Qawwa fuq l-istrument u stenna l-pront tagħha "Readbare Silika se tibda tinħall f'soluzzjoni milwiema ta 'pH 9, għalkemm bil-mod ħafna. Fis-solvent b'pH inqas minn 9 is-silika vojta hija stabbli. Jekk il-pH tas-solvent jaqbeż id-9, id-dissoluzzjoni se tħaffef hekk kif tiżdied il-pH. end-capped.y ". Kun żgur li l-konnessjoni tan-netwerk iPad hija korretta, u r-router huwa mħaddem.
Għal purifikazzjoni ottimali bil-kolonni tal-flash C18, jekk jogħġbok segwi dawn il-passi:
① Laħlaħ il-kolonna b'100% tas-solvent qawwi (organiku) għal 10 - 20 CVs (volum tal-kolonna), tipikament metanol jew acetonitrile.
② Laħlaħ il-kolonna b'50% qawwi + 50% milwiem (jekk huma meħtieġa addittivi, jinkluduhom) għal 3 - 5 CVs oħra.
③ Laħlaħ il-kolonna bil-kundizzjonijiet tal-gradjent inizjali għal 3 - 5 CVs.
Għad-daqs tal-kolonna bejn 4G u 330G, il-konnettur Luer standard jintuża f'dawn il-kolonni tal-flash. Għad-daqs tal-kolonna ta '800g, 1600g u 3000g, adapters tal-konnettur addizzjonali għandhom jintużaw biex jintramaw dawn il-kolonni tal-flash kbar fuq is-sistema tal-kromatografija flash. Jekk jogħġbok irreferi għad-Dokument Santai Adapter Kit għal 800g, 1600g, kolonni flash 3kg għal aktar dettalji.
Għal kolonna ta 'fażi normali, huwa rrakkomandat li tuża l-fażi mobbli fejn il-proporzjon tal-metanol ma jaqbiżx il-25%.
Ġeneralment, huwa rrakkomandat li tuża l-fażi mobbli fejn il-proporzjon tas-solventi polari ma jaqbiżx il-5%. Is-solventi polari jinkludu DMSO, DMF, THF, tè eċċ.
It-tagħbija solida tal-kampjun hija teknika utli biex tgħabbi l-kampjun biex jiġi ppurifikat fuq kolonna, partikolarment għal kampjuni ta 'solubilità baxxa. F'dan il-każ, ILOK Flash Cartridge huwa għażla adattata ħafna.
Ġeneralment, il-kampjun jinħall f’solvent adattat u adsorbi fuq adsorbant solidu li jista ’jkun l-istess bħal dak użat fil-kolonni tal-flash, inklużi Dinja Diatomaċeja jew silika jew materjali oħra. Wara t-tneħħija / l-evaporazzjoni tas-solvent residwu, l-adsorbent jitpoġġa fuq kolonna parzjalment mimlija jew ġo skartoċċ tat-tagħbija solida vojta. Għal informazzjoni aktar dettaljata, jekk jogħġbok irreferi għad-dokument tal-Gwida għall-Utent tal-Iskartoċċ tad-Dokument għal aktar dettalji.
Il-volum tal-kolonna huwa bejn wieħed u ieħor daqs il-volum mejjet (VM) meta jinjora l-volum addizzjonali fit-tubi li jgħaqqdu l-kolonna mal-injettur u d-ditekter.
Il-ħin mejjet (TM) huwa l-ħin meħtieġ għall-elużjoni ta 'komponent mhux mibgħut.
Il-volum mejjet (VM) huwa l-volum tal-fażi mobbli meħtieġa għall-elużjoni ta 'komponent mhux mibgħut. Il-volum mejjet jista 'jiġi kkalkulat bl-ekwazzjoni li ġejja: VM = F0 * Tm.
Fost l-ekwazzjoni ta 'hawn fuq, F0 hija r-rata tal-fluss tal-fażi mobbli.
Le, is-silika b'kappa tat-tarf ma tinħallx fi kwalunkwe solvent organiku użat komunement.
Il-kolonni tal-flash tas-silika huma jintremew u għal użu wieħed, iżda bl-immaniġġjar xieraq, l-iskrataċ tas-silika jistgħu jerġgħu jintużaw mingħajr ma jissagrifikaw il-prestazzjoni. Sabiex terġa 'tintuża, il-kolonna tal-flash tas-silika teħtieġ li tkun sempliċement imnixxfa bl-arja kkompressata jew imlaħlaħ bl-isopropanol.
Ħażna xierqa se tippermetti li l-kolonni tal-flash C18 jerġgħu jintużaw mill-ġdid:
• Qatt tħalli l-kolonna tinxef wara li tuża.
• Neħħi l-modifikaturi organiċi kollha billi tlaħliħ il-kolonna b'80% metanol jew acetonitrile fl-ilma għal 3 - 5 CVs.
• Aħżen il-kolonna fis-solvent tal-fwawar imsemmi hawn fuq bil-fittings tat-tarf fil-post.
Għall-kolonni tad-daqs kbir 'il fuq minn 220g, l-effett termali huwa ovvju fil-proċess ta' pre-ekwilibriju. Huwa rrakkomandat li tiġi stabbilita r-rata tal-fluss f'50-60% tar-rata tal-fluss issuġġerita fil-proċess ta 'qabel l-ekwilibriju biex jiġi evitat effett termiku ovvju.
L-effett termali tas-solvent imħallat huwa aktar ovvju minn solvent wieħed. Ħu s-sistema tas-solvent cyclohexane / aċetat tal-etil bħala eżempju, huwa ssuġġerit li tuża 100% cyclohexane fil-proċess ta 'qabel l-ekwilibriju. Meta titlesta l-ekwilibrazzjoni minn qabel, l-esperiment ta 'separazzjoni jista' jitwettaq skond is-sistema ta 'solvent issettjata minn qabel.
Għal SepaflashTMKolonni standard tas-serje, il-konnetturi użati huma luer-lock in u luer-slip out. Dawn il-kolonni jistgħu jiġu mmuntati direttament fuq is-sistemi Combiflash ta 'ISCO.
Għas-serje sepaflash HP, serje tas-serje marbuta jew il-kolonni tal-ILOKTM, il-konnetturi użati huma luer-lock in u luer-lock out. Dawn il-kolonni jistgħu wkoll jiġu mmuntati fuq is-sistemi Combiflash ta 'ISCO permezz ta' adapters żejda. Għad-dettalji ta 'dawn l-adapters, jekk jogħġbok irreferi għad-Dokument Santai Adapter Kit għal 800g, 1600g, kolonni flash 3kg.
Il-volum tal-kolonna tal-parametri (CV) huwa partikolarment utli biex jiġi ddeterminat fatturi ta 'skala. Xi kimiċi jaħsbu li l-volum intern tal-iskartoċċ (jew il-kolonna) mingħajr il-materjal tal-ippakkjar ġewwa huwa l-volum tal-kolonna. Madankollu, il-volum ta 'kolonna vojta mhuwiex is-CV. Is-CV ta 'kwalunkwe kolonna jew skartoċċ huwa l-volum ta' l-ispazju mhux okkupat mill-materjal ippakkjat minn qabel f'kolonna. Dan il-volum jinkludi kemm il-volum interstizjali (il-volum tal-ispazju barra l-partiċelli ppakkjati) kif ukoll il-porożità interna tal-partiċella stess (volum tal-pori).
Il-kolonni tal-flash tal-alumina huma għażla alternattiva meta l-kampjuni huma sensittivi u suxxettibbli għal degradazzjoni fuq ġel tas-silika.
Il-pressjoni ta 'wara tal-kolonna tal-flash hija relatata mad-daqs tal-partikula ta' materjal ippakkjat. Il-materjal ippakkjat b'daqs iżgħar tal-partiċelli jirriżulta fi pressjoni tad-dahar ogħla għall-kolonna tal-flash. Għalhekk ir-rata tal-fluss tal-fażi mobbli użata fil-kromatografija flash għandha titbaxxa kif xieraq sabiex tiġi evitata li s-sistema tal-flash tieqaf taħdem.
Il-pressjoni ta 'wara tal-kolonna tal-flash hija wkoll proporzjonali mat-tul tal-kolonna. Korp tal-kolonna itwal jirriżulta fi pressjoni ogħla fid-dahar għall-kolonna tal-flash. Barra minn hekk, il-pressjoni ta 'wara tal-kolonna tal-flash hija inversament proporzjonali għall-ID (dijametru intern) tal-korp tal-kolonna. Fl-aħħarnett, il-pressjoni ta 'wara tal-kolonna flash hija proporzjonali għall-viskożità tal-fażi mobbli użata fil-kromatografija flash.