قدرت روی ساز و منتظر سریع آن "سیلیس Readbare شروع به حل شدن در محلول آبی pH 9 خواهد شد ، البته بسیار آهسته. اطمینان حاصل کنید که اتصال شبکه iPad صحیح است و روتر روشن است.
برای تصفیه بهینه با ستون های فلش C18 ، لطفاً این مراحل را دنبال کنید:
coll ستون را با 100 ٪ از حلال قوی (آلی) برای 10 - 20 CV (حجم ستون) ، به طور معمول متانول یا استونیتریل شستشو دهید.
coll ستون را با 50 ٪ قوی + 50 ٪ آبی (در صورت نیاز به مواد افزودنی ، آنها را درج کنید) برای 3 - 5 CV دیگر شستشو دهید.
color ستون را با شرایط شیب اولیه برای 3 - 5 CVS شستشو دهید.
برای اندازه ستون بین 4G و 330G ، از کانکتور استاندارد Luer در این ستون های فلش استفاده می شود. برای اندازه ستون 800 گرم ، 1600 گرم و 3000 گرم ، باید از آداپتورهای کانکتور اضافی برای نصب این ستون های بزرگ فلش بر روی سیستم کروماتوگرافی فلش استفاده شود. لطفاً برای اطلاعات بیشتر به کیت آداپتور Santai برای 800 گرم ، 1600 گرم ، ستون های فلش 3 کیلوگرم مراجعه کنید.
برای ستون فاز عادی ، توصیه می شود از فاز تلفن همراه استفاده کنید که نسبت متانول از 25 ٪ تجاوز نکند.
به طور کلی ، توصیه می شود از فاز موبایل استفاده کنید که نسبت حلال های قطبی از 5 ٪ تجاوز نمی کند. حلال های قطبی شامل DMSO ، DMF ، THF ، چای و غیره است.
بارگذاری نمونه جامد یک روش مفید برای بارگذاری نمونه است که باید بر روی یک ستون خالص شود ، به خصوص برای نمونه های کم تحرک. در این حالت ، کارتریج فلش ایلوک یک انتخاب بسیار مناسب است.
به طور کلی ، نمونه در یک حلال مناسب حل می شود و بر روی یک جاذب جامد جذب می شود که می تواند همان است که در ستون های فلش استفاده می شود ، از جمله زمین های دیاتوما یا سیلیس یا سایر مواد. پس از حذف / تبخیر حلال باقیمانده ، جاذب در بالای یک ستون تا حدی پر شده یا در یک کارتریج بارگیری جامد خالی قرار می گیرد. برای کسب اطلاعات بیشتر ، لطفاً برای اطلاعات بیشتر به راهنمای کاربر کارتریج ILOK-SL مراجعه کنید.
حجم ستون تقریباً برابر با حجم مرده (VM) هنگام نادیده گرفتن حجم اضافی در لوله های اتصال ستون با انژکتور و ردیاب است.
زمان مرده (TM) زمان لازم برای شستشوی یک مؤلفه غیرقانونی است.
حجم مرده (VM) حجم فاز موبایل مورد نیاز برای شستشوی یک مؤلفه غیرقانونی است. حجم مرده را می توان با معادله زیر محاسبه کرد: VM = F0*TM.
در میان معادله فوق ، F0 سرعت جریان فاز موبایل است.
خیر ، سیلیس پوشیده از پوشش در هر حلال آلی که معمولاً استفاده می شود ، نامحلول است.
ستون های فلش سیلیس یکبار مصرف و برای استفاده مجرد هستند ، اما با استفاده از کار مناسب ، کارتریج های سیلیس بدون قربانی کردن عملکرد قابل استفاده مجدد هستند. برای استفاده مجدد ، ستون فلش سیلیس باید به سادگی توسط هوای فشرده شده خشک شود یا با آن شستشو داده شود و در ایزوپپانول ذخیره شود.
ذخیره مناسب به ستون های فلش C18 امکان استفاده مجدد می شود:
• هرگز اجازه ندهید که ستون بعد از استفاده خشک شود.
• تمام اصلاح کننده های آلی را با شستشوی ستون با 80 ٪ متانول یا استونیتریل در آب به مدت 3 - 5 CV حذف کنید.
• ستون را در حلال گرگرفتگی فوق با اتصالات انتهایی در محل ذخیره کنید.
برای ستونهای با اندازه بزرگ بالاتر از 220 گرم ، اثر حرارتی در فرآیند قبل از تعادل آشکار است. توصیه می شود سرعت جریان را در 50-60 ٪ از سرعت جریان پیشنهادی در فرآیند قبل از تعادل تنظیم کنید تا از اثر حرارتی آشکار جلوگیری شود.
اثر حرارتی حلال مخلوط آشکارتر از حلال تک است. به عنوان نمونه از سیستم حلال سیکلوهگزان/اتیل استات استفاده کنید ، پیشنهاد می شود که از 100 ٪ سیکلوهگزان در فرآیند قبل از تعادل استفاده کنید. پس از اتمام قبل از تعادل ، آزمایش جداسازی می تواند مطابق با سیستم حلال از پیش تعیین شده انجام شود.
برای SepaflashTMستون های سری استاندارد ، اتصالات مورد استفاده Luer-Lock In و Luer-Slip Out هستند. این ستون ها می توانند مستقیماً روی سیستم های Combiflash ISCO نصب شوند.
برای سری HP Sepaflash ، سری Bonded Series یا سری ILOKTM ، اتصالات مورد استفاده Luer-Lock In و Luer-Lock Out هستند. این ستون ها همچنین می توانند از طریق آداپتورهای اضافی بر روی سیستم های Combiflash ISCO نصب شوند. برای جزئیات این آداپتورها ، لطفاً به ستون های فلاش 800 گرم ، 1600 گرم ، 3 کیلوگرم به کیت آداپتور Santai مراجعه کنید.
حجم ستون پارامتر (CV) به ویژه برای تعیین عوامل مقیاس مفید است. برخی از شیمیدانان فکر می کنند حجم داخلی کارتریج (یا ستون) بدون بسته بندی مواد در داخل حجم ستون است. با این حال ، حجم یک ستون خالی CV نیست. CV از هر ستون یا کارتریج حجم فضایی است که توسط مواد از قبل بسته بندی شده در یک ستون اشغال نشده است. این جلد شامل هر دو حجم بینابینی (حجم فضای خارج از ذرات بسته بندی شده) و تخلخل داخلی خود ذرات (حجم منافذ) است.
ستون های فلش آلومینا یک گزینه جایگزین است که نمونه ها حساس و مستعد تخریب در ژل سیلیس هستند.
فشار پشت ستون فلش به اندازه ذرات مواد بسته بندی شده مربوط می شود. مواد بسته بندی شده با اندازه ذرات کوچکتر منجر به فشار بیشتر کمر برای ستون فلش می شوند. بنابراین سرعت جریان فاز متحرک مورد استفاده در کروماتوگرافی فلش باید بر این اساس کاهش یابد تا از کار متوقف کردن سیستم فلش جلوگیری شود.
فشار پشت ستون فلش نیز متناسب با طول ستون است. بدنه ستون طولانی تر منجر به فشار بیشتر کمر برای ستون فلش خواهد شد. علاوه بر این ، فشار پشت ستون فلش به طور معکوس با شناسه (قطر داخلی) بدنه ستون متناسب است. سرانجام ، فشار پشت ستون فلش متناسب با ویسکوزیته فاز متحرک مورد استفاده در کروماتوگرافی فلش است.