A potencia no instrumento e agarda o seu aviso "a sílice de lectura comezará a disolverse nunha solución acuosa de pH 9, aínda que moi lentamente. No disolvente con pH inferior a 9 a sílice espida é estable. Se o pH do disolvente excede 9, a disolución acelera a medida que o pH aumenta. final cuberto.y ". Asegúrese de que a conexión da rede iPad é correcta e que o enrutador estea activado.
Para obter unha purificación óptima con columnas flash C18, siga estes pasos:
① Leva a columna cun 100% do disolvente forte (orgánico) para 10 - 20 cvs (volume de columna), normalmente metanol ou acetonitrilo.
② Engade a columna cun 50% forte + 50% acuoso (se os aditivos son necesarios, inclúelos) para outros 3 - 5 CV.
③ Engade a columna coas condicións iniciais de gradiente para 3 - 5 CVS.
Para o tamaño da columna entre 4G e 330G, úsase conector Luer estándar nestas columnas Flash. Para o tamaño da columna de 800g, 1600g e 3000g, os adaptadores de conectores adicionais deberían usarse para montar estas grandes columnas de flash no sistema de cromatografía flash. Consulte o kit de adaptadores de documento Santai para columnas flash de 800g, 1600g, 3kg para máis detalles.
Para a columna de fase normal, recoméndase usar a fase móbil onde a relación de metanol non supera o 25%.
Xeralmente, recoméndase usar a fase móbil onde a relación dos disolventes polares non supera o 5%. Os disolventes polares inclúen DMSO, DMF, THF, TEA, etc.
A carga de mostras sólidas é unha técnica útil para cargar a mostra para ser purificada nunha columna, especialmente para mostras de baixa solubilidade. Neste caso, o cartucho de flash Ilok é unha elección moi adecuada.
Xeralmente, a mostra disólvese nun disolvente adecuado e adsorbido sobre un adsorbante sólido que podería ser o mesmo que se usa nas columnas flash, incluíndo terras diatomáceas ou sílice ou outros materiais. Despois da eliminación / evaporación do disolvente residual, o adsorbente ponse encima dunha columna parcialmente cuberta ou nun cartucho de carga sólido baleiro. Para obter información máis detallada, consulte o documento Guía de usuario de cartucho ILOK-SL para obter máis detalles.
O volume de columna é aproximadamente igual ao volume morto (VM) ao ignorar o volume adicional nos tubos que conectan a columna co inyector e o detector.
O tempo morto (TM) é o tempo necesario para a elución dun compoñente non alcanzado.
O volume morto (VM) é o volume da fase móbil requirida para a elución dun compoñente non conectado. O volume morto pódese calcular coa seguinte ecuación: vm = f0*tm.
Entre a ecuación anterior, F0 está o caudal da fase móbil.
Non, a sílice final con punta é insoluble en calquera disolvente orgánico de uso común.
As columnas de flash de sílice son desbotables e para uso único, pero cun manexo adecuado, os cartuchos de sílice pódense reutilizar sen sacrificar o rendemento. Na orde de reutilización, a columna de flash de sílice debe secarse simplemente por aire comprimido ou lavado e almacenado en isopropanol.
O almacenamento adecuado permitirá que se reutilizen as columnas de flash C18:
• Nunca permita que a columna se seque despois de usar.
• Elimine todos os modificadores orgánicos lavando a columna con 80% metanol ou acetonitrilo en auga para 3 - 5 CV.
• Almacene a columna no disolvente de lavado anteriormente mencionado con accesorios finais no seu lugar.
Para as columnas de gran tamaño superiores a 220g, o efecto térmico é obvio no proceso de pre-equilibrio. Recoméndase establecer o caudal no 50-60% do caudal suxerido no proceso de pre-equilibrio para evitar un efecto térmico evidente.
O efecto térmico do disolvente mixto é máis obvio que o disolvente único. Tome o sistema disolvente ciclohexano/acetato de etilo como exemplo, suxírese que use 100% ciclohexano no proceso de pre-equilibrio. Cando se complete o pre-equilibrio, o experimento de separación podería realizarse segundo o sistema de disolventes preestablecido.
Para sepaflashTMColumnas de serie estándar, os conectores empregados son Luer-Lock In e Luer-Slip Out. Estas columnas poderían montarse directamente nos sistemas de combiflash de Isco.
Para a serie Sepaflash HP, as columnas de serie Beilled ou ILOKTM, os conectores empregados son Luer-Lock In e Luer-Lock. Estas columnas tamén se poderían montar nos sistemas de combiflash de Isco a través de adaptadores adicionais. Para obter máis detalles destes adaptadores, consulte o kit de adaptador de documento Santai para columnas flash de 800g, 1600g, 3kg.
O volume de columna de parámetros (CV) é especialmente útil para determinar factores de escala. Algúns químicos pensan que o volume interno do cartucho (ou columna) sen embalaxe material dentro é o volume de columna. Non obstante, o volume dunha columna baleira non é o CV. O CV de calquera columna ou cartucho é o volume do espazo non ocupado polo material pre-embalado nunha columna. Este volume inclúe tanto o volume intersticial (o volume do espazo fóra das partículas embaladas) como a propia porosidade interna da partícula (volume de poros).
As columnas de flash de alúmina son unha opción alternativa cando as mostras son sensibles e propensas á degradación do xel de sílice.
A presión traseira da columna flash está relacionada co tamaño de partícula do material embalado. O material embalado cun tamaño de partícula menor producirá unha presión traseira maior para a columna Flash. Polo tanto, o caudal da fase móbil empregada na cromatografía flash debe baixarse en consecuencia para evitar que o sistema flash deixe de funcionar.
A presión traseira da columna flash tamén é proporcional á lonxitude da columna. O corpo de columna máis longo producirá unha presión traseira maior para a columna Flash. Ademais, a presión traseira da columna flash é inversamente proporcional ao ID (diámetro interno) do corpo da columna. Finalmente, a presión traseira da columna Flash é proporcional á viscosidade da fase móbil empregada na cromatografía flash.