reutilizarse, la columna de flash de sílice debe simplemente secarse por aire comprimido o lavarse y almacenarse en isopropanol.
El almacenamiento adecuado permitirá reutilizar columnas flash C18:
• Nunca permita que la columna se seque después de usar.
• Retire todos los modificadores orgánicos enjuagando la columna con 80% de metanol o acetonitrilo en agua durante 3 - 5 cvs.
• Almacene la columna en el solvente de descarga mencionado anteriormente con accesorios finales en su lugar.
Para las columnas de gran tamaño por encima de 220 g, el efecto térmico es obvio en el proceso de pre-equilibrio. Se recomienda establecer la velocidad de flujo al 50-60% de la velocidad de flujo sugerida en el proceso previo al equilibrio para evitar un efecto térmico obvio.
El efecto térmico del solvente mixto es más obvio que el solvente único. Tome el sistema de ciclohexano/acetato de etilo como ejemplo, se sugiere que use al 100% de ciclohexano en el proceso previo al equilibrio. Cuando se completa el previo equilibrio, el experimento de separación podría realizarse de acuerdo con el sistema de solventes preestablecidos.
Para sepaflashTMColumnas de serie estándar, los conectores utilizados son Luer-Lock In y Luer-Slip Out. Estas columnas podrían montarse directamente en los sistemas Combiflash de ISCO.
Para las series SepaFlash HP, la serie unida o las columnas de la serie ILOKTM, los conectores utilizados son Luer-Lock adentro y Luer-Lock Out. Estas columnas también podrían montarse en los sistemas Combiflash de ISCO a través de adaptadores adicionales. Para obtener los detalles de estos adaptadores, consulte el kit de adaptador Santai del documento para columnas flash 800G, 1600 g, 3 kg.
El volumen de la columna de parámetros (CV) es especialmente útil para determinar los factores de escala. Algunos químicos piensan que el volumen interno del cartucho (o columna) sin material de empaquetado dentro es el volumen de la columna. Sin embargo, el volumen de una columna vacía no es el CV. El CV de cualquier columna o cartucho es el volumen del espacio no ocupado por el material preempaquetado en una columna. Este volumen incluye tanto el volumen intersticial (el volumen del espacio fuera de las partículas empaquetadas) como la porosidad interna de la partícula (volumen de poro).
Las columnas flash de alúmina son una opción alternativa cuando las muestras son sensibles y propensas a la degradación en el gel de sílice.
La presión posterior de la columna flash está relacionada con el tamaño de partícula del material empaquetado. El material empaquetado con un tamaño de partícula más pequeño dará como resultado una mayor presión posterior para la columna flash. Por lo tanto, la velocidad de flujo de la fase móvil utilizada en la cromatografía flash debe reducirse en consecuencia para evitar que el sistema flash deje de funcionar.
La presión posterior de la columna flash también es proporcional a la longitud de la columna. El cuerpo de la columna más largo dará como resultado una mayor presión posterior para la columna flash. Además, la presión posterior de la columna Flash es inversamente proporcional a la ID (diámetro interno) del cuerpo de la columna. Finalmente, la presión posterior de la columna Flash es proporcional a la viscosidad de la fase móvil utilizada en la cromatografía flash.