U putere nantu à u strumentu è aspettanu a so pressa "si cuminciarà à dissolve in una sitazione aquosa di più bassa. In u parcu di solenti hè trà 2 è 12 da u clHIGNI HIDROGLIA finta-capped.y ". Assicuratevi chì a cunnessione di a rete iPad hè curretta, è u router hè alimentatu.
Per a purificazione ottima cù colonne flash C18, per piacè seguite sti passi:
① Scorri a colonna cù u 100% di u solvente forte (organicu) per 10 - 20 CVS (voluminu di colonna), tipicamenti metanol o acetonitrile.
② Scorri a colonna cù u 50% forte + 50% AQUESTA (Se Additivi sò richiesti, includenu elli) per altri 3 - 5 cvs.
③ Scorri a colonna cù e cundizioni di gradiente iniziale per 3 - 5 cvs.
Per a taglia di a colonna trà 4G è 330g, Connettore LOER standard hè adupratu in queste colonne flash. Per a dimensione di a Column, 1600g è 3000g, adattatori addiziunali duverà esse usatu per muntà queste grande colonne flash in u sistema di cromatografia flash. Per piacè riferite à u Kit di Adapter di u Documentu per 800g, 1600G, 3kg flash colonne per più dettagli.
Per a colonna fase normale, hè cunsigliatu di aduprà a fasa mobile induve u rapportu di metanol ùn supera u 25%.
In generale, hè cunsigliatu d'utilizà a fasa mobile induve u ratio di i solventi polari ùn trapassa u 5%. I solventi polari includenu DMSo, DMF, thf, tè etc.
A carica di mostra solida hè una tecnica utile per carricà a mostra per esse purificata nantu à una colonna, in particulare per mostri di solubilitaria bassa. In questu casu, ILOK flash cartuccia hè una scelta assai adatta.
In generale, u campeghju hè dissolta in un solvente adattu è adsorbitu un addrembante solidu chì puderia esse u stessu chì usatu in e terri di flash, cumpresi a terra diatomaces o altri materiali. Dopu a rimessa / l'evaporazione di u solvente residuale, l'adsorbente hè messu in cima di una colonna parzialmente piena o in un cartulare di cartulare Solidu viotu. Per infurmazione più detallata, fate riferimentu à u documentu ILOK-sl cartridge slutted per più dettagli.
U voluminu di colonna hè apprussimatamente uguali à u voluminu mortu (VM) quandu ignora u voluminu supplementu in i tubi chì cunnessione a colonna cù l'injector è u detettore.
Maid Time (tm) hè u tempu necessariu per l'eluzione di un cumpunente micca strettu.
U voluminu mortu (vm) hè u voluminu di a fasa mobile necessaria per l'eluzione di un cumpunente micca strettu. U voluminu mortu pò esse calculatu da l'equazione seguente: VM = F0 * tm.
Frà l'equazione sopra, F0 hè a tarifa di u flussu di a fase mobile.
No, silice in fatica hè insolubile in ogni solvente organicu cumunamente usatu.
A column fiasi di silica sò dispunibuli è per una sola utilizazione, ma cun manipulazione propiu, e cartrizzione di u silica hà da esse riutilizatu, u colonna flash cumpressa è lavata in isopropanol.
U almacenamentu propiu permetterà C18 Colonne Flash per esse riutilizzati:
• Ùn mai lasciate a colonna per asciugà dopu à aduprà.
• Eliminate tutti i modificatori organici chì scorri a colonna cù u 80% metanol o acetonitrile in acqua per 3 - 5 cvs.
• Guardate a colonna in u solvente di flusing sopra citatu cù i raccordi finali in u locu.
Per e grandi colonne di taglia sopra 220g, l'effettu termale hè evidenti in u prucessu di pre-equilibriu. Hè cunsigliatu di stabilisce a tarifa di u flussu à u 50-60% di u tassu di u flussu suggeritu in u prucessu pre-equilibriu per evità l'effettu termale evidenti.
L'effettu termale di u solvente mischju hè più evidente da un solu solvente. Piglia u sistema solvista cyclohexane / acetutu di l'oghjettu di solvellu cum'è esempiu, hè suggeritu chì utilizate 100% cyclohexane in u prucessu di pre-equilibrium. Quandu a pre-equilibrazione hè finita, u sperimentu di a separazione puderia esse realizatu secondu u sistema di solvente preset.
Per a segaflashTMColonne standard di serie, i connettori utilizati sò Luer-Lock in è Luer-Slip Out. Queste colonne puderanu esse direttamente muntati nantu à i sistemi di cumbolash ISCO.
Per serie hp di Sepaflash, serie obligatoriu o i lacroriu, i connettori utilizati sò LOER-Lock in e Luer-Block. Queste colonne anu da esse muntata in i sistemi di cumbolash ISCO per u so adattatori extra. Per i dettagli di questi adattatori, per piacè riferite à u Kit di Adeapter di u Doctu Santa per 800g, 1600g, 3kg flash colonne.
U voluminu di u paràmetru di u paràmetru (CV) hè particularmente utile per determinà fattori di scala. Alcune chimiche pensanu u voluminu internu di u cartuccia (o colonna) senza imballà materiale hè u voluminu di a colonna. Tuttavia, u voluminu di una colonna viota ùn hè micca u CV. U CV di qualsiasi colonna o u cartuccia hè u voluminu di u spaziu micca occupatu da u materiale pre-imballatu in una colonna. Stu voluminu include u voluminu interstituale (u voluminu di u spaziu fora di e particelle imballate) è a pieda interna di a particella (voluminu pore).
E colonne di flash di Alumina sò una opzione alternativa quandu i mostri sò sensibili è propensi à degradazione nantu à u gel di silice.
A pressione di a spalle di a colonna flash hè ligata cù a dimensione di particella di u materiale imballatu. U materiale imballatu cù a taglia più chjuca di particelle hà da resultà in una pressione più alta per a colonna flash. Per quessa, u flussu di u flussu utilizatu in a cromatografia mubili aduprata in a cromatografia di lampu duveria esse abbassatu in modu di prevene u sistema flash da u travagliu.
A pressione di a spalle di a colonna flash hè ancu proporzionale à a durata di a colonna. U corpu di colonna più longu risultatu in una pressione più alta per a colonna flash. Inoltre, a pressione di u spinu di a colonna Flash hè inversamente proporzionale à l'ID (diametru internu) di u corpu di colonna. Infine, a pressione di u fondu di a colonna flash hè proporzionale à a visicità di a fasa mobile usata in Cromatografia di Flash.