Ang kapangyarihan sa instrumento at maghintay para sa prompt nito na "Readbare silica ay magsisimulang matunaw sa may tubig na solusyon ng pH 9, kahit na napakabagal. Sa solvent na may pH mas mababa kaysa sa 9 ang hubad na silica ay matatag. Kung ang pH ng solvent ay lumampas sa 9, ang paglusaw ay mapapabilis bilang pagtaas ng pH. Para sa mga gumaganang silica, ang mga maaaring mag-end ng mga pH ay nasa pagitan ng 2 at 12 dahil ang mga nalalabi na hydroxyl na grupo ay nagtatapos.Y. Tiyaking tama ang koneksyon sa network ng iPad, at ang router ay pinapagana.
Para sa pinakamainam na paglilinis na may mga haligi ng C18 flash, mangyaring sundin ang mga hakbang na ito:
① I -flush ang haligi na may 100% ng malakas (organikong) solvent para sa 10 - 20 cvs (dami ng haligi), karaniwang methanol o acetonitrile.
② I -flush ang haligi na may 50% malakas + 50% may tubig (kung kinakailangan ang mga additives, isama ang mga ito) para sa isa pang 3 - 5 CVS.
③ I -flush ang haligi na may paunang mga kondisyon ng gradient para sa 3 - 5 CVS.
Para sa laki ng haligi sa pagitan ng 4G at 330G, ang karaniwang konektor ng luer ay ginagamit sa mga haligi ng flash na ito. Para sa laki ng haligi na 800g, 1600g at 3000g, ang mga karagdagang adaptor ng konektor ay dapat gamitin upang mai -mount ang mga malalaking haligi ng flash na ito sa sistema ng flash chromatography. Mangyaring sumangguni sa dokumento na Santai Adapter Kit para sa 800g, 1600g, 3kg flash na mga haligi para sa higit pang mga detalye.
Para sa normal na haligi ng phase, inirerekumenda na gamitin ang mobile phase kung saan ang ratio ng methanol ay hindi lalampas sa 25%.
Karaniwan, inirerekomenda na gamitin ang mobile phase kung saan ang ratio ng polar solvents ay hindi lalampas sa 5%. Kasama sa polar solvents ang DMSO, DMF, THF, TEA atbp.
Ang Solid Sample Loading ay isang kapaki-pakinabang na pamamaraan upang mai-load ang sample na linisin sa isang haligi, lalo na para sa mga halimbawa ng mababang-solubility. Sa kasong ito, ang Ilok Flash Cartridge ay isang angkop na pagpipilian.
Kadalasan, ang sample ay natunaw sa isang angkop na solvent at na -adsorbed sa isang solidong adsorbant na maaaring kapareho ng ginamit sa mga haligi ng flash, kabilang ang mga diatomaceous na lupa o silica o iba pang mga materyales. Matapos ang pag -alis / pagsingaw ng natitirang solvent, ang adsorbent ay inilalagay sa tuktok ng isang bahagyang napuno na haligi o sa isang walang laman na solidong kartutso. Para sa mas detalyadong impormasyon, mangyaring sumangguni sa dokumento na gabay sa gumagamit ng kartutso ng ILOK-SL para sa higit pang mga detalye.
Ang dami ng haligi ay humigit -kumulang na katumbas ng patay na dami (VM) kapag hindi pinapansin ang karagdagang dami sa mga tubing na nagkokonekta sa haligi sa injector at detektor.
Ang Dead Time (TM) ay ang oras na kinakailangan para sa pag -alis ng isang hindi natanggap na sangkap.
Ang Dead Volume (VM) ay ang dami ng mobile phase na kinakailangan para sa pag -alis ng isang hindi natanggap na sangkap. Ang patay na dami ay maaaring kalkulahin ng sumusunod na equation: VM = F0*TM.
Kabilang sa equation sa itaas, ang F0 ay ang rate ng daloy ng mobile phase.
Hindi, ang end-capped silica ay hindi matutunaw sa anumang karaniwang ginagamit na organikong solvent.
Ang mga haligi ng Silica Flash ay maaaring magamit at para sa solong paggamit, ngunit sa wastong paghawak, ang mga cartridges ng silica ay maaaring magamit muli nang hindi sinasakripisyo ang pagganap. Sa pagkakasunud -sunod na magamit muli, ang haligi ng silica flash ay kailangang simpleng tuyo ng naka -compress na hangin o flush na may at nakaimbak sa isopropanol.
Ang wastong imbakan ay magpapahintulot sa mga haligi ng C18 flash na magamit muli:
• Huwag payagan ang haligi na matuyo pagkatapos gamitin.
• Alisin ang lahat ng mga organikong modifier sa pamamagitan ng pag -flush ng haligi na may 80% methanol o acetonitrile sa tubig para sa 3 - 5 cvs.
• Itago ang haligi sa nabanggit na flushing solvent na may mga dulo ng mga fittings sa lugar.
Para sa mga malaking haligi ng laki sa itaas ng 220g, ang thermal effect ay halata sa proseso ng pre-equilibrium. Inirerekomenda na itakda ang rate ng daloy sa 50-60% ng iminungkahing rate ng daloy sa proseso ng pre-equilibrium upang maiwasan ang malinaw na thermal effect.
Ang thermal effect ng halo -halong solvent ay mas halata kaysa sa solong solvent. Kunin ang solvent system cyclohexane/ethyl acetate bilang isang halimbawa, iminungkahi na gumamit ng 100% cyclohexane sa proseso ng pre-equilibrium. Kapag nakumpleto ang pre-equilibration, maaaring isagawa ang eksperimento sa paghihiwalay ayon sa preset solvent system.
Para sa sepaflashTMAng mga karaniwang haligi ng serye, ang mga konektor na ginamit ay luer-lock sa at luer-slip out. Ang mga haligi na ito ay maaaring direktang mai -mount sa mga sistema ng combiflash ng ISCO.
Para sa serye ng Sepaflash HP, bonded series o mga haligi ng serye ng ILOKTM, ang mga konektor na ginamit ay luer-lock sa at luer-lock out. Ang mga haligi na ito ay maaari ring mai -mount sa mga sistema ng combiflash ng ISCO sa pamamagitan ng labis na adaptor. Para sa mga detalye ng mga adapter na ito, mangyaring sumangguni sa dokumento na Santai Adapter Kit para sa 800g, 1600g, 3kg flash na mga haligi.
Ang dami ng haligi ng parameter (CV) ay kapaki-pakinabang lalo na upang matukoy ang mga kadahilanan ng scale-up. Iniisip ng ilang mga chemist na ang panloob na dami ng kartutso (o haligi) nang walang pag -iimpake ng materyal sa loob ay ang dami ng haligi. Gayunpaman, ang dami ng isang walang laman na haligi ay hindi ang CV. Ang CV ng anumang haligi o kartutso ay ang dami ng puwang na hindi sinakop ng materyal na pre-pack sa isang haligi. Kasama sa dami na ito ang parehong dami ng interstitial (ang dami ng puwang sa labas ng mga naka -pack na particle) at sariling panloob na porosity ng butil (dami ng butas).
Ang mga haligi ng alumina flash ay isang alternatibong pagpipilian kapag ang mga sample ay sensitibo at madaling kapitan ng pagkasira sa silica gel.
Ang likod na presyon ng haligi ng flash ay nauugnay sa laki ng butil ng naka -pack na materyal. Ang naka -pack na materyal na may mas maliit na laki ng butil ay magreresulta sa mas mataas na presyon ng likod para sa haligi ng flash. Samakatuwid ang rate ng daloy ng mobile phase na ginamit sa flash chromatography ay dapat ibababa nang naaayon upang maiwasan ang flash system na huminto sa pagtatrabaho.
Ang likod na presyon ng haligi ng flash ay proporsyonal din sa haba ng haligi. Ang mas mahahabang katawan ng haligi ay magreresulta sa mas mataas na presyon ng likod para sa haligi ng flash. Bukod dito, ang likod na presyon ng haligi ng flash ay inversely proporsyonal sa ID (panloob na diameter) ng katawan ng haligi. Sa wakas, ang likod na presyon ng haligi ng flash ay proporsyonal sa lagkit ng mobile phase na ginamit sa flash chromatography.