آلے پر بجلی اور اس کے فوری طور پر انتظار کرنے کا انتظار کریں "ریڈی بیئر سلیکا پی ایچ 9 کے پانی کے حل میں تحلیل ہونا شروع کردے گا ، اگرچہ بہت آہستہ آہستہ۔ اختتامی کیپڈ۔ اس بات کو یقینی بنائیں کہ آئی پیڈ نیٹ ورک کا کنکشن درست ہے ، اور روٹر پر طاقت ہے۔
C18 فلیش کالموں کے ساتھ زیادہ سے زیادہ طہارت کے ل please ، براہ کرم ان اقدامات پر عمل کریں:
① 10 - 20 سی وی (کالم حجم) کے لئے 100 ٪ مضبوط (نامیاتی) سالوینٹ کے ساتھ کالم کو فلش کریں ، عام طور پر میتھانول یا ایسٹونیٹرائل۔
3 50 - 5 سی وی کے لئے 50 strong مضبوط + 50 ٪ پانی (اگر اضافی ضرورت ہے تو ، ان کو شامل کریں) کے ساتھ کالم کو فلش کریں۔
3 3 - 5 CVs کے ابتدائی تدریجی حالات کے ساتھ کالم کو فلش کریں۔
4G اور 330G کے درمیان کالم سائز کے لئے ، ان فلیش کالموں میں معیاری لوئر کنیکٹر استعمال کیا جاتا ہے۔ 800 گرام ، 1600 گرام اور 3000 جی کے کالم سائز کے ل additional ، فلیش کرومیٹوگرافی سسٹم پر ان بڑے فلیش کالموں کو ماؤنٹ کرنے کے لئے اضافی کنیکٹر اڈیپٹر استعمال کیے جائیں۔ مزید تفصیلات کے لئے براہ کرم 800 گرام ، 1600 گرام ، 3 کلوگرام فلیش کالم کے لئے دستاویز سینٹائی اڈاپٹر کٹ کا حوالہ دیں۔
عام مرحلے کے کالم کے لئے ، موبائل مرحلے کو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے جہاں میتھانول کا تناسب 25 ٪ سے زیادہ نہیں ہوتا ہے۔
عام طور پر ، موبائل مرحلے کو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے جہاں قطبی سالوینٹس کا تناسب 5 ٪ سے زیادہ نہیں ہوتا ہے۔ قطبی سالوینٹس میں ڈی ایم ایس او ، ڈی ایم ایف ، ٹی ایچ ایف ، چائے وغیرہ شامل ہیں۔
ٹھوس نمونہ لوڈنگ ایک کالم پر صاف کرنے کے لئے نمونے کو لوڈ کرنے کے لئے ایک مفید تکنیک ہے ، خاص طور پر کم گھلنشیلتا کے نمونوں کے ل .۔ اس معاملے میں ، الوک فلیش کارتوس ایک بہت مناسب انتخاب ہے۔
عام طور پر ، نمونہ ایک مناسب سالوینٹ میں تحلیل ہوتا ہے اور کسی ٹھوس اڈسوربنٹ پر جذب ہوتا ہے جو فلیش کالموں میں استعمال ہوتا ہے ، جس میں ڈائیٹومیسیس ارتھ یا سلکا یا دیگر مواد شامل ہیں۔ بقایا سالوینٹ کو ہٹانے / بخارات کے خاتمے کے بعد ، ایڈسوربینٹ کو جزوی طور پر بھرا ہوا کالم کے اوپر یا خالی ٹھوس لوڈنگ کارتوس میں ڈال دیا جاتا ہے۔ مزید تفصیلی معلومات کے ل please ، براہ کرم مزید تفصیلات کے لئے دستاویز ILOK-SL کارتوس صارف گائیڈ کا حوالہ دیں۔
کالم کا حجم تقریبا مردہ حجم (VM) کے برابر ہوتا ہے جب کالم اور ڈیٹیکٹر کے ساتھ کالم کو جوڑنے والے نلیاں میں اضافی حجم کو نظرانداز کرتے ہیں۔
ڈیڈ ٹائم (ٹی ایم) غیر مستحکم جزو کے خاتمے کے لئے درکار وقت ہے۔
مردہ حجم (VM) موبائل مرحلے کا حجم ہے جو کسی غیر آباد جزو کو ختم کرنے کے لئے درکار ہے۔ مردہ حجم کا حساب درج ذیل مساوات کے ذریعہ کیا جاسکتا ہے: VM = F0*TM۔
مذکورہ مساوات میں ، F0 موبائل مرحلے کی بہاؤ کی شرح ہے۔
نہیں ، اختتام پذیر سلیکا کسی بھی عام طور پر استعمال ہونے والے نامیاتی سالوینٹ میں ناقابل تحلیل ہے۔
سلکا فلیش کالم ڈسپوز ایبل اور واحد استعمال کے ل. ہیں ، لیکن مناسب ہینڈلنگ کے ساتھ ، سلکا کارٹریجز کو کارکردگی کی قربانی کے بغیر دوبارہ استعمال کیا جاسکتا ہے۔ دوبارہ استعمال کرنے کے حکم میں ، سلکا فلیش کالم کو کمپریسڈ ہوا کے ذریعہ خشک کرنے کی ضرورت ہے یا آئسوپروپنول میں فلش اور ذخیرہ کرنے کی ضرورت ہے۔
مناسب اسٹوریج C18 فلیش کالموں کو دوبارہ استعمال کرنے کی اجازت دے گا:
using استعمال کے بعد کبھی بھی کالم کو خشک نہ ہونے دیں۔
3 3 - 5 CVs کے لئے پانی میں 80 met میتھانول یا ایسٹونائٹریل کے ساتھ کالم کو فلش کرکے تمام نامیاتی ترمیم کاروں کو ہٹا دیں۔
coll کالم کو مذکورہ بالا فلشنگ سالوینٹ میں جگہ پر آخری متعلقہ اشیاء کے ساتھ اسٹور کریں۔
220g سے اوپر کے بڑے سائز کے کالموں کے لئے ، تھرمل اثر پری توازن کے عمل میں واضح ہے۔ واضح تھرمل اثر سے بچنے کے لئے پری توازن کے عمل میں تجویز کردہ بہاؤ کی شرح کے 50-60 ٪ پر بہاؤ کی شرح کو طے کرنے کی سفارش کی جاتی ہے۔
مخلوط سالوینٹ کا تھرمل اثر واحد سالوینٹ سے زیادہ واضح ہے۔ سالوینٹ سسٹم سائکلوہیکسین/ایتھیل ایسیٹیٹ کو بطور مثال لیں ، یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ پہلے سے متوازن عمل میں 100 cyc سائکلوہیکسین کا استعمال کریں۔ جب قبل از توازن مکمل ہوجاتا ہے تو ، علیحدگی کا تجربہ پیش سیٹ سالوینٹ سسٹم کے مطابق کیا جاسکتا ہے۔
سیپفلاش کے لئےTMمعیاری سیریز کے کالم ، استعمال ہونے والے کنیکٹرز لیور لاک ان اور لوئر پرچی آؤٹ ہیں۔ یہ کالم براہ راست آئسکو کے کومبفلاش سسٹم پر لگائے جاسکتے ہیں۔
سیپفلاش ایچ پی سیریز ، بانڈڈ سیریز یا ILOKTM سیریز کالموں کے لئے ، استعمال ہونے والے کنیکٹر لوئر لاک ان اور لوئر لاک آؤٹ ہیں۔ یہ کالم اضافی اڈاپٹر کے ذریعہ آئسکو کے کومبفلاش سسٹم پر بھی لگائے جاسکتے ہیں۔ ان اڈیپٹروں کی تفصیلات کے ل please ، براہ کرم 800 گرام ، 1600 گرام ، 3 کلوگرام فلیش کالم کے لئے دستاویز سینٹائی اڈاپٹر کٹ کا حوالہ دیں۔
پیرامیٹر کالم حجم (سی وی) خاص طور پر پیمانے پر عوامل کا تعین کرنے کے لئے مفید ہے۔ کچھ کیمسٹوں کا خیال ہے کہ کارٹریج (یا کالم) کا اندرونی حجم بغیر پیکنگ مواد کے اندر کالم کا حجم ہے۔ تاہم ، خالی کالم کا حجم CV نہیں ہے۔ کسی بھی کالم یا کارتوس کا سی وی اس جگہ کا حجم ہے جس میں کالم میں پہلے سے بھری ہوئی مادے کا قبضہ نہیں ہوتا ہے۔ اس حجم میں دونوں بیچوالا حجم (بھری ہوئی ذرات سے باہر کی جگہ کا حجم) اور ذرہ کی اپنی داخلی پوروسٹی (تاکنا حجم) دونوں شامل ہیں۔
ایلومینا فلیش کالم ایک متبادل آپشن ہوتے ہیں جب نمونے حساس ہوتے ہیں اور سلیکا جیل پر انحطاط کا شکار ہوتے ہیں۔
فلیش کالم کا پچھلا دباؤ بھری مواد کے ذرہ سائز سے متعلق ہے۔ چھوٹے ذرہ سائز کے ساتھ بھری ہوئی مواد کے نتیجے میں فلیش کالم کے لئے زیادہ دباؤ زیادہ ہوگا۔ لہذا فلیش کرومیٹوگرافی میں استعمال ہونے والے موبائل مرحلے کی بہاؤ کی شرح کو اسی کے مطابق کم کیا جانا چاہئے تاکہ فلیش سسٹم کو کام کرنے سے روکنے سے بچایا جاسکے۔
فلیش کالم کا پچھلا دباؤ کالم کی لمبائی کے متناسب بھی ہے۔ لمبے کالم باڈی کے نتیجے میں فلیش کالم کے لئے زیادہ دباؤ زیادہ ہوگا۔ مزید برآں ، فلیش کالم کا پچھلا دباؤ کالم جسم کے ID (اندرونی قطر) کے متضاد متناسب ہے۔ آخر میں ، فلیش کالم کا پچھلا دباؤ فلیش کرومیٹوگرافی میں استعمال ہونے والے موبائل مرحلے کی واسکاسیٹی کے متناسب ہے۔