Η ισχύς στο όργανο και η αναμονή για την προτροπή του "readbare silica θα αρχίσει να διαλύεται σε υδατικό διάλυμα ρΗ 9, αν και πολύ αργά, στο διαλύτη με το pH χαμηλότερο από το 9 το γυμνό πυριτικό είναι σταθερό. Βεβαιωθείτε ότι η σύνδεση δικτύου iPad είναι σωστή και ο δρομολογητής είναι ενεργοποιημένος.
Για βέλτιστο καθαρισμό με στήλες Flash C18, ακολουθήστε αυτά τα βήματα:
① Ξεπλύνετε τη στήλη με 100% του ισχυρού (οργανικού) διαλύτη για 10 - 20 CVs (όγκος στήλης), τυπικά μεθανόλη ή ακετονιτρίλιο.
② Ξεπλύνετε τη στήλη με 50% ισχυρό + 50% υδατικό (εάν απαιτούνται πρόσθετα, συμπεριλάβετε αυτά) για άλλα 3 - 5 CVS.
③ Ξεπλύνετε τη στήλη με τις αρχικές συνθήκες κλίσης για 3 - 5 CVS.
Για το μέγεθος της στήλης μεταξύ 4G και 330G, σε αυτές τις στήλες Flash χρησιμοποιείται τυποποιημένη σύνδεση Luer. Για το μέγεθος της στήλης των 800G, 1600G και 3000G, θα πρέπει να χρησιμοποιούνται πρόσθετοι προσαρμογείς συνδετήρων για την τοποθέτηση αυτών των μεγάλων κολώνων φλας στο σύστημα χρωματογραφίας φλας. Ανατρέξτε στο κιτ προσαρμογέα Santai Document για τις στήλες Flash 800g, 1600g, 3kg flash για περισσότερες λεπτομέρειες.
Για την κανονική στήλη φάσης, συνιστάται η χρήση της κινητής φάσης όπου η αναλογία μεθανόλης δεν υπερβαίνει το 25%.
Γενικά, συνιστάται η χρήση της κινητής φάσης όπου ο λόγος των πολικών διαλυτών δεν υπερβαίνει το 5%. Οι πολικοί διαλύτες περιλαμβάνουν DMSO, DMF, THF, τσάι κ.λπ.
Η συμπαγής φόρτωση δείγματος είναι μια χρήσιμη τεχνική για τη φόρτωση του δείγματος που πρόκειται να καθαριστεί σε μια στήλη, ειδικά για δείγματα χαμηλής διαλυτότητας. Σε αυτή την περίπτωση, το Cartridge Flash Ilok είναι μια πολύ κατάλληλη επιλογή.
Γενικά, το δείγμα διαλύεται σε κατάλληλο διαλύτη και προσροφάται σε ένα στερεό προσροφητικό που θα μπορούσε να είναι το ίδιο όπως χρησιμοποιείται στις στήλες flash, συμπεριλαμβανομένων των διατομών γαιών ή διοξειδίου του πυριτίου ή άλλων υλικών. Μετά την αφαίρεση / εξάτμιση του υπολειπόμενου διαλύτη, ο προσροφητικός τοποθετείται στην κορυφή μιας μερικώς γεμάτης στήλης ή σε ένα κενό φυσίγγιο στερεάς φόρτωσης. Για πιο λεπτομερείς πληροφορίες, ανατρέξτε στον Οδηγό χρήσης του εγγράφου ILOK-SL Cartridge για περισσότερες λεπτομέρειες.
Ο όγκος της στήλης είναι περίπου ίσος με τον νεκρό όγκο (VM) όταν αγνοεί τον πρόσθετο όγκο στις σωληνώσεις που συνδέουν τη στήλη με τον εγχυτήρα και τον ανιχνευτή.
Ο νεκρός χρόνος (TM) είναι ο χρόνος που απαιτείται για την έκλουση ενός μη κρατούμενου στοιχείου.
Ο νεκρός όγκος (VM) είναι ο όγκος της κινητής φάσης που απαιτείται για την έκλουση ενός μη κρατούμενου στοιχείου. Ο νεκρός όγκος μπορεί να υπολογιστεί με την ακόλουθη εξίσωση: VM = F0*TM.
Μεταξύ της παραπάνω εξίσωσης, το F0 είναι ο ρυθμός ροής της κινητής φάσης.
Όχι, το τελικό κάλυμμα του πυριτίου είναι αδιάλυτο σε οποιοδήποτε συνήθως χρησιμοποιούμενο οργανικό διαλύτη.
Οι στήλες Flash του πυριτίου είναι διαθέσιμες και για ενιαία χρήση, αλλά με τον σωστό χειρισμό, τα φυσίγγια πυριτίας μπορούν να επαναχρησιμοποιηθούν χωρίς να θυσιάζουν την απόδοση.
Η σωστή αποθήκευση θα επιτρέψει την επαναχρησιμοποίηση στις στήλες Flash C18:
• Ποτέ μην επιτρέπετε στη στήλη να στεγνώσει μετά τη χρήση.
• Αφαιρέστε όλους τους οργανικούς τροποποιητές με έκπλυση της στήλης με 80% μεθανόλη ή ακετονιτρίλιο σε νερό για 3 - 5 CVs.
• Αποθηκεύστε τη στήλη στον προαναφερθέντα διαλύτη Flushing με ακραία εξαρτήματα στη θέση του.
Για τις στήλες μεγάλου μεγέθους άνω των 220g, το θερμικό αποτέλεσμα είναι προφανές στη διαδικασία προ-ισορροπίας. Συνιστάται να ρυθμίσετε τον ρυθμό ροής στο 50-60% του προτεινόμενου ρυθμού ροής στη διαδικασία προ-ισορροπίας για να αποφευχθεί η προφανής θερμική επίδραση.
Η θερμική επίδραση του μικτού διαλύτη είναι πιο προφανής από τον μεμονωμένο διαλύτη. Πάρτε το σύστημα διαλύτη κυκλοεξάνης/οξικού αιθυλεστέρα ως παράδειγμα, προτείνεται να χρησιμοποιήσετε 100% κυκλοεξάνιο στη διαδικασία προ-ισορροπίας. Όταν ολοκληρωθεί η προ-ισορροπία, το πείραμα διαχωρισμού θα μπορούσε να εκτελεστεί σύμφωνα με το προκαθορισμένο σύστημα διαλύτη.
Για sepaflashTMΣΤΟΙΧΕΙΑ ΣΤΟΙΧΕΙΑ ΣΕΙΡΑ, οι συνδετήρες που χρησιμοποιούνται είναι το Luer-Lock in και το Luer-Slip Out. Αυτές οι στήλες θα μπορούσαν να τοποθετηθούν απευθείας στα συστήματα συνδυασμού της ISCO.
Για τη σειρά SepaFlash HP, τις σειρές σειράς ή τις σειρές ILOKTM, οι συνδετήρες που χρησιμοποιούνται είναι Luer-Lock In και Luer-Lock Out. Αυτές οι στήλες θα μπορούσαν επίσης να τοποθετηθούν στα συστήματα Combiflash της ISCO μέσω επιπλέον προσαρμογέων. Για τις λεπτομέρειες αυτών των προσαρμογέων, ανατρέξτε στο κιτ προσαρμογέα Santai Document για 800g, 1600g, 3kg φλας.
Ο όγκος της στήλης παραμέτρων (CV) είναι ιδιαίτερα χρήσιμος για τον προσδιορισμό των παραγόντων κλιμάκωσης. Μερικοί χημικοί πιστεύουν ότι ο εσωτερικός όγκος της κασέτας (ή της στήλης) χωρίς υλικό συσκευασίας μέσα είναι ο όγκος της στήλης. Ωστόσο, ο όγκος μιας κενής στήλης δεν είναι το βιογραφικό σημείωμα. Το βιογραφικό σημείωμα οποιασδήποτε στήλης ή κασέτας είναι ο όγκος του χώρου που δεν καταλαμβάνεται από το υλικό προ-συσκευασμένο σε μια στήλη. Αυτός ο όγκος περιλαμβάνει τόσο τον διάμεσο όγκο (τον όγκο του χώρου έξω από τα συσκευασμένα σωματίδια) όσο και το εσωτερικό πορώδες του σωματιδίου (όγκος πόρων).
Οι στήλες Flash Alumina είναι μια εναλλακτική επιλογή όταν τα δείγματα είναι ευαίσθητα και επιρρεπή σε αποικοδόμηση σε πηκτή πυριτίου.
Η αντίθλιψη της στήλης Flash σχετίζεται με το μέγεθος των σωματιδίων του συσκευασμένου υλικού. Το συσκευασμένο υλικό με μικρότερο μέγεθος σωματιδίων θα έχει ως αποτέλεσμα υψηλότερη αντίθλιψη για τη στήλη Flash. Επομένως, ο ρυθμός ροής της κινητής φάσης που χρησιμοποιείται στη χρωματογραφία φλας θα πρέπει να μειωθεί ανάλογα προκειμένου να αποφευχθεί η διακοπή λειτουργίας του συστήματος flash.
Η αντίθλιψη της στήλης Flash είναι επίσης ανάλογη προς το μήκος της στήλης. Το μεγαλύτερο σώμα της στήλης θα έχει ως αποτέλεσμα υψηλότερη αντίθλιψη για τη στήλη flash. Επιπλέον, η πλάτη της στήλης Flash είναι αντιστρόφως ανάλογη προς την ταυτότητα (εσωτερική διάμετρος) του σώματος της στήλης. Τέλος, η οπίσθια πίεση της στήλης flash είναι ανάλογη προς το ιξώδες της κινητής φάσης που χρησιμοποιείται στη χρωματογραφία flash.