Skakel die instrument aan en wag vir die vinnige "Readbare -silika sal begin oplos in die waterige oplossing van pH 9, hoewel baie stadig. In die oplosmiddel met pH laer as 9 is die kaal silika stabiel. As die pH van die oplosmiddel meer is as 9, sal die ontbinding vinniger word as die pH toeneem. Einde-bedekte.y ". Maak seker dat die iPad -netwerkverbinding korrek is, en dat die router aangeskakel is.
Volg hierdie stappe vir optimale suiwering met C18 -flitskolomme:
① Spoel die kolom met 100% van die sterk (organiese) oplosmiddel vir 10 - 20 CV's (kolomvolume), tipies metanol of asetonitril.
② Spoel die kolom met 50% sterk + 50% waterig (as bymiddels benodig word, sluit dit in) vir nog 3 - 5 CV's.
③ Spoel die kolom met die aanvanklike gradiëntvoorwaardes vir 3 - 5 CV's.
Vir kolomgrootte tussen 4G en 330G word standaard Luer -aansluiting in hierdie flitskolomme gebruik. Vir kolomgrootte van 800G, 1600G en 3000G, moet addisionele aansluitstukke gebruik word om hierdie groot flitskolomme op die flitchromatografiestelsel te monteer. Raadpleeg die dokument Santai -adapterstel vir 800G, 1600G, 3 kg flitskolomme vir meer besonderhede.
Vir die normale fase -kolom word dit aanbeveel om die mobiele fase te gebruik waar die verhouding metanol nie meer as 25%is nie.
Oor die algemeen word dit aanbeveel om die mobiele fase te gebruik waar die verhouding van die polêre oplosmiddels nie meer as 5%is nie. Die polêre oplosmiddels sluit DMSO, DMF, THF, TEA ens.
Soliede monsterlading is 'n nuttige tegniek om die monster te laai wat op 'n kolom gesuiwer moet word, veral vir monsters van lae-oplosbaarheid. In hierdie geval is Ilok Flash -patroon 'n baie geskikte keuse.
Oor die algemeen word die monster in 'n geskikte oplosmiddel opgelos en op 'n soliede adsorbant geadsorbeer, wat dieselfde kan wees as wat in flitskolomme gebruik word, insluitend diatomaceous aarde of silika of ander materiale. Na verwydering / verdamping van die residuele oplosmiddel, word die adsorbent bo -op 'n gedeeltelik gevulde kolom of in 'n leë soliede laaipatroon geplaas. Raadpleeg die gebruikershandleiding vir meer inligting vir meer inligting vir meer inligting vir meer inligting.
Kolomvolume is ongeveer gelyk aan dooie volume (VM) wanneer u die addisionele volume in die buise wat die kolom met die inspuiter en die detektor verbind, ignoreer.
Dead Time (TM) is die tyd wat benodig word vir die eluering van 'n ongeërgde komponent.
Dead Volume (VM) is die volume van die mobiele fase wat benodig word vir die eluering van 'n onberispelike komponent. Dooie volume kan bereken word deur die volgende vergelyking: vm = f0*tm.
Onder die bogenoemde vergelyking is F0 die vloeitempo van die mobiele fase.
Nee, silika-silika is onoplosbaar in enige organiese oplosmiddel wat algemeen gebruik word.
Die silika -flitskolomme is weggooibaar en vir enkelgebruik, maar met behoorlike hantering kan die silika -cartridges hergebruik word sonder om die werkverrigting in te boet. In die orde moet die silika -flitskolom eenvoudig deur saamgeperste lug gedroog word of met isopropanol gestoor word.
Behoorlike berging sal toelaat dat C18 -flitskolomme hergebruik word:
• Moet nooit toelaat dat die kolom uitdroog na die gebruik nie.
• Verwyder alle organiese wysigers deur die kolom met 80% metanol of asetonitril in water vir 3 - 5 CV's te spoel.
• Bêre die kolom in bogenoemde spoeloplosmiddel met eindtoebehore op sy plek.
Vir die groot grootte kolomme bo 220G is die termiese effek duidelik in die proses van voor-ewewig. Dit word aanbeveel om die vloeitempo op 50-60% van die voorgestelde vloeitempo in die pre-ewewigsproses in te stel om duidelike termiese effek te voorkom.
Die termiese effek van gemengde oplosmiddel is duideliker as enkeloplosmiddel. Neem die oplosmiddelstelsel-sikloheksaan/etielasetaat as voorbeeld, daar word voorgestel dat 100% sikloheksaan gebruik in die pre-ewewigsproses. Wanneer die pre-ewewig voltooi is, kan die skeidingseksperiment volgens die vooraf ingestelde oplosmiddelstelsel uitgevoer word.
Vir SepaFlashTMStandaardreekse kolomme, die verbindings wat gebruik word, is luer-lock in en Luer-gly uit. Hierdie kolomme kan direk op ISCO se Combiflash -stelsels gemonteer word.
Vir die SepaFlash HP-reeks, gebonde reekse of ILOKTM-reeks kolomme, is die verbindings wat gebruik word, LUER-Lock in en Luer-Lock Out. Hierdie kolomme kan ook via ekstra adapters op ISCO se Combiflash -stelsels gemonteer word. Raadpleeg die dokument Santai Adapter Kit vir 800G, 1600G, 3 kg flitskolomme vir die besonderhede van hierdie adapters.
Die parameter-kolomvolume (CV) is veral nuttig om opskaalfaktore te bepaal. Sommige chemici dink die interne volume van die patroon (of kolom) sonder verpakking is die kolomvolume. Die volume van 'n leë kolom is egter nie die CV nie. Die CV van enige kolom of patroon is die volume van die ruimte wat nie deur die materiaal wat vooraf in 'n kolom gepak is, beset nie. Hierdie volume bevat beide die interstisiële volume (die volume van die ruimte buite die verpakte deeltjies) en die deeltjie se eie interne poreusheid (porievolume).
Die alumina -flitskolomme is 'n alternatiewe opsie wanneer die monsters sensitief is en geneig is tot afbraak op silikagel.
Die rugdruk van die flitskolom hou verband met die deeltjiegrootte van verpakte materiaal. Die verpakte materiaal met kleiner deeltjiegrootte sal 'n hoër rugdruk vir die flitskolom tot gevolg hê. Daarom moet die vloeitempo van die mobiele fase wat in flitschromatografie gebruik word, dienooreenkomstig verlaag om te voorkom dat die flitstelsel stop.
Die agterdruk van die flitskolom is ook eweredig aan die lengte van die kolom. Langer kolomliggaam sal lei tot hoër rugdruk vir die flitskolom. Verder is die rugdruk van die flitskolom omgekeerd eweredig aan die ID (interne deursnee) van die kolomliggaam. Laastens is die rugdruk van die flitskolom eweredig aan die viskositeit van die mobiele fase wat in flitchromatografie gebruik word.