Napájení na přístroji a čekat na jeho rychlost „Readbare silika se začne rozpouštět ve vodném roztoku pH 9, i když velmi pomalu. V rozpouštědle s pH nižší než 9 je holý oxid křemičitý stabilní. Pokud pH rozpouštědla přesahuje 9, rozpouštění se zrychlí s rostoucím pH. Ujistěte se, že síťové připojení iPadu je správné a router je zapnutý.
Pro optimální čištění pomocí sloupců Flash C18 postupujte podle těchto kroků:
① Vypláchněte sloupec se 100% silného (organického) rozpouštědla pro 10 - 20 CV (objem sloupce), obvykle methanol nebo acetonitril.
② Vypláchněte sloupec s 50% silnou + 50% vodnou (pokud jsou vyžadovány přísady, zahrnujte je) pro další 3 - 5 CV.
③ Vyplňte sloupec s počátečními podmínkami gradientu pro 3 - 5 CV.
Pro velikost sloupce mezi 4G a 330g se v těchto sloupcích blesku používá standardní konektor Luer. Pro velikost sloupce 800 g, 1600 g a 3000 g by se měly použít další adaptéry konektorů k namontování těchto velkých bleskových sloupců na chromatografickém systému Flash. Další podrobnosti naleznete v dokladu Santai Adapter Kit pro 800G, 1600G, 3 kg Flash sloupců.
U normální fázové sloupce se doporučuje použít mobilní fázi, kde poměr methanolu nepřesáhne 25%.
Obecně se doporučuje použít mobilní fázi, kde poměr polárních rozpouštědel nepřesahuje 5%. Polární rozpouštědla zahrnují DMSO, DMF, THF, čaj atd.
Načítání pevného vzorku je užitečnou technikou pro načtení vzorku, který se má čistit na sloupec, zejména pro vzorky nízké rozpustnosti. V tomto případě je Ilok Flash Cartridge velmi vhodná volba.
Obecně je vzorek rozpuštěn ve vhodném rozpouštědle a adsorbován na pevný adsorbant, který by mohl být stejný jako ve sloupcích blesku, včetně diatomaceousů nebo oxidu křemičitého nebo jiných materiálů. Po odstranění / odpaření zbytkového rozpouštědla je adsorbent položen na částečně vyplněný sloupec nebo do prázdné pevné zatížení. Podrobnější informace naleznete v uživatelské příručce pro doklad Ilok-SL Cartridge.
Objem sloupce se při ignorování dalšího objemu v trubicích spojuje sloupec s injektorem a detektorem přibližně mrtvý objem (VM).
Mrtvý čas (TM) je čas potřebný pro eluce nepředstavené složky.
Mrtvý objem (VM) je objem mobilní fáze potřebné pro eluce nepřetržité komponenty. Mrtvý objem lze vypočítat následující rovnicí: VM = F0*TM.
Mezi výše uvedenou rovnici je F0 průtok mobilní fáze.
Ne, oxid křemičitý s koncovým ukončením je nerozpustný v jakémkoli běžně používaném organickém rozpouštědle.
Sloupy o křemičitém blesku jsou jednorázové a pro jedno použití, ale při správném manipulaci mohou být kazety oxidu křemičitého znovu použity bez obětování výkonu. V pořadí, které má být znovu použito, musí být sloupec o křemičitém blesku jednoduše sušen stlačeným vzduchem nebo propláchnutím a uložen v isopropanolu.
Správné úložiště umožní znovu použít sloupce Flash C18:
• Nikdy nedovolte, aby sloupec vyschl po použití.
• Odstraňte všechny organické modifikátory propláchnutím kolony 80% methanolem nebo acetonitrilem ve vodě pro 3 - 5 CV.
• Sloupec uložte do výše uvedeného proplachovacího rozpouštědla s koncovými kováními na místě.
Pro sloupce velké velikosti nad 220 g je tepelný efekt zřejmý v procesu předvzemní rovnováhy. Doporučuje se nastavit průtok na 50–60% navrhovaného průtoku v předrovnávkovém procesu, aby se zabránilo zjevnému tepelnému účinku.
Tepelný účinek smíšeného rozpouštědla je zřetelnější než jednotlivé rozpouštědlo. Vezměte jako příklad cyklohexan/ethylacetát systému rozpouštědly, navrhuje se, že v předrovnávacím procesu použije 100% cyklohexan. Po dokončení pre-ekvilibrace by se separační experiment mohl provést podle přednastaveného systému rozpouštědla.
Pro sepaflashTMSloupce standardních řad, použité konektory jsou Luer-Lock a Luer-Slip Out. Tyto sloupce by mohly být přímo namontovány na systémech kombinovaných systémů ISCO.
Pro série HP Sepaflash, spojených sérií nebo sloupců řady IloktM jsou použité konektory Luer-Lock a Luer-Lock Out. Tyto sloupce by mohly být také namontovány na systémech kombinování ISCO prostřednictvím dalších adaptérů. Podrobnosti o těchto adaptérech naleznete v dokumentu Santai Adapter Kit pro sloupce 800g, 1600G, 3 kg Flash.
Objem sloupce parametru (CV) je zvláště užitečný pro stanovení faktorů zvětšení. Někteří chemici si myslí, že vnitřní objem kazety (nebo sloupce) bez balicího materiálu uvnitř je objem sloupce. Objem prázdného sloupce však není CV. CV jakéhokoli sloupce nebo kazety je objem prostoru neobsazeného materiálem předem nabitým ve sloupci. Tento objem zahrnuje jak intersticiální objem (objem prostoru mimo zabalené částice), tak vlastní vnitřní porozitu částice (objem pórů).
Sloupce Flash Alumina jsou alternativní možností, když jsou vzorky citlivé a náchylné k degradaci silikagelu.
Zpětný tlak sloupce blesku souvisí s velikostí částic baleného materiálu. Zabalený materiál s menší velikostí částic povede k vyššímu tlaku pro sloupec blesku. Proto by měl být průtok mobilní fáze použité v chromatografii Flash snižován, aby se zabránilo tomu, aby systém Flash zastavil.
Zpětný tlak sloupce blesku je také úměrný délce sloupce. Delší tělo sloupce bude mít za následek vyšší zadní tlak pro sloupec blesku. Kromě toho je zadní tlak sloupce blesku nepřímo úměrný ID (vnitřní průměr) těla sloupce. Nakonec je zadní tlak sloupce blesku úměrný viskozitě mobilní fáze použité v chromatografii Flash.