Kekuatan pada instrumen dan tunggu cepat "Readbare Silica akan mulai larut dalam larutan air pH 9, meskipun sangat lambat. Dalam pelarut dengan pH lebih rendah dari 9 silika telanjang stabil. Jika pH pelarut melebihi 9, pembubaran. Pastikan koneksi jaringan iPad sudah benar, dan router dinyalakan.
Untuk pemurnian optimal dengan kolom C18 Flash, silakan ikuti langkah -langkah ini:
① Siram kolom dengan 100% pelarut yang kuat (organik) untuk 10 - 20 CV (volume kolom), biasanya metanol atau asetonitril.
② Siram kolom dengan 50% kuat + 50% berair (jika diperlukan aditif, sertakan) untuk 3 - 5 CV lainnya.
③ Siram kolom dengan kondisi gradien awal untuk 3 - 5 CV.
Untuk ukuran kolom antara 4G dan 330G, konektor Luer standar digunakan dalam kolom flash ini. Untuk ukuran kolom 800g, 1600g dan 3000g, adaptor konektor tambahan harus digunakan untuk memasang kolom flash besar ini pada sistem kromatografi flash. Silakan merujuk ke dokumen Kit Adaptor Santai untuk 800g, 1600g, 3kg Flash Columns untuk lebih jelasnya.
Untuk kolom fase normal, disarankan untuk menggunakan fase gerak di mana rasio metanol tidak melebihi 25%.
Secara umum, disarankan untuk menggunakan fase gerak di mana rasio pelarut kutub tidak melebihi 5%. Pelarut kutub termasuk DMSO, DMF, THF, teh dll.
Pemuatan sampel padat adalah teknik yang berguna untuk memuat sampel yang akan dimurnikan ke kolom, terutama untuk sampel kelolabitas rendah. Dalam hal ini, Ilok Flash Cartridge adalah pilihan yang sangat cocok.
Secara umum, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai dan diadsorpsi ke adsorbant padat yang bisa sama seperti yang digunakan dalam kolom flash, termasuk tanah diatom atau silika atau bahan lainnya. Setelah penghapusan / penguapan pelarut residual, adsorben diletakkan di atas kolom yang sebagian diisi atau ke dalam kartrid pemuatan padat kosong. Untuk informasi lebih rinci, silakan merujuk ke Panduan Pengguna Dokumen Ilok-Sl Cartridge untuk lebih jelasnya.
Volume kolom kira -kira sama dengan volume mati (VM) ketika mengabaikan volume tambahan dalam tubing yang menghubungkan kolom dengan injektor dan detektor.
Waktu Mati (TM) adalah waktu yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak diperoleh.
Volume Mati (VM) adalah volume fase gerak yang diperlukan untuk elusi komponen yang tidak dikelola. Volume mati dapat dihitung dengan persamaan berikut: VM = F0*TM.
Di antara persamaan di atas, F0 adalah laju aliran fase gerak.
Tidak, silika yang ditutup akhir tidak larut dalam pelarut organik yang umum digunakan.
Kolom silika flash adalah sekali pakai dan untuk penggunaan tunggal, tetapi dengan penanganan yang tepat, kartrid silika dapat digunakan kembali tanpa mengorbankan kinerja. Untuk digunakan kembali, kolom silika flash perlu dikeringkan dengan udara terkompresi atau disiram dan disimpan dalam isopropanol.
Penyimpanan yang tepat akan memungkinkan kolom Flash C18 untuk digunakan kembali:
• Jangan pernah membiarkan kolom mengering setelah digunakan.
• Lepaskan semua pengubah organik dengan menyiram kolom dengan 80% metanol atau asetonitril dalam air untuk 3 - 5 CV.
• Simpan kolom di pelarut flushing yang disebutkan di atas dengan fitting ujung di tempatnya.
Untuk kolom ukuran besar di atas 220g, efek termal jelas dalam proses pra-kesetimbangan. Dianjurkan untuk mengatur laju aliran pada 50-60% dari laju aliran yang disarankan dalam proses pra-kesetimbangan untuk menghindari efek termal yang jelas.
Efek termal pelarut campuran lebih jelas daripada pelarut tunggal. Ambil sistem pelarut sikloheksana/etil asetat sebagai contoh, disarankan agar menggunakan 100% sikloheksana dalam proses pra-kesetimbangan. Ketika pra-keseimbangan selesai, percobaan pemisahan dapat dilakukan sesuai dengan sistem pelarut yang telah ditentukan.
Untuk SepaflashTMKolom seri standar, konektor yang digunakan adalah luer-lock in dan luer-slip out. Kolom -kolom ini dapat dipasang langsung pada sistem CombiFlash Isco.
Untuk seri hp Sepaflash, seri ikatan atau kolom seri Iloktm, konektor yang digunakan adalah luer-lock in dan luer-lock out. Kolom -kolom ini juga dapat dipasang pada sistem CombiFlash ISCO melalui adaptor tambahan. Untuk detail adaptor ini, silakan merujuk ke dokumen Santai Adapter Kit untuk 800g, 1600g, kolom 3kg flash.
Volume kolom parameter (CV) sangat berguna untuk menentukan faktor skala-up. Beberapa ahli kimia berpikir volume internal kartrid (atau kolom) tanpa bahan pengemasan di dalamnya adalah volume kolom. Namun, volume kolom kosong bukan CV. CV kolom atau kartrid apa pun adalah volume ruang yang tidak ditempati oleh material yang telah dikemas dalam kolom. Volume ini mencakup volume interstitial (volume ruang di luar partikel yang dikemas) dan porositas internal partikel itu sendiri (volume pori).
Kolom flash alumina adalah opsi alternatif ketika sampel sensitif dan rentan terhadap degradasi pada gel silika.
Tekanan belakang kolom flash terkait dengan ukuran partikel bahan yang dikemas. Bahan yang dikemas dengan ukuran partikel yang lebih kecil akan menghasilkan tekanan punggung yang lebih tinggi untuk kolom flash. Oleh karena itu laju aliran fase gerak yang digunakan dalam kromatografi flash harus diturunkan sesuai untuk mencegah sistem flash berhenti bekerja.
Tekanan belakang kolom flash juga sebanding dengan panjang kolom. Badan kolom yang lebih panjang akan menghasilkan tekanan punggung yang lebih tinggi untuk kolom flash. Selain itu, tekanan belakang kolom flash berbanding terbalik dengan ID (diameter internal) dari bodi kolom. Akhirnya, tekanan belakang kolom flash sebanding dengan viskositas fase gerak yang digunakan dalam kromatografi flash.