Galia ant instrumento ir palaukite, kol jo greitas „READBARE silicio dioksidas pradės ištirpinti vandeniniame pH 9 tirpale, nors ir labai lėtai. Tirpiklyje, kurio pH yra mažesnis nei 9, plikos silicio dioksido yra stabilus. Jei tirpiklio pH viršija 9, nuo tirpimo padidės, nes pH yra galinė. Įsitikinkite, kad „iPad“ tinklo ryšys yra teisingas, o maršrutizatorius įjungtas.
Norėdami optimaliai apsivalyti naudojant C18 „Flash“ stulpelius, atlikite šiuos veiksmus:
① Nuplaukite kolonėlę 100% stipraus (organinio) tirpiklio 10–20 cvs (kolonėlės tūris), paprastai metanolio ar acetonitrilo.
② Nuplaukite kolonėlę 50% stiprių + 50% vandeninių (jei reikia priedų, įtraukti juos) dar 3–5 cv.
③ Nuplaukite kolonėlę pradinėmis gradiento sąlygomis 3 - 5 cv.
Stulpelio dydžiui nuo 4G iki 330 g, šiuose blykstės stulpeliuose naudojama standartinė „Luer“ jungtis. Stulpelio dydžiui 800 g, 1600 g ir 3000 g, šiems dideliems blykstės stulpeliams pritvirtinti „Flash“ chromatografijos sistemoje turėtų būti naudojami papildomi jungčių adapteriai. Norėdami gauti daugiau informacijos, skaitykite dokumento „Santai“ adapterio rinkinyje, kuriame pateikiami 800 g, 1600 g, 3 kg blykstės stulpeliai.
Normalioje fazės stulpelyje rekomenduojama naudoti mobilią fazę, kai metanolio santykis neviršija 25%.
Paprastai rekomenduojama naudoti mobiliąsias fazes, kai polinių tirpiklių santykis neviršija 5%. Poliariniuose tirpikliuose yra DMSO, DMF, THF, arbata ir kt.
Kietojo mėginio apkrova yra naudinga technika, norint įkelti mėginį, kurį reikia išgryninti ant kolonėlės, ypač mažo tirpumo pavyzdžiams. Šiuo atveju „Ilok Flash“ kasetė yra labai tinkamas pasirinkimas.
Paprastai mėginys ištirpinamas tinkamame tirpiklyje ir adsorbuojamas ant kieto adsorbanto, kuris gali būti toks pat, kaip naudojami blykstės stulpeliuose, įskaitant diatomacines žemes ar silicio dioksidą ar kitas medžiagas. Pašalinus / išgarinus likusį tirpiklį, adsorbentas dedamas ant iš dalies užpildytos kolonėlės viršaus arba į tuščią kietą pakrovimo kasetę. Norėdami gauti daugiau informacijos, jei norite gauti išsamesnės informacijos, skaitykite dokumentą „Ilok-SL Caretridge“ vartotojo vadovą.
Stulpelio tūris yra maždaug lygus negyvo tūriui (VM), kai ignoruojant papildomą tūrį vamzdeliuose, jungiančiuose kolonėlę su injektoriumi ir detektoriumi.
Negyvojo laikas (TM) yra laikas, reikalingas neišmesto komponento elijavimui.
Negyvojo tūrio (VM) yra mobiliosios fazės tūris, reikalingas neišleisto komponento ištirpimui. Negyvą tūrį galima apskaičiuoti pagal šią lygtį: Vm = f0*tm.
Tarp aukščiau pateiktos lygties F0 yra mobiliosios fazės srauto greitis.
Ne, bet kuriame dažniausiai naudojamame organiniame tirpiklyje netirpsta galutiniai silicio dioksidai.
Silicio blykstės kolonėlės yra vienkartinės ir skirtos naudoti, tačiau tinkamai tvarkant silicio dioksido kasetes galima pakartotinai naudoti neprarandant našumo. Naudojant pakartotinai naudojamas silicio dioksido blykstės stulpelis, reikia tiesiog išdžiovinti suslėgtą orą arba praplauti ir laikyti izopropanolyje.
Tinkama saugykla leis pakartotinai naudoti „C18 Flash“ stulpelius:
• Niekada neleiskite stulpeliui išdžiūti po naudojimo.
• Nuimkite visus organinius modifikatorius, plaudami kolonėlę 80% metanolio arba acetonitrilo vandenyje 3–5 cv.
• Aukščiau paminėtame plovimo tirpiklyje laikykite stulpelį su galutinėmis jungiamosiomis detalėmis.
Didelio dydžio stulpeliams, viršijantiems 220 g, šiluminis poveikis akivaizdus prieš pusiausvyrą. Rekomenduojama nustatyti srauto greitį esant 50–60% siūlomo srauto greičio prieš pusiausvyros procesą, kad būtų išvengta akivaizdaus šiluminio efekto.
Mišriojo tirpiklio šiluminis poveikis yra akivaizdesnis nei pavienio tirpiklio. Paimkite tirpiklio sistemos cikloheksaną/etilo acetatą kaip pavyzdį. Siūloma, kad prieš pusiausvyros procesą būtų naudojamas 100% cikloheksanas. Kai išankstinis balansavimas bus baigtas, atskyrimo eksperimentas galėtų būti atliktas pagal iš anksto nustatytą tirpiklio sistemą.
Dėl SepaflashTMStandartinės serijos stulpeliai, naudojamos jungtys yra „Luer-Lock“ ir „Luer-Slip“. Šios stulpeliai galėtų būti tiesiogiai pritvirtinti prie ISCO kombinuotų sistemų.
„Sepaflash HP“ serijos, sujungtų serijų ar „IlOKTM“ serijos stulpeliams naudojamos jungtys yra „Luer-Lock“ ir „Luer-Lock“. Šiuos stulpelius taip pat galima montuoti ant ISCO kombinuotų sistemų per papildomus adapterius. Norėdami gauti išsamią informaciją apie šiuos adapterius, skaitykite dokumento „Santai“ adapterio rinkinyje, skirtą 800 g, 1600 g, 3 kg „Flash“ stulpeliams.
Parametro stulpelio tūris (CV) yra ypač naudingas nustatant mastelio kaupimo veiksnius. Kai kurie chemikai mano, kad vidinis kasetės (arba stulpelio) tūris be pakavimo medžiagos viduje yra stulpelio tūris. Tačiau tuščio stulpelio tūris nėra CV. Bet kurios kolonėlės ar kasetės CV yra erdvės tūris, kurio neužimta medžiaga, pakelta kolonoje. Šis tūris apima ir intersticinį tūrį (erdvės tūrį už supakuotų dalelių), ir pačios dalelės vidinį poringumą (porų tūris).
Aliuminio oksido blykstės stulpeliai yra alternatyvus pasirinkimas, kai mėginiai yra jautrūs ir yra linkę į skilimo silikagelį.
Flash kolonėlės užpakalinis slėgis yra susijęs su supakuotos medžiagos dalelių dydžiu. Supakuota medžiaga su mažesniu dalelių dydžiu padidins blykstės kolonėlės atgalinį slėgį. Todėl mobiliosios fazės, naudojamos „Flash“ chromatografijoje, srauto greitis turėtų būti atitinkamai sumažintas, kad blykstės sistema nebūtų veikianti.
„Flash“ kolonėlės užpakalinis slėgis taip pat yra proporcingas stulpelio ilgiui. Ilgesnis stulpelio korpusas padidins „Flash“ stulpelio nugaros slėgį. Be to, „Flash“ kolonėlės užpakalinis slėgis yra atvirkščiai proporcingas stulpelio korpuso ID (vidiniam skersmeniui). Galiausiai „Flash“ kolonėlės užpakalinis slėgis yra proporcingas mobiliosios fazės, naudojamos „Flash“ chromatografijoje, klampumui.