Enstrüman üzerindeki güç ve "Readbare Silika, çok yavaş da olsa sulu pH 9 çözeltisi içinde çözülmeye başlayacaktır. Çıplak silika 9'dan daha düşük olsa da, çözücünün pH'ı 9'u aşarsa, pH artar. İPad Ağı bağlantısının doğru olduğundan ve yönlendiricinin açıldığından emin olun.
C18 flaş sütunları ile optimum saflaştırma için lütfen şu adımları izleyin:
① Sütunu, tipik olarak metanol veya asetonitril olmak üzere 10-20 CV (kolon hacmi) için güçlü (organik) çözücünün% 100'ü ile yıkayın.
② Sütunu,% 50 güçlü +% 50 sulu (katkı maddeleri gerekiyorsa, bunları ekleyin) ile yıkayın.
③ Sütunu 3 - 5 CV için başlangıç gradyan koşulları ile yıkayın.
4G ve 330g arasındaki sütun boyutu için, bu flaş sütunlarında standart Luer konektörü kullanılır. 800g, 1600g ve 3000g sütun boyutu için, bu büyük flaş sütunlarını flaş kromatografisi sistemine monte etmek için ek konektör adaptörleri kullanılmalıdır. Daha fazla ayrıntı için lütfen 800g, 1600g, 3kg flash sütunlar için Santai Adaptör Kiti'ne bakın.
Normal fazlı sütun için, metanol oranının%25'i geçmediği mobil fazın kullanılması önerilir.
Genel olarak, polar çözücülerin oranının%5'i geçmediği mobil fazın kullanılması önerilir. Polar çözücüler arasında DMSO, DMF, THF, çay vb.
Katı numune yüklemesi, özellikle düşük çözünürlüklü örnekler için bir sütuna saflaştırılacak numunenin yüklenmesi için yararlı bir tekniktir. Bu durumda, ILOK Flash kartuşu çok uygun bir seçimdir.
Genel olarak, numune uygun bir çözücü içinde çözündürülür ve diyatomlu topraklar veya silika veya diğer malzemeler de dahil olmak üzere flaş sütunlarında kullanılanla aynı olabilen katı bir adsorban üzerine adsorbe edilir. Kalıntı çözücünün çıkarılmasından / buharlaştırılmasından sonra, adsorban kısmen doldurulmuş bir kolonun üstüne veya boş bir katı yükleme kartuşuna konur. Daha ayrıntılı bilgi için, daha fazla ayrıntı için lütfen ILOK-SL Kartuş Kullanıcı Kılavuzu belgesine bakın.
Kolonu enjektör ve dedektörle bağlayan tüplerdeki ek hacmi göz ardı ederken sütun hacmi yaklaşık olarak ölü hacme (VM) eşittir.
Ölü Time (TM), retasız bir bileşenin elüsyonu için gereken zamandır.
Ölü hacim (VM), retasız bir bileşenin elüsyonu için gereken mobil fazın hacmidir. Ölü hacim aşağıdaki denklemle hesaplanabilir: VM = F0*TM.
Yukarıdaki denklem arasında F0, mobil fazın akış hızıdır.
Hayır, uç kapaklı silika yaygın olarak kullanılan herhangi bir organik çözücüde çözünmez.
Silika flaş kolonları tek kullanımlık ve tek kullanım için, ancak uygun kullanımla, silika kartuşları performansdan ödün vermeden yeniden kullanılabilir. Yeniden kullanılacak sırayla, silika flaş kolonunun sıkıştırılmış hava ile basitçe kurutulması veya izopropanol içinde saklanması gerekir.
Uygun depolama, C18 flaş sütunlarının yeniden kullanılmasına izin verecektir:
• Kullandıktan sonra sütunun kurumasına asla izin vermeyin.
• Suya 3-5 CV için kolonu% 80 metanol veya asetonitril ile yıkayarak tüm organik değiştiricileri çıkarın.
• Sütunu, yukarıda belirtilen yıkama çözücüsünde uç bağlantı parçaları yerinde saklayın.
220g'nin üzerindeki büyük boyutlu sütunlar için, termal etki, denge ön işleminde açıktır. Belirgin termal etkiyi önlemek için akış hızının, denge öncesi işleminde önerilen akış hızının% 50-60'ına ayarlanması önerilir.
Karışık çözücünün termal etkisi, tek çözücüden daha belirgindir. Solvent sistemi sikloheksan/etil asetatını alın örnek olarak, denge öncesi işleminde% 100 sikloheksan kullanılması önerilmektedir. Ön dengeleme tamamlandığında, ayırma deneyi önceden ayarlanmış çözücü sistemine göre gerçekleştirilebilir.
Sepaflash içinTMStandart seri sütunlar, kullanılan konektörler luer-lock In ve Luer-Slip Out'dur. Bu sütunlar doğrudan ISCO'nun kombrash sistemlerine monte edilebilir.
Sepaflash HP serisi, bağlı seriler veya ILOKTM serisi sütunlar için kullanılan konektörler Luer-Lock In ve Luer-Lock Out'dur. Bu sütunlar, ekstra adaptörler aracılığıyla ISCO'nun kombrash sistemlerine de monte edilebilir. Bu adaptörlerin ayrıntıları için lütfen 800g, 1600g, 3kg flaş sütunları için Santai Adaptör Kiti'ne bakın.
Parametre sütun hacmi (CV) özellikle ölçeklendirme faktörlerini belirlemek için yararlıdır. Bazı kimyagerler, içinde paketleme olmadan kartuşun (veya sütun) iç hacminin sütun hacmi olduğunu düşünmektedir. Ancak, boş bir sütunun hacmi CV değildir. Herhangi bir sütun veya kartuşun CV'si, bir sütunda önceden paketlenmiş malzeme tarafından işgal edilmeyen alanın hacmidir. Bu hacim hem interstisyel hacmi (paketlenmiş parçacıkların dışındaki alanın hacmi) hem de parçacığın kendi içsel gözenekliliğini (gözenek hacmi) içerir.
Alümina flaş sütunları, numuneler hassas olduğunda ve silika jel üzerinde bozulmaya eğilimli olduğunda alternatif bir seçenektir.
Flaş sütununun arka basıncı, paketlenmiş malzemenin parçacık boyutu ile ilgilidir. Daha küçük parçacık boyutuna sahip paketlenmiş malzeme, flaş kolonu için daha yüksek sırt basıncına neden olacaktır. Bu nedenle, flaş kromatografisinde kullanılan mobil fazın akış hızı, flaş sisteminin durdurma çalışmasını önlemek için buna göre düşürülmelidir.
Flaş sütununun arka basıncı da sütunun uzunluğu ile orantılıdır. Daha uzun sütun gövdesi, flaş sütunu için daha yüksek sırt basıncına neden olacaktır. Ayrıca, flaş kolonunun arka basıncı, sütun gövdesinin kimliği (dahili çap) ile ters orantılıdır. Son olarak, flaş kolonunun arka basıncı, flaş kromatografisinde kullanılan mobil fazın viskozitesi ile orantılıdır.