A energia no instrumento e aguarda sua rápida "sílica readbare começará a se dissolver em solução aquosa de pH 9, embora muito lentamente. No solvente com pH menor que 9 a sílica nu é estável. Verifique se a conexão da rede do iPad está correta e o roteador está ligado.
Para uma purificação ideal com colunas flash C18, siga estas etapas:
① Lave a coluna com 100% do solvente forte (orgânico) para 10 - 20 CVs (volume da coluna), tipicamente metanol ou acetonitrila.
② Libere a coluna com 50% forte + 50% aquoso (se os aditivos forem necessários, inclua -os) para mais 3 - 5 CVs.
③ Libere a coluna com as condições iniciais do gradiente para 3 - 5 CVs.
Para o tamanho da coluna entre 4G e 330G, o conector Luer padrão é usado nessas colunas flash. Para o tamanho da coluna de 800g, 1600g e 3000g, adaptadores de conector adicionais devem ser usados para montar essas grandes colunas flash no sistema de cromatografia flash. Consulte o Kit Adaptador Santai do documento para colunas flash de 800g, 1600g e 3kg para obter mais detalhes.
Para a coluna de fase normal, é recomendável usar a fase móvel em que a proporção de metanol não exceda 25%.
Geralmente, é recomendável usar a fase móvel em que a proporção dos solventes polares não excede 5%. Os solventes polares incluem DMSO, DMF, THF, chá etc.
A carga de amostra sólida é uma técnica útil para carregar a amostra a ser purificada em uma coluna, principalmente para amostras de baixa solubilidade. Nesse caso, o cartucho ILOK Flash é uma escolha muito adequada.
Geralmente, a amostra é dissolvida em um solvente adequado e adsorvido em um sólido adsorvente que poderia ser o mesmo usado em colunas flash, incluindo terras diatomáceas ou sílica ou outros materiais. Após a remoção / evaporação do solvente residual, o adsorvente é colocado em cima de uma coluna parcialmente preenchida ou em um cartucho de carregamento sólido vazio. Para obter informações mais detalhadas, consulte o Guia do Usuário do Documento ILOK-SL CARTRIGED para obter mais detalhes.
O volume da coluna é aproximadamente igual ao volume morto (VM) ao ignorar o volume adicional nos tubos que conectam a coluna com o injetor e o detector.
O tempo morto (TM) é o tempo necessário para a eluição de um componente não retido.
O volume morto (VM) é o volume da fase móvel necessária para a eluição de um componente não filmado. O volume morto pode ser calculado pela seguinte equação: vm = f0*tm.
Entre a equação acima, F0 está a vazão da fase móvel.
Não, a sílica de cobertura final é insolúvel em qualquer solvente orgânico comumente usado.
As colunas flash de sílica são descartáveis e para uso único, mas com manuseio adequado, os cartuchos de sílica podem ser reutilizados sem sacrificar o desempenho. Em ordem para ser reutilizada, a coluna flash de sílica precisa ser simplesmente seca por ar comprimido ou lavado e armazenado em isopropanol.
O armazenamento adequado permitirá que as colunas flash C18 sejam reutilizadas:
• Nunca permita que a coluna seque após o uso.
• Remova todos os modificadores orgânicos lavando a coluna com 80% de metanol ou acetonitrila em água por 3 a 5 CVs.
• Armazene a coluna no solvente de descarga acima mencionado com acessórios finais no lugar.
Para as colunas de tamanho grande acima de 220g, o efeito térmico é óbvio no processo de pré-equilíbrio. Recomenda-se definir a taxa de fluxo de 50 a 60% da taxa de fluxo sugerida no processo de pré-equilíbrio para evitar efeitos térmicos óbvios.
O efeito térmico do solvente misto é mais óbvio que o solvente único. Pegue o sistema de solvente ciclohexano/acetato de etila como exemplo, sugere-se que use 100% de ciclohexano no processo de pré-equilíbrio. Quando a pré-equilíbrio é concluída, o experimento de separação pode ser realizado de acordo com o sistema de solvente predefinido.
Para SepaflashTMAs colunas da série padrão, os conectores utilizados são Luer-Lock In e Luer-Slip Out. Essas colunas podem ser montadas diretamente nos sistemas de combustão da ISCO.
Para as séries Sepaflash HP, colunas da série Bonded ou ILOKTM, os conectores utilizados são Luer-Lock In e Luer-Lock Out. Essas colunas também podem ser montadas nos sistemas de combinação da ISCO por meio de adaptadores extras. Para obter detalhes desses adaptadores, consulte o Kit Adaptador Santai do documento para colunas flash de 800g, 1600g e 3kg.
O volume da coluna de parâmetros (CV) é especialmente útil para determinar fatores de expansão. Alguns químicos pensam que o volume interno do cartucho (ou coluna) sem material de embalagem interno é o volume da coluna. No entanto, o volume de uma coluna vazia não é o CV. O CV de qualquer coluna ou cartucho é o volume do espaço não ocupado pelo material pré-embalado em uma coluna. Este volume inclui o volume intersticial (o volume do espaço fora das partículas embaladas) e a própria porosidade interna da partícula (volume de poros).
As colunas de flash de alumina são uma opção alternativa quando as amostras são sensíveis e propensas à degradação no gel de sílica.
A pressão traseira da coluna flash está relacionada ao tamanho das partículas do material embalado. O material embalado com tamanho de partícula menor resultará em maior pressão para trás para a coluna flash. Portanto, a taxa de fluxo da fase móvel usada na cromatografia flash deve ser reduzida de acordo, a fim de impedir que o sistema flash pare de funcionar.
A pressão traseira da coluna Flash também é proporcional ao comprimento da coluna. O corpo mais longo da coluna resultará em maior pressão para trás para a coluna Flash. Além disso, a pressão traseira da coluna flash é inversamente proporcional ao ID (diâmetro interno) do corpo da coluna. Finalmente, a pressão traseira da coluna flash é proporcional à viscosidade da fase móvel usada na cromatografia flash.