ההפעלה על המכשיר והמתנה להנחיה "קריאה סיליקה תתחיל להתמוסס בתמיסה מימית של pH 9, אם כי לאט מאוד. בממיס עם pH נמוך מ- 9 הסיליקה החשופה יציבה. אם החומציות של הממיס יעלה על 9, הפירוק יאיץ את החומציות. וודא כי חיבור רשת ה- iPad נכון, והנתב מופעל.
לטיהור מיטבי עם עמודות פלאש C18, אנא בצע את הצעדים הבאים:
① סומק את העמוד עם 100% מהממס החזק (האורגני) למשך 10 - 20 קורות חיים (נפח עמודים), בדרך כלל מתנול או אצטוניטריל.
② סומק את העמוד עם 50% חזק + 50% מימיים (אם נדרשים תוספים, כלול אותם) עבור עוד 3 - 5 קורות חיים.
③ סומק את העמודה עם תנאי השיפוע הראשוניים עבור 3 - 5 קורות חיים.
עבור גודל העמודה בין 4G ל- 330G, מחבר LUER סטנדרטי משמש בעמודות הבזק הללו. עבור גודל העמודה של 800 גרם, 1600 גרם ו- 3000 גרם, יש להשתמש במתאמי מחברים נוספים כדי להרכיב עמודי פלאש גדולים אלה במערכת הכרומטוגרפיה של פלאש. אנא עיין בערכת מתאם Santai המסמך עבור 800 גרם, 1600 גרם, 3 ק"ג עמודות פלאש לפרטים נוספים.
בעמודת שלב רגיל, מומלץ להשתמש בשלב הנייד בו היחס בין מתנול אינו עולה על 25%.
באופן כללי, מומלץ להשתמש בשלב הנייד בו היחס בין המיסים הקוטביים אינו עולה על 5%. הממיסים הקוטביים כוללים DMSO, DMF, THF, תה וכו '.
העמסת מדגם מוצק היא טכניקה שימושית לטעינת הדגימה שיש לטיהור על עמוד, במיוחד לדגימות של ממיסות נמוכה. במקרה זה, מחסנית הפלאש של אילוק היא בחירה מתאימה מאוד.
באופן כללי, הדגימה מומסת בממס מתאים ונסופג על ספיגה מוצקה שיכולה להיות זהה לשימוש בעמודי פלאש, כולל אדמות דיאטומיות או סיליקה או חומרים אחרים. לאחר הסרת / אידוי הממס הנותר, הספיגה מונחת על גבי עמוד מלא בחלקן או למחסנית טעינה מוצקה ריקה. למידע מפורט יותר, עיין במסמך מדריך למשתמש של מחסנית ILOK-SL לפרטים נוספים.
נפח העמודה שווה בערך לנפח מת (VM) כאשר מתעלמים מהנפח הנוסף בצינורות המחברים את העמוד עם המזרק והגלאי.
זמן מת (TM) הוא הזמן הנדרש לביטול רכיב שלא הוחזר.
נפח מת (VM) הוא נפח השלב הנייד הנדרש לצורך חיסול של רכיב שלא הוחזר. ניתן לחשב נפח מת על ידי המשוואה הבאה: VM = F0*TM.
בין המשוואה לעיל, F0 הוא קצב הזרימה של השלב הנייד.
לא, סיליקה מכוסה קצה אינה מסיסה בכל ממס אורגני נפוץ.
עמודי הפלאש של סיליקה חד פעמיים ולשימוש יחיד, אך עם טיפול נכון, ניתן לעשות שימוש חוזר במחסניות הסיליקה מבלי להקריב את הביצועים. אם יש לעשות שימוש חוזר, יש לייבש את עמוד הפלאש של סיליקה פשוט על ידי אוויר דחוס או לשטוף אותו ולשמור באיזופרופנול.
אחסון תקין יאפשר שימוש חוזר בעמודות הבזק של C18:
• לעולם אל תאפשר לעמודה להתייבש לאחר השימוש.
• הסר את כל השינויים האורגניים על ידי שטיפת העמוד עם 80% מתנול או אצטוניטריל במים במשך 3 - 5 קורות חיים.
• אחסן את העמודה בממס הסומק שהוזכר לעיל עם אביזרי קצה במקום.
עבור עמודות הגודל הגדולות מעל 220 גרם, האפקט התרמי ברור בתהליך של שיווי משקל. מומלץ לקבוע את קצב הזרימה על 50-60% מקצב הזרימה המוצע בתהליך טרום שיווי משקל כדי למנוע השפעה תרמית ברורה.
האפקט התרמי של ממס מעורב ברור יותר מממס יחיד. קח את מערכת הממס Cyclohexane/Ethyl Acetate כדוגמה, מוצע להשתמש ב 100% cyclohexane בתהליך לפני שיווי המשקל. עם השלמת שיווי המשקל, ניתן לבצע את ניסוי ההפרדה על פי מערכת הממס מראש.
לספפלשTMעמודות סדרה סטנדרטיות, המחברים המשמשים הם מנעול Luer פנימה ו- Luer-Slip Out. ניתן להרכיב ישירות עמודים אלה על מערכות הקומבפלש של ISCO.
עבור Sepaflash HP Series, עמודות סדרות מלוכדות או עמודות סדרת ILOKTM, המחברים המשמשים הם Luer-Lock פנימה ונעילת Luer Out. ניתן להרכיב עמודים אלה גם על מערכות הקומבפלש של ISCO באמצעות מתאמים נוספים. לפרטי המתאמים הללו, עיין בערכת מתאם Santai המסמך עבור 800 גרם, 1600 גרם, 3 ק"ג עמודות פלאש.
נפח העמודה של הפרמטר (CV) שימושי במיוחד לקביעת גורמי קנה מידה. יש כימאים שחושבים שהנפח הפנימי של המחסנית (או העמודה) מבלי לארוז חומר בפנים הוא נפח העמוד. עם זאת, עוצמת העמודה הריקה אינה קורות החיים. קורות החיים של כל עמוד או מחסנית הוא נפח המרחב שאינו תפוס על ידי החומר ארוז מראש בעמודה. נפח זה כולל הן את הנפח הבין -עירוני (נפח החלל מחוץ לחלקיקים הארוזים) וגם את נקבוביותו הפנימית של החלקיק (נפח נקבוביות).
עמודי הפלאש האלומינה הם אפשרות אלטרנטיבית כאשר הדגימות רגישות ומועדות להשפלה על סיליקה ג'ל.
הלחץ האחורי של עמוד הפלאש קשור לגודל החלקיקים של החומר הארוז. החומר הארוז עם גודל החלקיקים הקטן יותר יביא ללחץ גב גבוה יותר עבור עמוד הפלאש. לכן יש להוריד את קצב הזרימה של השלב הנייד המשמש בכרומטוגרפיה של פלאש בהתאם על מנת למנוע ממערכת הפלאש להפסיק לעבוד.
הלחץ האחורי של עמוד הפלאש הוא גם פרופורציונלי לאורך העמודה. גוף העמודה הארוך יותר יביא ללחץ גב גבוה יותר עבור עמוד הפלאש. יתר על כן, הלחץ האחורי של עמוד הפלאש הוא ביחס הפוך למזהה (קוטר פנימי) של גוף העמוד. לבסוף, הלחץ האחורי של עמוד הפלאש הוא פרופורציונלי לצמיגות השלב הנייד המשמש בכרומטוגרפיה של פלאש.