Sức mạnh trên thiết bị và chờ lời nhắc của nó "Silica readbare sẽ bắt đầu hòa tan trong dung dịch dung dịch pH 9, mặc dù rất chậm. Trong dung môi với pH thấp hơn 9 silica trần ổn định. Nếu độ pH của dung môi vượt quá 9. Đảm bảo kết nối mạng iPad là chính xác và bộ định tuyến được bật nguồn.
Để tinh chế tối ưu với các cột flash C18, vui lòng làm theo các bước sau:
Xóa cột với 100% dung môi mạnh (hữu cơ) cho 10 - 20 CV (thể tích cột), điển hình là metanol hoặc acetonitril.
Xóa cột với dung dịch nước mạnh 50% + 50% (nếu cần phải phụ gia, bao gồm chúng) cho 3 - 5 CV khác.
Xóa cột với các điều kiện độ dốc ban đầu cho 3 - 5 CV.
Đối với kích thước cột giữa 4G và 330G, đầu nối Luer tiêu chuẩn được sử dụng trong các cột flash này. Đối với kích thước cột là 800g, 1600g và 3000g, nên sử dụng các bộ điều hợp đầu nối bổ sung để gắn các cột flash lớn này trên hệ thống sắc ký flash. Vui lòng tham khảo Bộ bộ điều hợp Santai cho các cột flash 800g, 1600g, 3kg để biết thêm chi tiết.
Đối với cột pha bình thường, nên sử dụng pha di động trong đó tỷ lệ metanol không vượt quá 25%.
Nói chung, nên sử dụng pha di động trong đó tỷ lệ của dung môi cực không vượt quá 5%. Các dung môi cực bao gồm DMSO, DMF, THF, TEA, v.v.
Tải mẫu rắn là một kỹ thuật hữu ích để tải mẫu được tinh chế lên một cột, đặc biệt đối với các mẫu có khả năng hòa tan thấp. Trong trường hợp này, Hộp mực ILOK Flash là một lựa chọn rất phù hợp.
Nói chung, mẫu được hòa tan trong một dung môi phù hợp và được hấp phụ vào chất hấp phụ rắn có thể giống như được sử dụng trong các cột flash, bao gồm đất diatomaceous hoặc silica hoặc các vật liệu khác. Sau khi loại bỏ / bay hơi dung môi dư, chất hấp phụ được đặt lên trên một cột được lấp đầy một phần hoặc vào một hộp mực nạp rắn rỗng. Để biết thêm thông tin chi tiết, vui lòng tham khảo Hướng dẫn sử dụng Hộp mực ILOK-SL để biết thêm chi tiết.
Khối lượng cột xấp xỉ bằng thể tích chết (VM) khi bỏ qua khối lượng bổ sung trong các ống kết nối cột với kim phun và máy dò.
Thời gian chết (TM) là thời gian cần thiết để rửa giải một thành phần chưa được xác định.
Khối lượng chết (VM) là khối lượng của pha di động cần thiết để rửa giải một thành phần chưa được xác định. Khối lượng chết có thể được tính theo phương trình sau: VM = F0*TM.
Trong số các phương trình trên, F0 là tốc độ dòng của pha di động.
Không, silica có nắp cuối không hòa tan trong bất kỳ dung môi hữu cơ thường được sử dụng.
Các cột flash silica là dùng một lần và để sử dụng một lần, nhưng với việc xử lý thích hợp, các hộp mực silica có thể được tái sử dụng mà không phải hy sinh hiệu suất. Trong việc đặt lại, cột flash silica cần được sấy khô bằng không khí nén hoặc xả bằng và lưu trữ trong isopropanol.
Lưu trữ thích hợp sẽ cho phép các cột flash C18 được sử dụng lại:
• Không bao giờ cho phép cột khô sau khi sử dụng.
• Loại bỏ tất cả các biến đổi hữu cơ bằng cách xả cột bằng 80% metanol hoặc acetonitril trong nước trong 3 - 5 CVS.
• Lưu trữ cột trong dung môi Flushing được đề cập ở trên với các phụ kiện cuối.
Đối với các cột kích thước lớn trên 220g, hiệu ứng nhiệt là rõ ràng trong quá trình cân bằng trước. Nên đặt tốc độ dòng chảy ở mức 50-60% tốc độ dòng được đề xuất trong quá trình cân bằng trước để tránh hiệu ứng nhiệt rõ ràng.
Hiệu ứng nhiệt của dung môi hỗn hợp rõ ràng hơn dung môi đơn. Lấy ví dụ về hệ dung môi cyclohexane/ethyl acetate, có ý kiến cho rằng sử dụng cyclohexane 100% trong quá trình cân bằng trước. Khi hoàn thành việc cân bằng trước, thí nghiệm tách có thể được thực hiện theo hệ thống dung môi đặt trước.
Cho sepaflashTMCác cột sê-ri tiêu chuẩn, các đầu nối được sử dụng là luer-lock in và luer-slip out. Các cột này có thể được gắn trực tiếp trên các hệ thống kết hợp của ISCO.
Đối với sê-ri Sepaflash HP, các cột chuỗi ILOKTM hoặc ILOKTM, các đầu nối được sử dụng là luer-lock in và luer-lock out. Các cột này cũng có thể được gắn trên các hệ thống kết hợp của ISCO thông qua các bộ điều hợp bổ sung. Để biết chi tiết của các bộ điều hợp này, vui lòng tham khảo Bộ điều hợp Santai tài liệu cho các cột flash 800g, 1600g, 3kg.
Khối lượng cột tham số (CV) đặc biệt hữu ích để xác định các yếu tố mở rộng. Một số nhà hóa học cho rằng khối lượng bên trong của hộp mực (hoặc cột) mà không cần đóng gói vật liệu bên trong là khối lượng cột. Tuy nhiên, khối lượng của một cột trống không phải là CV. CV của bất kỳ cột hoặc hộp mực nào là khối lượng của không gian không bị chiếm bởi vật liệu đóng gói sẵn trong một cột. Khối lượng này bao gồm cả thể tích kẽ (thể tích của không gian bên ngoài các hạt được đóng gói) và độ xốp bên trong của hạt (khối lượng lỗ rỗng).
Các cột flash alumina là một lựa chọn thay thế khi các mẫu nhạy cảm và dễ bị phân hủy trên silica gel.
Áp suất lưng của cột flash có liên quan đến kích thước hạt của vật liệu đóng gói. Các vật liệu đóng gói với kích thước hạt nhỏ hơn sẽ dẫn đến áp suất lưng cao hơn cho cột flash. Do đó, tốc độ dòng của pha di động được sử dụng trong sắc ký flash nên được hạ xuống phù hợp để ngăn hệ thống flash ngừng hoạt động.
Áp suất lưng của cột flash cũng tỷ lệ thuận với chiều dài của cột. Cơ thể cột dài hơn sẽ dẫn đến áp suất lưng cao hơn cho cột flash. Hơn nữa, áp suất lưng của cột flash tỷ lệ nghịch với ID (đường kính bên trong) của thân cột. Cuối cùng, áp suất ngược của cột flash tỷ lệ thuận với độ nhớt của pha di động được sử dụng trong sắc ký flash.