La potència de l’instrument i espereu la seva ràpida "La sílice de ReadBare començarà a dissoldre's en solució aquosa de pH 9, encara que molt lentament. En el dissolvent amb pH inferior a 9, la sílice nua és estable. Si el pH del dissolvent supera els 9, la dissolució s'accelerarà a mesura que el pH augmenta. Per a la sílice funcionalitzada funcionalitzada, el rang viable de pH solvent és entre 2 i 12 des dels grups hidroxil. Assegureu -vos que la connexió de xarxa iPad és correcta i que el router estigui encès.
Per obtenir una purificació òptima amb columnes flash C18, seguiu aquests passos:
① Renteu la columna amb el 100% del dissolvent fort (orgànic) per a 10 - 20 cvs (volum de columna), normalment metanol o acetonitril.
② Renteu la columna amb un 50% fort + 50% aquós (si es requereixen additius, incloeu -los) per a altres 3 - 5 cvs.
③ Renteu la columna amb les condicions inicials de gradient per a 3 - 5 cvs.
Per a la mida de la columna entre 4G i 330G, s'utilitza el connector LUER estàndard en aquestes columnes flash. Per a la mida de la columna de 800g, 1600g i 3000G, s’han d’utilitzar adaptadors addicionals del connector per muntar aquestes grans columnes flash al sistema de cromatografia de Flash. Consulteu el document Santai Adapter Kit per a 800G, 1600G, 3 kg de columnes flash per obtenir més detalls.
Per a la columna de fase normal, es recomana utilitzar la fase mòbil on la proporció de metanol no superi el 25%.
Generalment, es recomana utilitzar la fase mòbil on la relació dels dissolvents polars no superi el 5%. Els dissolvents polars inclouen DMSO, DMF, THF, TEA, etc.
La càrrega de mostra sòlida és una tècnica útil per carregar la mostra que es purifica en una columna, particularment per a mostres de baixa solubilitat. En aquest cas, el cartutx Flash Ilok és una elecció molt adequada.
Generalment, la mostra es dissol en un dissolvent adequat i es adsorbeix en un adsorbant sòlid que podria ser el mateix que s’utilitza en columnes flash, incloent terres de diatomaces o sílice o altres materials. Després de l'eliminació / evaporació del dissolvent residual, l'adsorbent es posa a sobre d'una columna parcialment plena o en un cartutx de càrrega sòlida buida. Per obtenir més informació, consulteu el document de l'usuari de l'usuari del cartutx Ilok-SL per obtenir més detalls.
El volum de la columna és aproximadament igual al volum mort (VM) quan ignora el volum addicional a les tubs que connecten la columna amb l’injector i el detector.
El temps mort (TM) és el temps necessari per a l’elució d’un component no fixat.
El volum mort (VM) és el volum de la fase mòbil necessària per a l'elució d'un component no fixat. El volum mort es pot calcular mitjançant l’equació següent: vm = f0*tm.
Entre l’equació anterior, F0 és el cabal de la fase mòbil.
No, la sílice amb captura final és insoluble en qualsevol dissolvent orgànic utilitzat habitualment.
Les columnes de sílice flash són d’un sol ús i per a un ús únic, però amb una manipulació adequada, els cartutxos de sílice es poden reutilitzar sense sacrificar el rendiment. En l’ordre de reutilitzar -se, la columna Flash de sílice s’ha d’assecar simplement per l’aire comprimit o enrotllar -se i emmagatzemar -lo en isopropanol.
L’emmagatzematge adequat permetrà reutilitzar les columnes flash C18:
• No deixeu que la columna s’assequi després d’utilitzar -la.
• Elimineu tots els modificadors orgànics arrossegant la columna amb un 80% de metanol o acetonitril en aigua per a 3 - 5 cvs.
• Guardeu la columna al dissolvent de rentat esmentat anteriorment amb accessoris finals al seu lloc.
Per a les columnes de mida gran per sobre dels 220g, l'efecte tèrmic és evident en el procés de pre-equilibri. Es recomana establir el cabal al 50-60% del cabal suggerit en el procés de pre-equilibri per evitar un efecte tèrmic evident.
L’efecte tèrmic del dissolvent mixt és més evident que el dissolvent únic. Agafeu el sistema de dissolvents ciclohexà/acetat d’etil com a exemple, es suggereix que utilitzeu el 100% de ciclohexà en el procés de preequilibri. En completar el preequilibri, es pot realitzar l'experiment de separació segons el sistema de dissolvents preestablerts.
Per a sepaflashTMLes columnes de sèrie estàndard, els connectors utilitzats són Luer-Lock i Luer-Slip. Aquestes columnes es podrien muntar directament als sistemes de combinació d'Isco.
Per a la sèrie HP SEPAFlash, les sèries enllaçades o les columnes de la sèrie IloKTM, els connectors utilitzats són Luer-Lock i Luer-Lock. Aquestes columnes també es podrien muntar en els sistemes de combinació d'Isco mitjançant adaptadors addicionals. Per obtenir els detalls d’aquests adaptadors, consulteu el document Santai Adapter Kit per a 800G, 1600G, 3 kg de columnes flash.
El volum de la columna de paràmetres (CV) és especialment útil per determinar els factors d’escala. Alguns químics pensen que el volum intern del cartutx (o columna) sense material d’embalatge a l’interior és el volum de la columna. Tot i això, el volum d’una columna buida no és el CV. El CV de qualsevol columna o cartutx és el volum de l’espai no ocupat pel material preembalat en una columna. Aquest volum inclou tant el volum intersticial (el volum de l’espai fora de les partícules envasades) com la porositat interna de la partícula (volum de porus).
Les columnes flash d'alumina són una opció alternativa quan les mostres són sensibles i propenses a la degradació del gel de sílice.
La pressió posterior de la columna Flash està relacionada amb la mida de les partícules del material envasat. El material envasat amb una mida de partícula més petita donarà lloc a una pressió posterior més alta per a la columna Flash. Per tant, el cabal de la fase mòbil utilitzada en la cromatografia flash s'ha de baixar en conseqüència per evitar que el sistema flash deixi de funcionar.
La pressió posterior de la columna Flash també és proporcional a la longitud de la columna. El cos de la columna més llarg tindrà com a resultat una pressió posterior més gran per a la columna Flash. A més, la pressió posterior de la columna flash és inversament proporcional a l'ID (diàmetre intern) del cos de la columna. Finalment, la pressió posterior de la columna Flash és proporcional a la viscositat de la fase mòbil que s’utilitza en la cromatografia flash.