Kuasa pada instrumen dan tunggu untuk segera "Silika readbare akan mula larut dalam larutan berair pH 9, walaupun sangat perlahan. Dalam pelarut dengan pH lebih rendah daripada 9 silika terdedah adalah stabil. Pastikan sambungan rangkaian iPad betul, dan penghala dikuasakan.
Untuk pemurnian optimum dengan lajur flash C18, sila ikuti langkah -langkah ini:
① Siram lajur dengan 100% pelarut yang kuat (organik) untuk 10 - 20 CV (jumlah lajur), biasanya metanol atau asetonitril.
② Siram lajur dengan 50% kuat + 50% berair (jika bahan tambahan diperlukan, masukkannya) untuk 3 - 5 CVs lagi.
③ Siram lajur dengan keadaan kecerunan awal untuk 3 - 5 cvs.
Untuk saiz lajur antara 4g dan 330g, penyambung Luer standard digunakan dalam lajur flash ini. Untuk saiz lajur 800g, 1600g dan 3000g, penyesuai penyambung tambahan harus digunakan untuk memasang lajur kilat besar ini pada sistem kromatografi flash. Sila rujuk dokumen Kit Penyesuai SaNai untuk lajur flash 800g, 1600g, 3kg untuk maklumat lanjut.
Untuk lajur fasa biasa, disyorkan untuk menggunakan fasa mudah alih di mana nisbah metanol tidak melebihi 25%.
Umumnya, disyorkan untuk menggunakan fasa mudah alih di mana nisbah pelarut polar tidak melebihi 5%. Pelarut kutub termasuk DMSO, DMF, THF, teh dll.
Pemuatan sampel pepejal adalah teknik yang berguna untuk memuat sampel untuk disucikan ke lajur, terutamanya untuk sampel kelarutan rendah. Dalam kes ini, ILOK Flash Cartridge adalah pilihan yang sangat sesuai.
Secara amnya, sampel dibubarkan dalam pelarut yang sesuai dan terserap ke penyerap pepejal yang boleh sama seperti yang digunakan dalam lajur flash, termasuk bumi diatoma atau silika atau bahan lain. Selepas penyingkiran / penyejatan pelarut sisa, penyerap diletakkan di atas lajur yang dipenuhi sebahagian atau ke dalam kartrij pemuatan pepejal kosong. Untuk maklumat yang lebih terperinci, sila rujuk kepada Panduan Pengguna Cartridge ILOK-SL Dokumen untuk maklumat lanjut.
Jumlah lajur adalah kira -kira sama dengan jumlah mati (VM) apabila mengabaikan jumlah tambahan dalam tiub yang menghubungkan lajur dengan penyuntik dan pengesan.
Masa mati (TM) adalah masa yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak teratur.
Volume mati (VM) adalah jumlah fasa mudah alih yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak teratur. Jumlah mati boleh dikira dengan persamaan berikut: vm = f0*tm.
Antara persamaan di atas, F0 adalah kadar aliran fasa mudah alih.
Tidak, silika akhir yang ditutup tidak larut dalam mana-mana pelarut organik yang biasa digunakan.
Lajur flash silika boleh guna dan untuk kegunaan tunggal, tetapi dengan pengendalian yang betul, kartrij silika boleh digunakan semula tanpa mengorbankan prestasi. Dalam perintah yang akan digunakan semula, lajur flash silika hanya perlu dikeringkan oleh udara termampat atau dibuang dan disimpan dalam isopropanol.
Penyimpanan yang betul akan membolehkan lajur kilat C18 digunakan semula:
• Jangan biarkan lajur kering selepas menggunakan.
• Keluarkan semua pengubah organik dengan membuang lajur dengan 80% metanol atau asetonitril dalam air untuk 3 - 5 cvs.
• Simpan lajur dalam pelarut pembilasan yang disebutkan di atas dengan kelengkapan akhir di tempat.
Untuk lajur saiz besar di atas 220g, kesan terma jelas dalam proses pra-keseimbangan. Adalah disyorkan untuk menetapkan kadar aliran pada 50-60% daripada kadar aliran yang dicadangkan dalam proses pra-keseimbangan untuk mengelakkan kesan terma yang jelas.
Kesan terma pelarut campuran lebih jelas daripada pelarut tunggal. Ambil sistem pelarut sikloheksana/etil asetat sebagai contoh, disarankan bahawa menggunakan 100% sikloheksana dalam proses pra-keseimbangan. Apabila pra-kesamaan selesai, percubaan pemisahan boleh dilakukan mengikut sistem pelarut pratetap.
Untuk sepaflashTMLajur siri standard, penyambung yang digunakan adalah luer-lock in dan luer-slip keluar. Lajur ini boleh dipasang secara langsung pada sistem combiflash Isco.
Untuk siri HP Sepaflash, siri terikat atau lajur siri iloktm, penyambung yang digunakan adalah luer-lock in dan luer-lock keluar. Lajur ini juga boleh dipasang pada sistem combiflash Isco melalui penyesuai tambahan. Untuk butiran penyesuai ini, sila rujuk kepada dokumen SAITAI Adapter Kit untuk lajur flash 800g, 1600g, 3kg.
Jumlah lajur parameter (CV) amat berguna untuk menentukan faktor skala. Sesetengah ahli kimia berfikir jumlah dalaman kartrij (atau lajur) tanpa bahan pembungkusan di dalamnya adalah jumlah lajur. Walau bagaimanapun, jumlah lajur kosong bukan CV. CV mana-mana lajur atau kartrij adalah jumlah ruang yang tidak diduduki oleh bahan yang telah dibungkus dalam lajur. Jumlah ini termasuk kedua -dua volum interstisial (jumlah ruang di luar zarah yang dibungkus) dan keliangan dalaman sendiri (volum liang).
Lajur Flash Alumina adalah pilihan alternatif apabila sampel sensitif dan terdedah kepada kemerosotan pada gel silika.
Tekanan belakang lajur kilat berkaitan dengan saiz zarah bahan yang dibungkus. Bahan yang dibungkus dengan saiz zarah yang lebih kecil akan menghasilkan tekanan belakang yang lebih tinggi untuk lajur kilat. Oleh itu, kadar aliran fasa mudah alih yang digunakan dalam kromatografi kilat harus diturunkan dengan sewajarnya untuk mengelakkan sistem flash dari berhenti berfungsi.
Tekanan belakang lajur Flash juga berkadar dengan panjang lajur. Badan lajur yang lebih panjang akan menghasilkan tekanan belakang yang lebih tinggi untuk lajur kilat. Selain itu, tekanan belakang lajur flash berkadar songsang dengan ID (diameter dalaman) badan lajur. Akhirnya, tekanan belakang lajur flash adalah berkadar dengan kelikatan fasa mudah alih yang digunakan dalam kromatografi flash.