Napájanie na prístroji a čakať na jeho rýchle „silika ReadBare Silica sa začne rozpúšťať vo vodnom roztoku pH 9, aj keď veľmi pomaly. V rozpúšťadle s pH nižším ako 9 je holý oxid kremičitý. Ak je pH rozpúšťadla prekročia 9 rozpúšťadiel 9, rozpúšťanie sa zrýchli so zvyšujúcim sa pH“. Uistite sa, že pripojenie siete iPad je správne a smerovač je zapnutý.
Ak chcete optimálne čistiť stĺpce Flash C18, postupujte podľa týchto krokov:
① Prepláchnite kolón so 100% silného (organického) rozpúšťadla pre 10 - 20 CV (objem stĺpca), zvyčajne metanol alebo acetonitril.
② Vypláchnite stĺpec s 50% silnou + 50% vodnou (ak sú potrebné prísady, zahrňte ich) pre ďalších 3 - 5 cvs.
③ Prepláchnite stĺpec s počiatočnými podmienkami gradientu pre 3 - 5 cvs.
Pre veľkosť stĺpca medzi 4G a 330G sa v týchto stĺpcoch Flash používa štandardný konektor Luer. V prípade veľkosti stĺpca 800 g, 1600 g a 3000 g by sa na pripevnenie týchto veľkých stĺpcov blesku do systému chromatografie Flash mali použiť ďalšie adaptéry konektorov. Viac informácií nájdete v súprave adaptéra santai pre adaptéry pre 800 g, 1600 g, 3 kg flash.
Pre stĺpec s normálnou fázou sa odporúča používať mobilnú fázu, kde pomer metanolu nepresahuje 25%.
Vo všeobecnosti sa odporúča používať mobilnú fázu, kde pomer polárnych rozpúšťadiel nepresahuje 5%. Polárne rozpúšťadlá zahŕňajú DMSO, DMF, THF, čaj atď.
Pevné zaťaženie vzorky je užitočná technika na načítanie vzorky, ktorá sa má vyčistiť na stĺpec, najmä pre vzorky s nízkou rozpustnosťou. V tomto prípade je kazeta ILok Flash veľmi vhodnou voľbou.
Vzorka sa vo všeobecnosti rozpustí vo vhodnom rozpúšťadle a adsorbovaná na pevnú adsorbantovú farbu, ktorá by mohla byť rovnaká ako v kolónach bleskov, vrátane diatomaceóznych zemín alebo oxidu kremičitého alebo iných materiálov. Po odstránení / odparení zvyškového rozpúšťadla sa adsorbent vloží na čiastočne vyplnený stĺpec alebo do prázdnej kazety s pevným nakladaním. Podrobnejšie informácie nájdete v dokumente Príručka používateľa kazety ILOK-SL, kde nájdete viac podrobností.
Objem stĺpca sa približne rovná mŕtvemu objemu (VM) pri ignorovaní dodatočného objemu v trubiciach spájajúcich stĺpec s injektorom a detektorom.
Mŕtvy čas (TM) je čas potrebný na elúciu neobsadenej zložky.
Mŕtvy objem (VM) je objem mobilnej fázy potrebnej na eluciu nezrelej komponentu. Mŕtvy objem sa dá vypočítať podľa nasledujúcej rovnice: VM = F0*TM.
Spomedzi vyššie uvedenej rovnice je F0 prietok mobilnej fázy.
Nie, oxid kremičitý je nerozpustný v akomkoľvek bežne používanom organickom rozpúšťadle.
Stĺpce bleskov oxidu kremičitého sú jednorazové a na jedno použitie, ale pri správnej manipulácii sa kazety oxidu kremičitého môžu znovu použiť bez obetovania výkonu. Ak je potrebné opätovné použitie, musí byť stĺpec blesku oxidu kremičitého jednoducho vysušený stlačeným vzduchom alebo prepláchnutý a skladovaný v izopropanolu.
Správne úložisko umožní opätovné použitie stĺpcov c18 flash:
• Nikdy nedovoľte, aby sa stĺpec po použití vyschol.
• Odstráňte všetky organické modifikátory prepláchnutím kolóny 80% metanolom alebo acetonitrilom vo vode pri 3 - 5 cvs.
• Stĺpec uložte do vyššie uvedeného splachovacieho rozpúšťadla s koncovými tvarovkami na mieste.
V prípade stĺpcov veľkej veľkosti nad 220G je tepelný efekt zrejmý v procese pred ekvilibrom. Odporúča sa nastaviť prietok na 50-60% navrhovaného prietoku v predbežnom procese, aby sa predišlo zjavnému tepelnému účinku.
Tepelný účinok zmiešaného rozpúšťadla je zrejmejší ako jednotlivé rozpúšťadlo. Ako príklad si vezmite cyklohexán/etylacetát s rozpúšťadlom, navrhuje sa, aby v pred ekvilibriovom procese používali 100% cyklohexán. Po dokončení pred ekvilibrácie sa experiment separácie mohol uskutočniť podľa predvoleného rozpúšťadného systému.
Pre sepaflashTMStĺpce štandardných sérií, použité konektory sú luer-lock in a luer-sklz von. Tieto stĺpce by mohli byť priamo namontované na systémoch ISCO Comfiflash.
Pre série Sepaflash HP, viazané stĺpce série alebo série ILOKTM sú použité konektory luer-lock in a Luer-Lock Out. Tieto stĺpce by mohli byť tiež namontované na systémoch ISCO ComfiFlash prostredníctvom ďalších adaptérov. Podrobnosti o týchto adaptéroch nájdete v súprave adaptéra s Santai pre 800 g, 1600 g, 3 kg flash stĺpcov.
Objem stĺpcov parametrov (CV) je obzvlášť užitočný na určenie faktorov zväčšenia. Niektorí chemici si myslia, že vnútorným objemom kazety (alebo stĺpca) bez balenia vo vnútri je objem stĺpca. Objem prázdneho stĺpca však nie je CV. CV akéhokoľvek stĺpca alebo kazety je objem priestoru, ktorý nie je obsadený materiálom vopred vopred v stĺpci. Tento objem obsahuje tak intersticiálny objem (objem priestoru mimo zabalených častíc) a vlastnú vnútornú pórovitosť častíc (objem pórov).
Stĺpce hliníkových bleskov sú alternatívnou možnosťou, keď sú vzorky citlivé a náchylné na degradáciu na silikagéli.
Zadný tlak stĺpca Flash súvisí s veľkosťou častíc baleného materiálu. Balený materiál s menšou veľkosťou častíc bude mať za následok vyšší tlak chrbta pre bleskový stĺpec. Preto by sa prietok mobilnej fázy použitej pri flash chromatografii mal podľa toho znížiť, aby sa zabránilo zastaveniu systému Flash.
Zadný tlak stĺpca Flash je tiež úmerný dĺžke stĺpca. Dlhšie telo stĺpca bude mať za následok vyšší tlak chrbta pre stĺpec Flash. Ďalej je zadný tlak bleskového stĺpca nepriamo úmerný ID (vnútorný priemer) tela stĺpca. Nakoniec je zadný tlak kolóny Flash úmerný viskozity mobilnej fázy používanej pri flash chromatografii.