Instrumenta jauda un gaidīt tā uzvedni "Readbare silīcija dioksīds sāks izšķīdināt pH 9 ūdens šķīdumā, kaut arī ļoti lēni. Šķīdinātājā ar pH zemāku par 9, kailais silīcija dioksīds ir stabils. Ja šķīdinātāja pH pārsniedz 9, izšķīdināšana paātrinās, pH palielinoties. Funkcionalizēta silīcija diapazons ir galu galā. Pārliecinieties, ka iPad tīkla savienojums ir pareizs, un maršrutētājs ir ieslēgts.
Lai iegūtu optimālu attīrīšanu ar C18 zibspuldzes kolonnām, lūdzu, rīkojieties šīs darbības:
① Izskalojiet kolonnu ar 100% spēcīgā (organiskā) šķīdinātāja 10 - 20 CV (kolonnas tilpums), parasti metanolu vai acetonitrilu.
② Izskalojiet kolonnu ar 50% spēcīgu + 50% ūdens (ja ir vajadzīgas piedevas, iekļaujiet tās) vēl 3 - 5 CV.
③ Izskalojiet kolonnu ar sākotnējiem gradienta apstākļiem 3 - 5 CVS.
Kolonnas lielumam starp 4G un 330G šajās zibspuldzēs tiek izmantots standarta Luer savienotājs. Kolonnas lielumam 800 g, 1600 g un 3000 g ir jāizmanto papildu savienotāju adapteri, lai šīs lielās zibatmiņas kolonnas uzstādītu uz zibspuldzes hromatogrāfijas sistēmu. Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet dokumentu Santai adaptera komplektā 800G, 1600G, 3 kg zibatmiņas kolonnās.
Parastā fāzes kolonnā ieteicams izmantot mobilo fāzi, kurā metanola attiecība nepārsniedz 25%.
Parasti ieteicams izmantot mobilo fāzi, kurā polāro šķīdinātāju attiecība nepārsniedz 5%. Polārie šķīdinātāji ietver DMSO, DMF, THF, tēju utt.
Cietā parauga iekraušana ir noderīgs paņēmiens, lai ielādētu paraugu, kas attīrīts uz kolonnas, īpaši zemas šķīstības paraugiem. Šajā gadījumā Ilok Flash kārtridžs ir ļoti piemērota izvēle.
Parasti paraugu izšķīdina piemērotā šķīdinātājā un adsorbēts uz cietas adsorbantas, kas varētu būt tāds pats kā zibatmiņas kolonnās, ieskaitot diatomītiskās zemes vai silīcija dioksīda vai citus materiālus. Pēc atlikušā šķīdinātāja noņemšanas / iztvaikošanas adsorbents tiek ievietots daļēji piepildītas kolonnas virsū vai tukšā cietā iekraušanas kasetnē. Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet dokumentu Ilok-SL kārtridža lietotāja rokasgrāmatu, lai iegūtu sīkāku informāciju.
Kolonnas tilpums ir aptuveni vienāds ar mirušo tilpumu (VM), ignorējot papildu tilpumu caurulēs, kas savieno kolonnu ar inžektoru un detektoru.
Mirušais laiks (TM) ir laiks, kas nepieciešams neatkārtota komponenta eluēšanai.
Miris tilpums (VM) ir mobilās fāzes tilpums, kas nepieciešams neatkārtota komponenta eluēšanai. Mirušo tilpumu var aprēķināt ar šādu vienādojumu: vm = f0*tm.
Starp iepriekšminēto vienādojumu F0 ir mobilās fāzes plūsmas ātrums.
Nē, silīcija dioksīda galu galā nešķīst jebkurā parasti izmantotā organiskā šķīdinātājā.
Silīcija zibatmiņas kolonnas ir vienreiz lietojamas un vienreiz lietojamām, bet ar pareizu vadāmību silīcija patika var izmantot atkārtoti, neupurējot veiktspēju. Lai atkārtoti izmantotu, silīcija zibatmiņas kolonna ir vienkārši jāizžāvē ar saspiestu gaisu vai izskalo ar un jāuzglabā izopropanolā.
Pareiza uzglabāšana ļaus atkārtoti izmantot C18 zibspuldzes kolonnas:
• Nekad neļaujiet kolonnai izžūt pēc lietošanas.
• Noņemiet visus organiskos modifikatorus, izskalojot kolonnu ar 80% metanolu vai acetonitrilu ūdenī 3 - 5 CV.
• Saglabājiet kolonnu iepriekšminētajā skalošanas šķīdinātājā ar gala veidgabaliem.
Liela izmēra kolonnām virs 220 g termiskais efekts ir acīmredzams pirms līdzsvara procesā. Lai izvairītos no acīmredzamas siltuma efekta, ieteicams iestatīt plūsmas ātrumu 50–60% no ierosinātā plūsmas ātruma pirms līdzsvara procesā.
Jaukta šķīdinātāja termiskā iedarbība ir acīmredzamāka nekā viena šķīdinātāja. Kā piemēru ņemiet šķīdinātāja sistēmas cikloheksāna/etilacetāta, tiek ierosināts, ka pirms līdzsvara procesā tiek izmantots 100% cikloheksāns. Kad ir pabeigta iepriekšēja līdzsvara, atdalīšanas eksperimentu var veikt saskaņā ar iepriekš iestatīto šķīdinātāju sistēmu.
Par sepafluashTMStandarta sērijas kolonnas, izmantotie savienotāji ir Luer-Lock un luer-slip. Šīs kolonnas varēja tieši uzstādīt ISCO Combiflash sistēmās.
SepaFlah HP sērijai, saites sērijai vai ILOKTM sērijas kolonnām izmantotie savienotāji ir Luer-Lock in un luer-lock. Šīs kolonnas varēja uzstādīt arī ISCO Combiflash sistēmās, izmantojot papildu adapterus. Lai iegūtu sīkāku informāciju par šiem adapteriem, lūdzu, skatiet dokumentu Santai adaptera komplektu 800G, 1600G, 3 kg zibatmiņas kolonnās.
Parametru kolonnas tilpums (CV) ir īpaši noderīgs, lai noteiktu palielināšanas faktorus. Daži ķīmiķi domā, ka kārtridža (vai kolonnas) iekšējais tilpums bez iesaiņošanas materiāla ir kolonnas tilpums. Tomēr tukšas kolonnas tilpums nav CV. Jebkuras kolonnas vai kārtridža CV ir telpas tilpums, kuru nav aizņemts kolonnā iepriekš iesaiņots materiāls. Šis tilpums ietver gan intersticiālo tilpumu (telpas tilpumu ārpus iesaiņotajām daļiņām), gan pašas daļiņas iekšējā porainība (poru tilpums).
Alumīnija oksīda zibatmiņas kolonnas ir alternatīva iespēja, ja paraugi ir jutīgi un ir pakļauti silikagela noārdīšanai.
Zibspuldzes kolonnas pretspiediens ir saistīts ar iesaiņotā materiāla daļiņu izmēru. Iesaiņotais materiāls ar mazāku daļiņu izmēru radīs augstāku zibspuldzes atpakaļceļu. Tāpēc zibspuldzes hromatogrāfijā izmantotās mobilās fāzes plūsmas ātrums būtu attiecīgi jānovērš, lai zibspuldzes sistēmas pārtraukšana darbotos.
Zibspuldzes kolonnas pretspiediens ir proporcionāls arī kolonnas garumam. Garāka kolonnas korpuss izraisīs augstāku zibspuldzes atpakaļceļu. Turklāt zibspuldzes kolonnas pretspiediens ir apgriezti proporcionāls kolonnas korpusa ID (iekšējam diametram). Visbeidzot, zibspuldzes kolonnas pretspiediens ir proporcionāls mobilās fāzes viskozitātei, ko izmanto flash hromatogrāfijā.