इंस्ट्रूमेंट पर पावर और इसके प्रॉम्प्ट के लिए प्रतीक्षा करें "रीडबारे सिलिका पीएच 9 के जलीय घोल में घुलना शुरू कर देगा, यद्यपि बहुत धीरे-धीरे। 9 से कम पीएच के साथ विलायक में नंगे सिलिका स्थिर होती है। यदि विलायक का पीएच 9 से अधिक हो जाता है, तो विघटन में गति बढ़ेगी। सुनिश्चित करें कि iPad नेटवर्क कनेक्शन सही है, और राउटर पर संचालित है।
C18 फ्लैश कॉलम के साथ इष्टतम शुद्धि के लिए, कृपया इन चरणों का पालन करें:
① 10 - 20 सीवीएस (कॉलम वॉल्यूम) के लिए मजबूत (कार्बनिक) विलायक के 100% के साथ कॉलम को फ्लश करें, आमतौर पर मेथनॉल या एसिटोनिट्राइल।
② एक और 3 - 5 सीवीएस के लिए 50% मजबूत + 50% जलीय (यदि एडिटिव्स की आवश्यकता है, तो उन्हें शामिल करें) के साथ कॉलम को फ्लश करें।
③ 3 - 5 cvs के लिए प्रारंभिक ढाल स्थितियों के साथ कॉलम को फ्लश करें।
4 जी और 330 ग्राम के बीच स्तंभ आकार के लिए, इन फ्लैश कॉलम में मानक ल्यूर कनेक्टर का उपयोग किया जाता है। 800g, 1600g और 3000g के कॉलम आकार के लिए, अतिरिक्त कनेक्टर एडेप्टर का उपयोग फ्लैश क्रोमैटोग्राफी सिस्टम पर इन बड़े फ्लैश कॉलम को माउंट करने के लिए किया जाना चाहिए। कृपया अधिक जानकारी के लिए 800G, 1600G, 3KG फ्लैश कॉलम के लिए दस्तावेज़ Santai एडाप्टर किट देखें।
सामान्य चरण कॉलम के लिए, मोबाइल चरण का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है जहां मेथनॉल का अनुपात 25%से अधिक नहीं होता है।
आम तौर पर, यह मोबाइल चरण का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है जहां ध्रुवीय सॉल्वैंट्स का अनुपात 5%से अधिक नहीं होता है। ध्रुवीय सॉल्वैंट्स में DMSO, DMF, THF, चाय आदि शामिल हैं।
ठोस नमूना लोडिंग एक कॉलम पर शुद्ध किए जाने वाले नमूने को लोड करने के लिए एक उपयोगी तकनीक है, विशेष रूप से कम-घुलनशीलता के नमूनों के लिए। इस मामले में, इलोक फ्लैश कारतूस एक बहुत उपयुक्त विकल्प है।
आम तौर पर, नमूना एक उपयुक्त विलायक में भंग कर दिया जाता है और एक ठोस adsorbant पर adsorbed होता है जो कि फ्लैश कॉलम में उपयोग किया जा सकता है, जिसमें डायटोमेसियस पृथ्वी या सिलिका या अन्य सामग्री शामिल हैं। अवशिष्ट विलायक को हटाने / वाष्पीकरण के बाद, adsorbent को आंशिक रूप से भरे हुए कॉलम के ऊपर या एक खाली ठोस लोडिंग कारतूस में रखा जाता है। अधिक विस्तृत जानकारी के लिए, कृपया अधिक जानकारी के लिए दस्तावेज़ ILOK-SL कारतूस उपयोगकर्ता गाइड देखें।
कॉलम वॉल्यूम डेड वॉल्यूम (वीएम) के लगभग बराबर होता है, जब ट्यूबिंग में अतिरिक्त मात्रा को इंजेक्टर और डिटेक्टर से जोड़ने वाले ट्यूबिंग में अतिरिक्त मात्रा को अनदेखा किया जाता है।
डेड टाइम (टीएम) एक अनियंत्रित घटक के क्षरण के लिए आवश्यक समय है।
डेड वॉल्यूम (वीएम) एक अनियंत्रित घटक के क्षालन के लिए आवश्यक मोबाइल चरण की मात्रा है। डेड वॉल्यूम की गणना निम्न समीकरण द्वारा की जा सकती है: VM = F0*TM।
उपरोक्त समीकरण में, F0 मोबाइल चरण की प्रवाह दर है।
नहीं, एंड-कैप्ड सिलिका किसी भी आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले कार्बनिक विलायक में अघुलनशील है।
सिलिका फ्लैश कॉलम डिस्पोजेबल हैं और एकल उपयोग के लिए, लेकिन उचित हैंडलिंग के साथ, सिलिका कारतूस को प्रदर्शन का त्याग किए बिना पुन: उपयोग किया जा सकता है। पुन: उपयोग करने के लिए, सिलिका फ्लैश कॉलम को बस संपीड़ित हवा द्वारा सूखने या आइसोप्रोपैनॉल में संग्रहीत करने की आवश्यकता होती है।
उचित भंडारण C18 फ्लैश कॉलम का पुन: उपयोग करने की अनुमति देगा:
• उपयोग करने के बाद कभी भी कॉलम को सूखने न दें।
• 3 - 5 सीवीएस के लिए पानी में 80% मेथनॉल या एसिटोनिट्राइल के साथ कॉलम को फ्लश करके सभी कार्बनिक संशोधक को हटा दें।
• ऊपर दिए गए फ्लशिंग विलायक में कॉलम को अंतिम फिटिंग के साथ स्टोर करें।
220g से ऊपर के बड़े आकार के स्तंभों के लिए, पूर्व-संतुलन की प्रक्रिया में थर्मल प्रभाव स्पष्ट है। स्पष्ट थर्मल प्रभाव से बचने के लिए पूर्व-संतुलन प्रक्रिया में सुझाए गए प्रवाह दर के 50-60% पर प्रवाह दर निर्धारित करने की सिफारिश की जाती है।
मिश्रित विलायक का थर्मल प्रभाव एकल विलायक की तुलना में अधिक स्पष्ट है। एक उदाहरण के रूप में विलायक प्रणाली साइक्लोहेक्सेन/एथिल एसीटेट लें, यह सुझाव दिया जाता है कि पूर्व-संतुलन प्रक्रिया में 100% साइक्लोहेक्सेन का उपयोग करें। जब पूर्व-संतुलन पूरा हो जाता है, तो पृथक्करण प्रयोग पूर्व निर्धारित विलायक प्रणाली के अनुसार किया जा सकता है।
सेपफ्लैश के लिएTMमानक श्रृंखला कॉलम, उपयोग किए गए कनेक्टर्स ल्यूर-लॉक इन और लुयर-स्लिप आउट हैं। इन कॉलमों को सीधे इस्को के कॉम्बिफ़्लैश सिस्टम पर लगाया जा सकता है।
Sepaflash HP श्रृंखला, बंधुआ श्रृंखला या ILOKTM श्रृंखला कॉलम के लिए, उपयोग किए गए कनेक्टर्स ल्यूर-लॉक इन और लुयर-लॉक आउट हैं। इन कॉलम को अतिरिक्त एडेप्टर के माध्यम से ISCO के कॉम्बिफ़्लैश सिस्टम पर भी रखा जा सकता है। इन एडेप्टर के विवरण के लिए, कृपया 800G, 1600G, 3KG फ्लैश कॉलम के लिए दस्तावेज़ Santai एडाप्टर किट देखें।
पैरामीटर कॉलम वॉल्यूम (CV) स्केल-अप कारकों को निर्धारित करने के लिए विशेष रूप से उपयोगी है। कुछ रसायनज्ञों को लगता है कि अंदर पैकिंग सामग्री के बिना कारतूस (या कॉलम) की आंतरिक मात्रा स्तंभ की मात्रा है। हालांकि, एक खाली कॉलम की मात्रा सीवी नहीं है। किसी भी कॉलम या कारतूस का सीवी एक कॉलम में पूर्व-पैक की गई सामग्री द्वारा कब्जा नहीं किए गए स्थान की मात्रा है। इस मात्रा में इंटरस्टीशियल वॉल्यूम (पैक किए गए कणों के बाहर अंतरिक्ष की मात्रा) और कण की अपनी आंतरिक पोरसिटी (छिद्र मात्रा) दोनों शामिल हैं।
एल्यूमिना फ्लैश कॉलम एक वैकल्पिक विकल्प है जब नमूने संवेदनशील होते हैं और सिलिका जेल पर गिरावट की संभावना होती है।
फ्लैश कॉलम का पीछे का दबाव पैक्ड सामग्री के कण आकार से संबंधित है। छोटे कण आकार के साथ पैक की गई सामग्री के परिणामस्वरूप फ्लैश कॉलम के लिए उच्च बैक दबाव होगा। इसलिए फ्लैश क्रोमैटोग्राफी में उपयोग किए जाने वाले मोबाइल चरण की प्रवाह दर को तदनुसार कम किया जाना चाहिए ताकि फ्लैश सिस्टम को स्टॉप वर्किंग से रोका जा सके।
फ्लैश कॉलम का पिछला दबाव भी स्तंभ की लंबाई के लिए आनुपातिक है। लंबे कॉलम बॉडी के परिणामस्वरूप फ्लैश कॉलम के लिए उच्च बैक प्रेशर होगा। इसके अलावा, फ्लैश कॉलम का पिछला दबाव स्तंभ शरीर की आईडी (आंतरिक व्यास) के विपरीत आनुपातिक है। अंत में, फ्लैश कॉलम का पिछला दबाव फ्लैश क्रोमैटोग्राफी में उपयोग किए जाने वाले मोबाइल चरण की चिपचिपाहट के लिए आनुपातिक है।