Puterea instrumentului și așteptați promptul său „Silica ReadBare va începe să se dizolve într-o soluție apoasă de pH 9, deși foarte lent. În solvent cu pH mai mic de 9 silica goală este stabilă. Dacă pH-ul solventului depășește 9, dizolvarea se va accelera, deoarece pH-ul în creștere. Asigurați -vă că conexiunea de rețea iPad este corectă, iar routerul este pornit.
Pentru o purificare optimă cu coloane C18, vă rugăm să urmați acești pași:
① Îngronați coloana cu 100% din solventul puternic (organic) pentru 10 - 20 cV (volumul coloanei), de obicei metanol sau acetonitril.
② Îngroape coloana cu 50% puternic + 50% apos (dacă sunt necesari aditivi, includeți -le) pentru alte 3 - 5 cvs.
③ Spălați coloana cu condițiile inițiale de gradient pentru 3 - 5 CV -uri.
Pentru dimensiunea coloanei între 4G și 330G, conectorul Luer standard este utilizat în aceste coloane flash. Pentru dimensiunea coloanei de 800g, 1600g și 3000g, ar trebui să fie utilizate adaptoare de conector suplimentare pentru a monta aceste coloane flash mari pe sistemul de cromatografie flash. Vă rugăm să consultați documentul Santai Adapter Kit pentru coloane de 800g, 1600g, 3kg flash pentru mai multe detalii.
Pentru coloana de fază normală, se recomandă utilizarea fazei mobile în care raportul dintre metanol nu depășește 25%.
În general, se recomandă utilizarea fazei mobile în care raportul dintre solvenții polari nu depășește 5%. Solvenții polari includ DMSO, DMF, THF, ceai etc.
Încărcarea eșantionului solid este o tehnică utilă pentru a încărca proba pentru a fi purificată pe o coloană, în special pentru eșantioane de solubilitate scăzută. În acest caz, cartușul Ilok Flash este o alegere foarte potrivită.
În general, eșantionul este dizolvat într -un solvent adecvat și adsorbit pe un adsorbant solid, care ar putea fi același ca și utilizat în coloanele flash, inclusiv pământuri diatomacice sau silice sau alte materiale. După îndepărtarea / evaporarea solventului rezidual, adsorbentul este pus deasupra unei coloane parțial umplute sau într -un cartuș de încărcare solidă. Pentru informații mai detaliate, consultați documentul Ghidul utilizatorului cartușului ILOK-SL pentru mai multe detalii.
Volumul coloanei este aproximativ egal cu volumul mort (VM) atunci când ignorați volumul suplimentar din tuburile care conectează coloana cu injectorul și detectorul.
Timpul mort (TM) este timpul necesar pentru eluarea unei componente nereteintate.
Volumul mort (VM) este volumul fazei mobile necesare pentru eluarea unei componente nereterate. Volumul mort poate fi calculat prin următoarea ecuație: VM = F0*TM.
Printre ecuația de mai sus, F0 este debitul fazei mobile.
Nu, silica cu capac final este insolubilă în orice solvent organic utilizat frecvent.
Coloanele de bliț de silice sunt de unică folosință și pentru o singură utilizare, dar cu o manevrare corectă, cartușele de silice pot fi reutilizate fără a sacrifica performanța. În ordinea reutilizării, coloana de silice flash trebuie să fie pur și simplu uscată de aer comprimat sau înroșită și stocată în izopropanol.
Depozitarea corectă va permite reutilizarea coloanelor c18:
• Nu lăsați niciodată coloana să se usuce după utilizarea.
• Îndepărtați toți modificatorii organici prin spălarea coloanei cu 80% metanol sau acetonitril în apă pentru 3 - 5 cvs.
• Stocați coloana în solventul de înroșire menționat mai sus, cu fitinguri de capăt.
Pentru coloanele de dimensiuni mari de peste 220g, efectul termic este evident în procesul de pre-echilibru. Se recomandă stabilirea debitului la 50-60% din debitul sugerat în procesul pre-echilibru pentru a evita un efect termic evident.
Efectul termic al solventului mixt este mai evident decât un singur solvent. Luați ca exemplu sistemul de solvent ciclohexan/acetat de etil, se sugerează că utilizați 100% ciclohexan în procesul pre-echilibru. Când pre-echilibrarea este finalizată, experimentul de separare ar putea fi efectuat în funcție de sistemul de solvent presetat.
Pentru sepaflashTMColoane standard ale seriei, conectorii folosiți sunt Luer-Lock în și Luer-Slip. Aceste coloane ar putea fi montate direct pe sistemele Combiflash ale ISCO.
Pentru seria Sepaflash HP, serii Bonded Series sau Iloktm Series, conectorii folosiți sunt Luer-Lock în și Luer-Lock Out. Aceste coloane ar putea fi montate și pe sistemele Combiflash ale ISCO prin intermediul adaptoarelor suplimentare. Pentru detaliile acestor adaptoare, consultați documentul Santai Adapter Kit pentru coloane de 800g, 1600g, 3kg flash.
Volumul coloanei de parametri (CV) este util în special pentru a determina factorii de scară. Unii chimiști consideră că volumul intern al cartușului (sau coloana) fără a ambala material în interior este volumul coloanei. Cu toate acestea, volumul unei coloane goale nu este CV -ul. CV-ul oricărei coloane sau cartuș este volumul spațiului care nu este ocupat de materialul pre-ambalat într-o coloană. Acest volum include atât volumul interstițial (volumul spațiului din afara particulelor ambalate), cât și porozitatea internă a particulelor (volumul porilor).
Coloanele flash de alumină sunt o opțiune alternativă atunci când eșantioanele sunt sensibile și predispuse la degradare pe silicagel.
Presiunea din spate a coloanei Flash este legată de mărimea particulelor din materialul ambalat. Materialul ambalat cu o dimensiune mai mică a particulelor va avea ca rezultat o presiune mai mare din spate pentru coloana flash. Prin urmare, debitul fazei mobile utilizate în cromatografia flash ar trebui să fie redusă în consecință pentru a împiedica sistemul flash să nu mai funcționeze.
Presiunea din spate a coloanei Flash este, de asemenea, proporțională cu lungimea coloanei. Corpul de coloană mai lung va duce la o presiune mai mare pentru coloana Flash. Mai mult, presiunea din spate a coloanei flash este invers proporțională cu ID -ul (diametrul intern) al corpului coloanei. În cele din urmă, presiunea din spate a coloanei Flash este proporțională cu vâscozitatea fazei mobile utilizate în cromatografia flash.